漿膜腔積液脫落細胞學檢查的假陽性和假陰性原因分析

孫大菊,張文杰,高　鴿

(吉林大學中日聯誼醫院 病理科細胞室，吉林 長春130033)

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漿膜腔積液脫落細胞學檢查的假陽性和假陰性原因分析

孫大菊,張文杰*,高鴿

(吉林大學中日聯誼醫院 病理科細胞室，吉林 長春130033)

漿膜腔積液脫落細胞學檢查是臨床診斷惡性腫瘤的最常用方法，其結果快速、準確可靠、費用低、特異性高，受到臨床廣泛認可。但由于技術及細胞學形態等多方面因素影響，有時造成假陽性和假陰性診斷[1]。本文為了總結經驗，提高漿膜腔積液的陽性檢出率，現將本細胞室2014年10月-2014年12月份的684例漿膜腔積液細胞學標本進行假陽性和假陰性原因分析，希望對細胞學工作者及臨床醫師有所幫助。

1資料與方法

1.1一般資料

收集我院2014年10月份-2014年12月份門診和住院病人送檢的684例漿膜腔積液標本，其中胸水474例，腹水168例，心包積液42例。684例漿膜腔積液檢出惡性細胞194例，所有陽性結果標本經肺穿刺活檢、淋巴結穿刺、纖支鏡刷片、肺泡灌洗液、痰、骨髓細胞學及手術病理結合臨床資料證實為惡性腫瘤。

1.2方法

684例標本均由臨床醫師抽取統一送檢，標本新鮮，靜置一段時間，取底層沉渣標本全部離心，以保證最大限度的收集到更多的腫瘤細胞，提高陽性檢出率。將每例標本置2管(各50 ml)以2 500 r/min離心7 min，棄去上清液，取沉淀物涂片。如為血性標本，離心后吸去上清液，取白細胞層涂片。本細胞室為提高陽性檢出率，采取手工涂片和ZCR-A自動沉降液基細胞制片兩種方法。手工涂片采用拉片法，厚薄均勻，輕輕涂片4-8張。ZCR-A自動沉降液基細胞制片的過程：將吸取的離心后沉淀物放入保存液內，在振蕩器上震蕩5min以上，將標本放入離心機1500轉/分離心5 min，將離心后的保存液內液體及刷子輕輕倒掉，依次放入制片機沉降倉座中，按照機器操作步驟運行。取材結束標本潮干后在95%乙醇中固定15-30 min，巴氏染色，鏡檢。

2結果

2.1腫瘤細胞類型分析

684例漿膜腔積液標本查出惡性細胞194例，檢出率占28.36%。194例陽性標本中，上皮性惡性腫瘤最多(腺癌163例占84.0%，小細胞癌12例占6.2%，癌型未定的6例占3.1%，鱗癌4例占2.1%)；非上皮性惡性腫瘤較少(惡性間皮瘤7例占3.6%，惡性淋巴瘤2例占1.0%)，見表1。

表1　194例惡性漿膜腔積液細胞學分型(構成比%)

2.2細胞假陽性和假陰性結果分析

684例漿膜腔積液標本中，脫落細胞學檢查陽性194例，其中假陽性2例，假陽性率1.0%；陰性490例，其中假陰性8例，假陰性率1.6%。由于標本送檢不及時、取材、制片、染色技術造成細胞形態改變和特殊的排列方式、閱片不認真等多因素，造成某些陽性標本漏診，陰性標本誤診為陽性，從而引起假陽性和假陰性現象，見表2。

表2　漿膜腔積液標本脫落細胞學檢查結果

3討論

漿膜腔積液脫落細胞學的陽性檢出率各家報道不一[2，3]，本組684例患者共檢出惡性細胞194例，檢出率占28.36%。后經臨床和追蹤尋訪證實，2例為假陽性，8例為假陰性；陽性率占96.0%(192/200)，假陰性率占1.1%，假陽性率占0.3%。造成漿膜腔積液脫落細胞學檢查假陽性和假陰性的原因很多，現逐一分析，以期對我們日后工作有所借鑒。

3.1惡性漿膜腔積液的原發灶分析

惡性漿膜腔積液中腫瘤細胞主要是上皮性來源，其中腺癌占84.0%，以原發灶周圍型肺腺癌為主，因腫瘤位于肺周邊部，容易穿透胸膜脫落在胸水中；其次是乳腺癌、肺轉移癌和胃癌。腹水多為消化系統腫瘤來源，其次為卵巢癌。肝癌雖然伴血性腹水很常見，但癌細胞檢出率卻很低，可能與肝癌的位置及肝癌患者多伴有肝硬化有關，腹水多由門脈高壓引起。心包積液中的腺癌多為肺癌引起，其次為乳腺癌。漿膜腔積液鱗癌較少見，本組病例共檢出4例，占2.1%，可能與鱗癌的生長部位有關，一般多以中央型為主，較少形成漿膜腔積液。本組病例中小細胞癌12例，占6.2%；另外有6例我們定為特殊分化的癌(癌型不定)，后經組織病理和臨床證實2例為腺鱗癌，2例為大細胞癌，1例為肝細胞癌，1例為白血病。

