常規劑量肝素鋰和氟化鈉抗凝對毛細管電泳法檢測HbA1c的影響*

陳　群，黃　華，吳愿如，李立波，鄧寶佳

(廣東省深圳市龍崗區第二人民醫院檢驗科　518112)

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常規劑量肝素鋰和氟化鈉抗凝對毛細管電泳法檢測HbA1c的影響*

陳群，黃華，吳愿如，李立波，鄧寶佳

(廣東省深圳市龍崗區第二人民醫院檢驗科518112)

摘要:目的探討常規劑量的肝素鋰、氟化鈉抗凝劑對毛細管電泳法檢測糖化血紅蛋白(HbA1c)的影響。方法應用Capillarys 2 Flex Piercing毛細管電泳儀檢測全血標本HbA1c濃度，以EDTA-K2抗凝標本的檢測結果為對照，分別比較肝素鋰和氟化鈉抗凝標本檢測結果的差異性。結果肝素鋰、氟化鈉抗凝標本分別與EDTA-K2抗凝標本比較，毛細管電泳法測定HbA1c濃度差異均無統計學意義(P>0.05)，且肝素鋰、氟化鈉抗凝標本HbA1c檢測結果與EDTA-K2抗凝標本結果具有相關性(P<0.001)。結論使用常規劑量的肝素鋰、氟化鈉抗凝均未對毛細管電泳法檢測HbA1c產生影響，常規劑量的肝素鋰、氟化鈉抗凝標本均適用于毛細管電泳法檢測HbA1c。

關鍵詞:肝素鋰；氟化鈉；抗凝；毛細管電泳；HbA1c

眾所周知，糖化血紅蛋白(HbA1c)是評價糖尿病血糖控制水平的首選指標。近年來，許多國家糖尿病學會和WHO推薦將其作為糖尿病的首選診斷標準，拓寬HbA1c的應用范圍，更顯其重要性。2012年，毛細管電泳法作為一種新的HbA1c檢測方法被首次推出利用[1]。在方法學性能評價方面已有相關報道[2-4]。一些研究表明，該法對常見的異常血紅蛋白抗干擾能力較好并可提示地中海貧血，有較理想性能，逐漸被臨床應用。然而目前對該法所使用的全血標本在不同抗凝類型、貯存條件等方面影響因素研究尚未有報道。因此，本實驗使用常規劑量肝素鋰、氟化鈉抗凝劑處理的標本對該法檢測HbA1c是否產生影響進行初步探討，以評價肝素鋰、氟化鈉抗凝標本的適用性。

1資料與方法

1.1一般資料收集2015年6～12月來自深圳市龍崗區第二人民醫院門診就診糖尿病患者42例及非糖尿病健康體檢者34例，共76例納入研究者的EDTA-K2、肝素鋰和氟化鈉3種抗凝劑抗凝的全血標本；所有納入研究者均被提前告知并征得本人同意。納入研究者年齡28～71歲，平均(42.6±10.3)歲；糖尿病患者病程5～13年，平均(7.8±2.3)年；糖尿病患者中合并腎病者17例。

1.2方法采用毛細管電泳法檢測全血標本HbA1c濃度，以EDTA-K2抗凝標本HbA1c檢測結果為對照，分別比較肝素鋰和氟化鈉抗凝標本HbA1c檢測結果的差異性，初步分析使用肝素鋰、氟化鈉抗凝對毛細管電泳法檢測全血標本HbA1c濃度的適用性。

1.2.1標本采集深圳市保安醫療用品有限公司生產EDTA-K2抗凝2 mL真空采血管(抗凝劑濃度1.5 mg/mL)、肝素鋰抗凝5 mL真空采血管(抗凝劑濃度15.0 U/mL)、氟化鈉抗凝2 mL真空采血管(抗凝劑濃度1.5 mg/mL)；遵守采血操作規程，嚴格按照抗凝劑比例采集一定量的全血，要求無凝固。

1.2.2檢測系統法國Sebia公司Capillarys 2 Flex Piercing毛細管電泳儀及配套的試劑(緩沖液批號22074、溶血素批號02094)、校準品(批號18034、19034)、質控品(批號27063、28063)。

