新疆維吾爾族自身免疫性肝病患者自身抗體譜的研究分析*

羅德梅，趙建梅，張朝霞

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，烏魯木齊 830011)

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新疆維吾爾族自身免疫性肝病患者自身抗體譜的研究分析*

羅德梅，趙建梅，張朝霞△

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，烏魯木齊 830011)

目的分析新疆維吾爾族不同類型自身免疫性肝病患者的自身抗體陽(yáng)性率及其診斷意義。方法選取2012年10月至2014年10月該院門診和住院的維吾爾族自身免疫性肝病患者51例，其中自身免疫性肝炎(AIH)20例(AIH組)，原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)31例(PBC組)，采用間接免疫熒光法、免疫印跡法檢測(cè)其血清生化指標(biāo)和自身抗體，并進(jìn)行比較分析。結(jié)果兩組各項(xiàng)生化指標(biāo)水平均明顯增高，其中兩組丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)、堿性磷酸酶(ALP)及免疫球蛋白M(IgM)水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。AIH組患者抗核抗體(ANA)、抗平滑肌抗體(SMA)、抗肝腎微粒體-1(LKM-1)抗體、抗肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原1型(LC-1)抗體、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗體及抗線粒體抗體(AMA)陽(yáng)性率分別為65.0%、40.0%、10.0%、5.0%、10.0%、5.0%；PBC組患者ANA、AMA及其M2亞型(AMA-M2)的陽(yáng)性率分別為61.3%、100.0%和96.8%。結(jié)論新疆地區(qū)維吾爾族自身免疫性肝病患者的自身抗體譜具有一定的特征，自身抗體譜的檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝病診斷、分型及鑒別診斷具有重要的意義。

自身免疫性肝炎；原發(fā)性膽汁性肝硬化；自身抗體；維吾爾族

自身免疫性肝病是一類病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確，由免疫介導(dǎo)的自身免疫反應(yīng)過(guò)度造成的慢性肝膽組織損傷，主要包括自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)，原發(fā)性膽汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis， PBC)，原發(fā)性硬化性膽管炎(primary sclerosing cholangitis，PSC)等。自身免疫性肝病的發(fā)生機(jī)制、病理變化、臨床表現(xiàn)、自身抗體各有其特點(diǎn)，因此診斷需綜合臨床、組織學(xué)、血清生化、自身抗體及遺傳特征，并排除病毒性肝炎[1]。筆者回顧性分析了新疆地區(qū)51例維吾爾族自身免疫性肝病患者的生化指標(biāo)和自身抗體檢測(cè)結(jié)果，以探討新疆維吾爾族自身免疫性肝病患者自身抗體的陽(yáng)性率、特征和意義。

1　資料與方法

1.1一般資料2012年10月至2014年10月本院門診和住院的維吾爾族自身免疫性肝病患者51例，其中AIH患者20例(AIH組)，男3例、女17例，平均年齡(41.0±26.3)歲，參照文獻(xiàn)[2]將AIH患者分為AIH-Ⅰ型15例、AIH-Ⅱ型3例和AIH-Ⅲ型2例；PBC患者31例(PBC組)，男4例、女27例，平均年齡(48.0±10.2)歲。所有患者各項(xiàng)病毒感染指標(biāo)均為陰性，并排除藥物、酒精性、遺傳代謝性肝病。AIH診斷符合美國(guó)肝臟病學(xué)會(huì)2011年修訂的AIH診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，AIH的分型依據(jù)自身抗體，PBC診斷符合美國(guó)肝臟病學(xué)會(huì)診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。

1.2方法

1.2.1血清生化指標(biāo)檢測(cè)采用美國(guó)Backman LX20全自動(dòng)生化儀及配套試劑，Immage免疫速率散射比濁儀及配套試劑測(cè)定免疫球蛋白(Ig)，包括IgG、IgA、IgM。

