CD64指數與C反應蛋白在新生兒細菌感染性疾病中的臨床診斷價值

吳金斌，鄒德學，周　逵，晏耀明

(北京大學深圳醫院檢驗科，廣東深圳 518036)

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CD64指數與C反應蛋白在新生兒細菌感染性疾病中的臨床診斷價值

吳金斌，鄒德學，周逵，晏耀明

(北京大學深圳醫院檢驗科，廣東深圳 518036)

摘要:目的探討聯合檢測中性粒細胞CD64指數和C反應蛋白(CRP)水平在新生兒細菌感染性疾病中的診斷價值。方法選取北京大學深圳醫院新生兒科2015年1～12月收治的139例新生兒進行回顧性分析，分為細菌感染組72例和病毒感染組67例，并選取健康新生兒50例作為健康對照組，對3組間CD64指數、CRP水平及其陽性率進行比較分析，并對CD64指數和CRP診斷細菌感染的敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值進行分析。結果細菌感染組CD64指數和CRP水平與病毒感染組和健康對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，細菌感染組治療后CD64指數和CRP水平均明顯下降，差異有統計學意義(P<0.05)。CD64指數診斷細菌感染的敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別為91.7%、92.5%、93.0%、91.2%，明顯高于CRP，差異有統計學意義(P<0.05)。CD64指數與CRP呈正相關(r=0.781，P<0.01)。結論聯合檢測CD64指數和CRP水平，有助于新生兒細菌感染的早期診斷、鑒別診斷及對抗感染療效的考核，且CD64指數的診斷效率明顯優于CRP。

關鍵詞:CD64；C反應蛋白；新生兒；細菌感染

新生兒感染性疾病是新生兒期常見的一種疾病，細菌感染是引起嬰兒死亡的主要原因，且新生兒缺乏特異體征和癥狀，易與其他疾病混淆，早期診斷和及時治療是決定預后的關鍵[1]。但由于免疫功能尚未成熟等原因，對新生兒感染的早期臨床診斷仍缺乏一種有效、準確的檢測手段。為進一步提高新生兒感染的早期診斷率，探討一種快速、可靠的方法，本研究對北京大學深圳醫院新生兒科2015年1～12月收治的疑似感染患兒進行了中性粒細胞CD64指數和C反應蛋白(CRP)聯合檢測，來探討CD64指數和CRP在新生兒細菌感染診斷中的實用價值，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料研究對象為2015年1～12月北京大學深圳醫院新生兒科收治的新生兒共139例，細菌感染組72例(經細菌培養、病原學檢測證實)，其中男47例，女35例，平均日齡8.3 d(1～29 d)，平均胎齡38.5周(37～42周)，敗血癥27例，非敗血癥感染45例，為局部感染患兒，包括感染性肺炎、臍炎、尿路感染、腸炎、膿皰瘡；病毒感染組67例(經相關血清學抗體檢測證實)，其中男39例，女28例，平均日齡8.1 d(1～28 d)，平均胎齡38.2周(37～42周)，嬰幼兒急疹29例，皰疹性咽峽炎21例，輪狀病毒腸炎11例，病毒性腦炎4例，蕁麻疹2例。選取同期來本院體檢無感染癥狀健康新生兒50例作為健康對照組，其中男30例，女20例，平均日齡8.4 d(1～28 d)，平均胎齡38.7周(38～42周)。3組新生兒在年齡、性別等方面差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法入院當天應用抗菌藥物、抗病毒藥物治療之前，采集外周血用于CD64、CRP檢測。檢測CD64的流式細胞儀為美國BD FACS Calibur，配套分析軟件由美國VERITY SOFTWARE HOUSE提供，取50 μL全血+20 μL CD64 PE/CD45 Percp抗體(美國BD公司配套產品)混勻放置，以IgG1-FITC為同型對照。暗處放置30 min后加FACS溶血劑2 mL，再暗處放置15 min后上機檢測。上機前先以標準熒光微球校準儀器，每次上機檢測都使用同一電壓條件。每份標本計數10 000個細胞，計算中性粒細胞上CD64的平均熒光強度與淋巴細胞上CD64的平均熒光強度之比，即CD64指數。同時滿足以下2個條件：(1)以檢測標本的淋巴細胞作為內部陰性對照；(2)以檢測標本的單核細胞作為內部陽性對照，單核細胞CD64指數須≥3.5 MFI。CRP檢測采用免疫比濁法，儀器為Beckman Coulter公司生產的IMMAGE免疫分析儀和配套試劑，操作按儀器說明書進行，≥8 mg/L為陽性。