3.2漿膜腔積液的細胞形態假象分析

惡性漿膜腔積液最常見的為腺癌，雖然不同組織的腺癌細胞在積液中的形態千變萬化，但都有著共同的形態學特征。即細胞呈三維立體的團狀或球狀、核畸形、核仁大、核漿比增大、胞漿可見粘液分泌空泡。本組病例中有2例心包積液疑診為腺癌，細胞雖有核異質改變但仔細觀察無三維立體結構，后經多次送檢并結合臨床證實為間皮細胞增生，我們也有文獻報道過這種情況[4]。有4例腺癌患者為臨床經過化療后，導致惡性腫瘤細胞褪變漏診。

漿膜腔積液中鱗癌比較少見，主要由于其未有明顯特征，容易漏診。一般在炎性壞死細胞背景下，可見少數小的癌細胞，外形多樣可呈梭形、纖維形、圓形及多邊形，核畸形明顯。本組有4例，3例為肺鱗癌，1例為宮頸鱗癌轉移。另外有2例我們診斷為陰性，經復診以后發現有少許鱗癌細胞。

小細胞癌又稱燕麥細胞癌，在漿膜腔積液中常以小簇狀細胞團分布，細胞核常為三角形、短梭形及卵圓形，細胞漿很少幾乎不見。由于細胞小量少而容易漏診。本組有2例經復診后發現小細胞癌隱藏于淋巴細胞或間皮細胞的背景中，導致假陰性診斷。

我們有1例淋巴瘤的患者以大量的胸、腹水為主要首發表現，鏡下滿視野大量單克隆增生的幼稚淋巴細胞，具有明顯的異型性。細胞大，核染色質深、粗，核分裂像多見，胞質較少，后經取淋巴結組織病理證實為彌漫性大B細胞淋巴瘤。

惡性間皮瘤是漿膜原發的腫瘤，有的細胞形態類似腺癌，但惡性間皮瘤一般彌漫分布，核多位于細胞中央，細胞間分界清楚。間皮瘤患者大部分不能根據積液的細胞學涂片確診，最后診斷依賴于X線、B超、組織病理及免疫組化。本組有7例通過病理組織切片，并加做細胞免疫化學染色CEA、Vimentin、EMA確診。

3.3漿膜腔積液檢查假陽性和假陰性原因探討

(1)假陽性：標本放置時間過長，細胞退化脹大，胞漿出現空泡，誤將間皮細胞增生診斷為腺癌；標本未及時固定，誤將退化的淋巴細胞診斷為小細胞癌或淋巴瘤[5]；細胞染色過深，也容易造成過診斷；卵巢交界性腫瘤腹水中有異型增生的細胞，有時誤診為腺癌，要仔細觀察。(2)假陰性：標本離心時轉速低，時間短；取材時血細胞過多，有效腫瘤細胞少或沒有；涂片過厚，染色過淺；固定液不及時更換，使細胞成分脫落；閱片人不仔細或缺少經驗，造成漏診；以上原因[6,7]均可造成假陰性診斷。

參考文獻：

[1]陳鳳，劉崇敏，王彩霞.良惡性胸腹水病理檢測中的研究進展[J].中國醫藥指南，2014,12(25):78.

[2]劉邦榮，吳麗穎，楊玉蓮，等.658例胸腹水細胞病理學診斷分析[J].中國現代醫學雜志，2006,16(16):2503.

[3]何艷芬，王建屏，方安平，等.胸腹水病理檢查臨床應用[J].內蒙古中醫藥，2013，(36):99.

[4]盧興國.體液脫落細胞學檢驗診斷[J].臨床檢驗雜志，2012,1(3):181.

[5]梁華兵，盧興國.胸腹水癌細胞形態學檢驗診斷的實踐與體會[J].檢驗醫學，2013,28(6):557.

[6]郭建華，伍亞云，陳煒等.不同性狀胸腹水放置時間和取樣部位對細胞學檢查結果的影響[J].微循環學雜志，2010,20(4)51.

[7]羅雪林，陳桂蘭，林永忠.漿膜腔積液中的細胞形態學假象分析[J].中外健康文摘，2010,7(26):10.

*通訊作者

文章編號：1007-4287(2016)07-1130-02

(收稿日期：2015-06-24)