1.2.3操作要求嚴格遵守各項標準操作規程操作進行；確保儀器處于良好狀態，經過校準并確認質控在控；標本采集后1～2 h內完成檢測，并且每份標本均進行重復測定2次取均值進行統計學處理。

2結果

2.13種抗凝標本HbA1c濃度檢測結果分布情況本次研究所納入評價標本的HbA1c濃度范圍4.6%～11.5%，均有分布于正常和異常值各區間段范圍，見表1。

表1　　毛細管電泳法重復2次測定3種抗凝各76份標本HbA1c均值結果

2.2肝素鋰抗凝對HbA1c濃度檢測的影響毛細管電泳法測定EDTA-K2和肝素鋰2種抗凝標本HbA1c濃度分別為(6.112±1.734)%、(6.109±1.700)%，差異無統計學意義(P>0.05)；2種抗凝標本HbA1c濃度有相關性(r=0.997，P<0.001)。

2.3氟化鈉抗凝對HbA1c濃度檢測的影響毛細管電泳法測定EDTA-K2和氟化鈉2種抗凝標本HbA1c濃度分別為(6.112±1.734)%、(6.135±1.712)%，差異無統計學意義(P>0.05)；2種抗凝標本HbA1c濃度有相關性(r=0.997，P<0.001)。

3討論

Capillarys 2 Flex Piercing毛細管電泳儀檢測原理是讓帶電的分子在特定pH值的堿性緩沖液中根據它們的電泳移動性進行高壓分離，該方法具有很高的分辨率，通過使用堿性pH緩沖液，正常和異常(或變異體)血紅蛋白按下列順序檢測出來，從陰極到陽極依次為：A2/C、E、S/D、F、A0、其他Hb(包括次要HbA1)及A1c，在血紅蛋白所特有的吸收波長415 nm下，在毛細管的陰極端可以直接準確地檢測，從而對HbA1c組分進行相對定量分析。

本研究從日常工作實際情況出發，分析常規肝素鋰和氟化鈉抗凝采血管采集標本對毛細管電泳法檢測HbA1c的影響，從而發掘這項檢測方法更多實用性特點。對所納入的研究對象均經過篩選，選取各種糖尿病患者(考慮納入研究者年齡構成、病程長短及兼顧是否并發其他疾病)的標本，HbA1c濃度在各正常和異常值區間段范圍均有分布，同時不超出Capillarys 2 Flex Piercing毛細管電泳儀檢測線性，在一定程度上滿足用于干擾評價的標本濃度取值合理性[5-9]。

本次研究發現，與廠家建議使用抗凝劑EDTA-K2抗凝標本比較，使用常規劑量的肝素鋰和氟化鈉抗凝時，毛細管電泳法檢測HbA1c結果與EDTA-K2抗凝標本檢測結果差異均無統計學意義(P>0.05)，且與EDTA-K2抗凝標本檢測結果具有相關性(P<0.001)，表明肝素鋰和氟化鈉對毛細管電泳法檢測HbA1c未造成干擾，這2種抗凝劑抗凝標本可適用于毛細管電泳法檢測HbA1c。

在日常工作中，肝素鋰、氟化鈉是日常主要抗凝劑用于臨床生物化學項目檢測標本的抗凝，本次研究發現肝素鋰、氟化鈉抗凝適用于毛細管電泳法檢測HbA1c，對于糖尿病患者需要同時檢查臨床生物化學項目和HbA1c濃度時均可避免多采血，特別是對于老年患容易接受，也便于采血。這也表明毛細管電泳法檢測HbA1c在一定程度上較傳統方法更便于臨床應用，更具優勢。

參考文獻

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[9]楊有業，張秀明．臨床檢驗方法學評價[M]．北京：人民衛生出版社，2008：196-234．

* 基金項目：廣東省深圳市龍崗區科技發展資金項目(YLWSF20150513163211044)。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.049

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)14-2013-02

(收稿日期：2016-01-22修回日期：2016-04-15)