2結果

2.1各組CD64指數、CRP水平比較組間兩兩比較顯示，細菌感染組治療前外周血中性粒細胞CD64指數、CRP水平明顯高于病毒感染組和健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；病毒感染組和健康對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。細菌感染組經抗感染治療7 d后，CD64指數、CRP水平較治療前明顯下降，差異有統計學意義(P<0.05)，但與健康對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　　各組CD64指數、CRP水平比較

注：與健康對照組比較，△P<0.05；與病毒感染組比較，○P<0.05；與治療7 d后比較,◇P<0.05。

2.2各組CD64指數、CRP 陽性率比較以CD64指數≥3.5 MFI、CRP≥8 mg/L為陽性標準，細菌感染組CD64指數、CRP陽性率明顯高于病毒感染組和健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，且CD64指數陽性率高于CRP陽性率；病毒感染組和健康對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2　　各組CD64指數和CRP陽性率比較

注：與健康對照組比較，△P<0.05；與病毒感染組比較，○P<0.05。

表3　　CD64指數和CRP水平對新生兒細菌感染診斷效能比較[%(n/n)]

2.3CD64指數、CRP水平對新生兒細菌感染診斷效能比較以CD64指數≥3.5 MFI、CRP≥8 mg/L為陽性標準，χ2檢驗結果顯示，CD64指數診斷新生兒細菌感染的敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值均明顯高于CRP，差異均有統計學意義(P<0.01)。Pearson相關分析顯示，72例細菌感染新生兒CD64指數與CRP水平呈直線正相關(r=0.781，P<0.01)。見表3。

3討論

細菌感染性疾病在臨床中發病率高，且各種疾病均易繼發細菌性感染，由于抗菌藥物的濫用，耐藥菌株的不斷出現，使細菌感染的發病率有持續增長的趨勢。目前實驗室傳統的細菌感染檢測指標主要是白細胞計數(WBC)、CRP、血培養，WBC檢測方法簡便、快捷，被認為是鑒別細菌感染的常規項目，但用于診斷小兒細菌感染的準確性很低，特別是新生兒，由于新生兒應激反應及免疫系統尚未發育完善，外周血WBC不能準確反映其嚴重程度。CRP特異性低，很多非感染性疾病均會升高。血培養雖然是細菌感染的金標準，但陽性率不高，且培養所需時間長(需要3～7 d)，不能達到早期診斷的目的[2]。近年來，應用流式細胞儀檢測外周血中性粒細胞表面CD64分子的表達，在診斷細菌感染中的研究日益增多，并證實其是一個準確、客觀的新指標，且升高程度與感染的嚴重程度成正比[3]。

CD64是相對分子質量為72 000的跨膜糖蛋白，能識別免疫球蛋白的Fc段，表達受細胞因子的調控，起到連接體液免疫和細胞免疫的橋梁作用。可通過抗體依賴性細胞毒作用、細胞吞噬作用、免疫復合物清除作用實現對病原微生物的清除。當機體受到細菌感染時中性粒細胞CD64表達在4～6 h內就會增高，在新生兒感染時顯著升高，在全身細菌感染時升高尤為明顯[4]。大量表達的CD64與其配體結合后，啟動并放大免疫反應，將細胞外信號傳遞到細胞內，導致細胞活化，產生吞噬作用、抗體依賴細胞介導細胞毒作用、細胞因子的釋放，從而清除病原菌[5]。CRP是一種急性時相反應蛋白，是非特異性炎癥指標。正常情況下僅少量存在于人體體液中。健康人的血清CRP參考區間為0.057～8.200 mg/L[6]，但在組織損傷、炎癥、手術后CRP濃度顯著升高，甚至可達到上千倍，對于感染、各種炎癥過程、組織損傷與壞死的判斷、監測及病情評估與療效考核，都具有重要的臨床價值。本研究結果顯示，CD64指數和CRP水平在細菌感染組呈現高表達，在病毒感染組和健康對照組不增高，細菌感染組與健康對照組、病毒感染組比較，差異具有統計學意義(P<0.05)，可以作為新生兒細菌感染診斷和鑒別診斷的重要指標。細菌感染組經抗菌藥物治療7 d后，CD64指數和CRP水平有明顯下降，與治療前比較，差異具有統計學意義(P<0.05)，表明CD64指數和CRP水平可以作為抗菌藥物治療有效性的指標，用于衡量和指導臨床判斷抗生素治療和停藥的時機，為選擇有效藥物和撤除治療提供重要的依據[7]。有文獻報道，CD64作為一種敏感的監測感染狀態的指標，可用于監測抗菌藥物的療效，抗菌藥物治療有效時下降至正常水平，無效時沒有明顯變化[8]。