1.2.2自身抗體檢測(cè)采用間接免疫熒光法分別檢測(cè)抗核抗體(ANA)、抗線粒體抗體(AMA)、抗平滑肌抗體(SMA)；采用免疫印跡法檢抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)、抗肝腎微粒體-1(LKM-1)抗體、抗肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原1型(LC-1)抗體及抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗體。檢測(cè)試劑盒均由德國(guó)

表1　兩組生化及Ig指標(biāo)水平比較±s)

表2　兩組血清學(xué)自身抗體陽(yáng)性率[n(%)]

歐蒙公司生產(chǎn)，嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書操作。

2　結(jié)　果

2.1兩組生化及Ig指標(biāo)比較各項(xiàng)生化及Ig指標(biāo)水平在AIH組和PBC組患者中均明顯升高；兩組丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)、堿性磷酸酶(ALP)及IgM水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而兩組天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總膽紅素(T-Bil)、IgG及IgA水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2兩組血清學(xué)自身抗體陽(yáng)性率AIH組與PBC組患者ANA陽(yáng)性率分別為65.0%、61.3%，SMA陽(yáng)性率分別為40.0%、0.0%，抗LKM-1抗體陽(yáng)性率分別為10.0%、0，抗LC-1抗體陽(yáng)性率分別為5.0%、0，抗SLA/LP抗體陽(yáng)性率分別為10.0%、0，AMA陽(yáng)性率分別為5.0%、100.0%，AMA-M2陽(yáng)性率分別為0、96.8%。見(jiàn)表2。

3　討　論

自身免疫性肝病以往認(rèn)為多見(jiàn)于歐美白種人，中國(guó)人群患病率較低。中國(guó)人中慢性肝病發(fā)病率較高，但以病毒性肝炎為主。近年來(lái)研究表明，一部分肝功能異常的非病毒性肝炎患者可能是自身免疫性肝病[5]。隨著自身抗體檢測(cè)在實(shí)驗(yàn)室的普及，以及臨床醫(yī)生對(duì)該類疾病認(rèn)識(shí)的逐步提高，該病發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，一方面可能是由于實(shí)際發(fā)病人數(shù)增加，另一方面是由于對(duì)該類疾病的認(rèn)識(shí)和診斷技術(shù)提高。

AIH的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，目前認(rèn)為主要是遺傳易感性，以及環(huán)境誘發(fā)導(dǎo)致天然免疫耐受被破壞，誘導(dǎo)產(chǎn)生以T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)為主的針對(duì)肝臟抗原的免疫反應(yīng)，造成肝臟組織的破壞及慢性炎癥的形成[6]。AIH可發(fā)生于兒童和各年齡階段的成年人，尤以女性多見(jiàn)。本研究女性患者多于男性，除Ⅱ型患者以兒童多見(jiàn)外，發(fā)病年齡集中在50～60歲。AIH起病較為隱匿，常無(wú)明顯癥狀，多在查體或生化檢查時(shí)發(fā)現(xiàn)血清轉(zhuǎn)氨酶升高[7]。本研究結(jié)果顯示：AIH患者ALT和AST均明顯升高，提示肝臟組織細(xì)胞受損較重，ALT、γ-GT、ALP及IgM在AIH組與PBC組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與文獻(xiàn)[6]報(bào)道的結(jié)果一致。