本研究結果表明，細菌感染組外周血中性粒細胞CD64指數和CRP的陽性率分別為91.7%和73.6%，明顯高于病毒感染組和健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，且CD64指數的陽性率高于CRP；病毒感染組和健康對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。有文獻報道，CD64診斷感染性疾病時敏感度和特異度都比較高(90%～100%)，是診斷感染的早期敏感指標[9]。但由于新生兒免疫系統、肝臟發育不完善，在受到感染或嚴重感染后產生的CRP量較少，且升高較緩慢，所以當受細菌性感染時陽性率較低，敏感度較差。本研究結果顯示，CD64指數診斷新生兒細菌感染的敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值分別為91.7%、92.5%、93.0%和91.2%，均明顯高于CRP ，差異有統計學意義(P<0.01)。說明CD64指數對診斷新生兒細菌感染，判斷病情、評價預后具有很高的臨床價值。CRP是臨床常用的診斷細菌感染的指標，但其敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值均較低，本研究中分別為73.6%、74.6%、75.7%和72.5%，其診斷價值均低于CD64[10]。另外，CD64的表達與性別和年齡無關，僅在細胞激活時表達，并且檢測快速(<1 h)，樣本需要量少。Pearson相關分析顯示，72例細菌感染患新生兒CD64指數與CRP水平呈直線正相關(r=0.781，P<0.01)，提示在急性炎性反應早期兩者可能由相似的機制觸發[11]，其具體機制尚有待進一步的確定，作為炎癥指標用于感染性疾病的診斷有臨床價值。

綜上所述， CD64指數和CRP的測定對診斷新生兒細菌感染性疾病均有一定的幫助，聯合檢測CD64指數和CRP對新生兒細菌感染的早期診斷、療效評估和避免濫用抗菌藥物等有較好的指導意義，在鑒別細菌性感染和病毒性感染時可作參考。通過比較認為，CD64指數具有較高的陽性率、敏感度、特異度、陽性預測值和陰性預測值，是一項高敏感、高特異的診斷感染性疾病的早期標志物，在新生兒感染性疾病中具有較高價值，動態監測其水平，對治療效果的評價具有較高的臨床實用價值，值得推廣。

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作者簡介：吳金斌，男，副主任檢驗技師，主要從事急診檢驗與管理研究。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.008

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)14-1920-03

(收稿日期：2016-01-05修回日期：2016-03-18)

Clinical diagnostic value of CD64 index and CRP in newborn bacterial infectious diseases

WUJinbin，ZOUDexue，ZHOUKui，YANYaoming

(DepartmentofClinicalLaboratory,ShenzhenHospitalofPekingUniversity,Shenzhen,Guangdong518036，China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the diagnostic value of combined detection of neutrophil CD64 index and C reactive protein (CRP) levels in newborn bacterial infectious diseases.MethodsThe retrospective analysis was performed on 139 neonates admitted to the neonatal department of our hospital from January to December 2015， including 72 cases in the bacterial infection group and 67 cases in the viral infection group， and 50 healthy neonates were selected as the control group.The levels of CD64 and CRP and the positive rates were compared among 3 groups and analyzed.The sensitivity,specificity,positive predictive value and negative predictive value of CD64 and CRP in the diagnosis of bacterial infection were analyzed.ResultsThe CD64 index and CRP levels had statistical difference between the bacterial infection with the viral infection group and normal control group (P<0.05)，the CD64 index and CRP levels after treatment in the bacterial infection group were significantly decreased,the differences were statistieally significant(P<0.05).The sensitivity,specificity,positive predictive value and negative predictive value of CD64 index in the diagnosis of bacterial infection were 91.7%,92.5%,93.0% and 91.2% respectively，which were significantly higher than those of CRP， the differences were statistically significant (P<0.05)。CD64 index was positively correlated with CRP (r=0.781，P<0.01).ConclusionThe combined detection of CD64 index and CRP level helps to early diagnosis,differential diagnosis and the therapeutic effect evaluation of bacterial infection in neonates， moreover the diagnostic efficiency of CD64 is obviously better than that of CRP.

Key words:CD64；C reactive protein；newborn；Bacterial infection