自身抗體檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝病的診斷和分型具有重要意義。依據(jù)血清自身抗體的不同，AIH分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。ANA和(或)SMA抗體陽(yáng)性是診斷Ⅰ型AIH的特征指標(biāo)。有研究報(bào)道，ANA和SMA抗體水平不足以提示疾病的發(fā)展和預(yù)后，高滴度(1∶160)的ANA和SMA抗體同時(shí)出現(xiàn)對(duì)AIH的診斷率達(dá)100%，表明ANA和SMA均不參與AIH的發(fā)病機(jī)制，其對(duì)疾病的診斷價(jià)值大于預(yù)后[8]。單一的自身抗體陽(yáng)性對(duì)診斷AIH具有局限性，需綜合其他的臨床指標(biāo)。本研究中Ⅰ型占AIH患者的75%(15/20)，ANA和SMA抗體的陽(yáng)性率分別為65.0%和40.0%，與文獻(xiàn)[9]報(bào)道的結(jié)果相似。Ⅱ型AIH標(biāo)志性抗體為抗LC-1和(或)抗LKM-1抗體。有研究報(bào)道，抗LC-1抗體可作為唯一自身抗體存在，也可與抗LKM-1同時(shí)存在于AIH中，對(duì)AIH診斷具有特異性[10]。抗LC-1抗體陽(yáng)性的AIH有明顯的肝細(xì)胞炎癥，病變也相對(duì)較重，其抗體滴度與AST水平平行，是判斷疾病活動(dòng)性的敏感指標(biāo)，對(duì)疾病的早期治療有很大的幫助，因此在AIH的臨床治療中應(yīng)對(duì)其進(jìn)行密切觀察。本研究中3例Ⅱ型AIH患者均為維吾爾族兒童，符合Ⅱ型AIH多見(jiàn)于兒童(2～14歲)的特征，且在歐洲國(guó)家相對(duì)常見(jiàn)。本研究中LKM-1、抗LC-1抗體陽(yáng)性率分別為10.0%和5.0%，與H?ner Zu Siederdissen 等[11]報(bào)道一致，考慮是否和本地區(qū)人群的遺傳易感基因或致病因素及環(huán)境誘發(fā)因素有關(guān)，有待積累更多的病例進(jìn)一步研究。抗LKM抗體有3種亞型，其中抗LKM-1抗體的靶抗原被證實(shí)為細(xì)胞色素P4502D6，因其與丙型肝炎病毒(HCV)基因序列有部分同源性，故少數(shù)丙型肝炎患者血清中也可出現(xiàn)抗LKM-1抗體。提示臨床對(duì)于丙型肝炎標(biāo)志物和自身抗體同時(shí)陽(yáng)性的患者，在確定臨床治療方案時(shí)需謹(jǐn)慎[12]。Ⅲ型AIH的標(biāo)志性抗體是抗SLA/LP抗體，該抗體是近年來(lái)備受關(guān)注的AIH靶抗原之一[13]，其可能與AIH 的發(fā)病機(jī)制有關(guān)[2]。本研究中1例抗SLA/LP抗體陽(yáng)性患者均診斷為Ⅲ型AIH，抗SLA/LP抗體陽(yáng)性率為10.0%，低于國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道的20%～40%，是否存在種群差異有待進(jìn)一步研究。抗SLA/LP抗體對(duì)AIH具有很高的特異性，幾乎僅見(jiàn)于AIH，并且在病毒性肝炎患者中表現(xiàn)為陰性，因此具有確診意義。由此可見(jiàn)，在ANA、SMA、抗LC-1抗體及抗LKM- l抗體檢測(cè)均為陰性或低滴度的肝病患者中進(jìn)行抗SLA/LP抗體檢測(cè)，可以減少漏診及誤診，使不典型的AIH患者得到及時(shí)有效的治療，此外抗SLA/LP抗體陽(yáng)性與AIH病情嚴(yán)重程度也存在一定聯(lián)系。

PBC是以肝內(nèi)小管進(jìn)行性、非化膿性、破壞性炎癥為特征的慢性膽汁淤積性疾病，為典型的自身免疫性疾病，主要發(fā)生于中年女性，男女比例為1∶9。高滴度(1∶40)AMA是PBC的特征血清學(xué)標(biāo)記物，其靶抗原位于線粒體內(nèi)膜，主要抗體為IgG。根據(jù)抗原在線粒體內(nèi)膜或外膜上的位置與對(duì)胰蛋白酶的敏感性和電泳特性，可將AMA分為9個(gè)亞型(M1～M9)，其中M2亞型只在肝臟的膽管上皮表達(dá)，在肝細(xì)胞上無(wú)表達(dá)，對(duì)PBC的診斷特異度高。本研究中PBC患者AMA陽(yáng)性率為100.0%，AMA-M2陽(yáng)性率為96.8%，與文獻(xiàn)[14]報(bào)道一致。雖然AMA對(duì)PBC具有高度特異性，但其分型和效價(jià)并不與PBC的嚴(yán)重程度及病情發(fā)展相關(guān)。PSC以男性多見(jiàn)，是一種自身免疫性疾病導(dǎo)致的膽道狹窄和炎癥，確診需依賴內(nèi)鏡膽管造影術(shù)(ERC)，PSC患者患膽管癌的風(fēng)險(xiǎn)為7%～13%，臨床應(yīng)重視ERC細(xì)胞學(xué)標(biāo)本的檢測(cè)[15]。

綜上所述，肝臟自身抗體檢測(cè)在疾病的診斷中占據(jù)不可或缺的地位，本研究中維吾爾族自身免疫性肝病患者的自身抗體陽(yáng)性率、陽(yáng)性類別與國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道存在差異，呈現(xiàn)一定的民族特征性。因此，對(duì)肝功能異常的非病毒性肝炎患者，尤其是維吾爾族肝功能異常的患兒，進(jìn)行自身抗體檢測(cè)對(duì)輔助診斷自身免疫性肝病及其分型、鑒別診斷都具有重要意義。目前，尚不清楚自身抗體是否參與自身免疫性肝病的發(fā)病，部分自身抗體的滴度與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)，如抗SLA/LP抗體、抗LC-1抗體等，提示自身抗體的存在可能直接與肝臟損傷相關(guān)[2]。AIH患者尤其維吾爾族患者自身抗體的出現(xiàn)是否與疾病分期、疾病活動(dòng)狀況及預(yù)后判斷有關(guān)，還有待進(jìn)一步研究。總之，提高自身抗體檢測(cè)的重視度尤其維吾爾族AIH患者的自身抗體檢測(cè)，加強(qiáng)對(duì)AIH的認(rèn)識(shí)并以此形成清晰的診斷思路，對(duì)此類疾病的診斷和治療都有著重要的意義。

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Analysis on autoantibodies spectrum of Uygur patients with autoimmune liver disease in Xinjiang*

LuoDemei，ZhaoJianmei，ZhangZhaoxia△

(MedicalLaboratoryCenter,FirstAffiliatedHospital,XinjiangMedicalUniversity,Urumqi,Xinjiang830011,China)

ObjectiveTo analyze the positive rate of autoantibodies in Xinjiang Uygur patients with different types of autoimmune liver disease and its diagnostic value.MethodsFifty-one Uygur outpatients and inpatients with of autoimmune liver disease in our hospital from October 2012 to October 2014 were selected,including 20 cases of autoimmune hepatitis(AIH,AIH group) and 31 cases of primary biliary cirrhosis(PBC,PBC group).The indirect immunofluorescence and Western blotting were used to detect the serum biochemical indexes and autoantobodies,and the comparative analysis was performed.ResultsThe levels of various biochemical indexes in the two groups were increased,in which ALT,γ-GT,ALP and IgM levels had statistical difference between the two groups(P<0.05).The positive rates of ANA,SMA,LKM-1 antibody,LC-1 antibody,SDLA/LP antibody and AMA in the AIH group were 65.0%,40.0%,10.0%,5.0%,10.0% and 5.0% respectively;the positive rates of ANA,AMA and M2 subtype(AMA-M2) in the PBC group were 61.3%,100.0% and 96.8% respectively.ConclusionThe autoantibodies spectrum in Xinjiang Uygur patients with autoimmune liver diseases has certain characteristics.The autoantibodies spectrum detection has an important significance for the diagnosis,classification and differential diagnosis of autoimmune liver diseases.

autoimmune hepatitis；primary biliary cirrhosis；autoantibody；the Uygur people

論著·臨床研究10.3969/j.issn.1671-8348.2016.19.010

新疆維吾爾自治區(qū)自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2014211C047)。作者簡(jiǎn)介：羅德梅(1971-)，副主任檢驗(yàn)師，本科，主要從事自身免疫性疾病和自身抗體研究。△

，E-mail：285715300@qq.com。

R575

A

1671-8348(2016)19-2623-03

2016-01-10

2016-03-22)