常規尿液分析復檢規則再評估、修訂及驗證*

賴利華，楊春燕，傅雙雙

(重慶醫科大學第一附屬醫院檢驗科，重慶 400016)

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常規尿液分析復檢規則再評估、修訂及驗證*

賴利華，楊春燕，傅雙雙

(重慶醫科大學第一附屬醫院檢驗科，重慶 400016)

目的探討尿沉渣檢測結果與顯微鏡復檢的符合性，對使用的顯微鏡復檢規則進行再評估，以此為依據修訂復檢規則并進行驗證。方法回顧性分析2013年7月24日至9月31日共10 528例使用UF流水線檢測的住院患者尿標本顯微鏡復檢的符合性，對復檢規則進行再評估，并修訂復檢規則。另采用雙盲法，檢測2014年11月22日至2015年1月17日451例患者隨機尿標本，對修訂復檢規則進行驗證。結果共2 337例患者尿標本顯微鏡復檢記錄陽性，各項目的復檢比例由高到低依次為：白細胞(30.5%)、病理管型(30.0%)、紅細胞(25.2%)、結晶(24.1%)、酵母樣菌(21.5%)、小圓細胞(0.2%)。采用雙盲法驗證修改后的復檢規則，復檢規則修改后對451例患者尿標本的總復檢率由31.8%下降為23.1%，小圓細胞假陽性率由28.8%下降為9.5%，病理管型假陽性率由7.8%下降為6.4%。結論對已使用的復檢規則進行再評估，對較高假陽性率的檢測項目進行符合性修訂、驗證非常必要，修訂后的復檢規則在符合假陰性率小于5%的前提下，降低了復檢率和假陽性率，可提高檢測效率，縮短標本周轉時間。

尿復檢規則；再評估；驗證

本院檢驗科2008年建立了Sysmex尿沉渣和尿干化學檢測分析的顯微鏡復檢規則[1]。由于本院是一所大型綜合性三級甲等醫院，過去每日依據復檢規則進行的復檢標本數量較大，并且發現尿沉渣分析儀檢測病理管型(PC)、紅細胞(RBC)、小圓細胞(SRC)、酵母樣菌(YLC)和白細胞(WBC)等項目具有較高的假陽性[2]。因此，筆者對復檢規則進行再評估，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料(1)復檢規則再評估：回顧性分析2013年7月24日至9月31日本院檢驗科實驗室信息系統(laboratory information system，LIS)記錄的10 528例住院患者尿標本，其中2 337例患者有復檢記錄，對各項檢測數據進行符合性分析[3]。(2)擬修訂復檢規則的驗證：在2014年11月22日至2015年1月17日，隨機用雙盲法[1]檢測451例住院患者尿標本。

1.2儀器與試劑Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣自動分析儀(以下簡稱UF-1000i)和配套試劑(日本Sysmex公司)，Arkray AX-4030尿干化學分析儀(以下簡稱AX-4030)和配套試劑(日本Arkray公司)，細胞計數板及光學顯微鏡。

1.3方法

1.3.1檢測方法每日開機后對UF-1000i和AX-4030進行室內質控，在控后按照標準操作規程(SOP)文件操作，對尿標本進行尿干化學和尿沉渣檢測。根據本實驗室制訂的復檢規則[1]，對需復檢的標本進行顯微鏡鏡檢，并按照SOP要求進行復檢記錄。

1.3.2復檢規則再評估對復檢記錄結果進行統計、分析及評估，依據評估分析情況，對復檢規則進行符合性修訂并驗證。

1.3.3擬修訂復檢規則的驗證采用雙盲法，隨機選取UF-1000i檢測后2 h內的新鮮尿液標本混勻后，用牛鮑氏計數板進行顯微鏡計數，以顯微鏡計數結果為標準，按照修訂前后復檢規則，統計各自的復檢率及各項目的真陽性率、假陽性率、假陰性率及真陰性率。

1.4結果判斷

1.4.1復檢率依據尿液標本檢測總數和顯微鏡復檢記錄，對UF-1000i檢測結果與顯微鏡復檢情況進行記錄，統計出各個檢測項目的復檢率。

1.4.2判斷標準以顯微鏡鏡檢結果為判斷標準，確定各分析項目的檢測結果[4]。(1)陽性：尿液分析儀檢測結果高于參考區間；(2)陰性：尿液分析儀檢測結果在參考區間內；(3)真陽性：尿沉渣分析儀與鏡檢結果陽性符合；(4)假陽性：尿沉渣分析儀結果為陽性，而鏡檢結果陰性；(5)真陰性：尿沉渣分析儀與鏡檢結果陰性符合；(6)假陰性：尿沉渣分析儀結果為陰性而鏡檢結果為陽性。

1.5統計學處理采用Excel2003進行數據處理，計數資料以例數或百分率表示。

2　結　果

2.1尿標本檢測復檢原因分布及各項目比例2013年7月24日至9月31日本院檢驗科LIS共記錄檢測10 528例住院患者尿標本，其中有2 337例患者標本進行了顯微鏡復檢，包括WBC、PC、RBC、結晶(X′tal)、YLC和SRC項目。尿標本檢測復檢原因由高到低依次為：WBC(30.5%)、PC(30.0%)、RBC(25.2%)、X′tal(24.1%)、YLC(21.5%)、SRC(0.2%)。2 337例患者復檢記錄中的復檢原因分布及各項目比例，見圖1、表1。

圖1　2 337例患者尿標本復檢原因分布

檢測項目復檢數(n)復檢比例(%)WBC71330.5PC70130.0RBC58825.2X'tal56224.0YLC50221.5SRC40.2

*：同一份標本可以有1個或幾個項目同時復檢，因此復檢數之和大于2 337份。

2.2各檢測項目結果的符合情況對2 337例患者尿標本復檢記錄結果進行統計分析，以顯微鏡復檢結果為標準與尿沉渣分析儀檢測結果進行對比，統計出各檢測項目結果的符合情況，并計算出各項目真陽性率、真陰性率、假陽性率和假陰性率。假陽性最高為PC，達27.8%；其次為RBC和YLC，分別為16.8%、16.6%；由于SRC假陽性率太高常常未記錄，導致本組資料SRC假陽性率最低(0.2%)，并非真實結果。各檢測項目真陽性率、真陰性率、假陽性率和假陰性率，見表2。

2.3修改后復檢規則根據上述假陽性較高的項目進行修訂。修改前與修改后復檢規則，見表3。

2.4修改后復檢規則驗證

2.4.1復檢規則修改前后復檢率比較在2014年11月22日至2015年1月17日，隨機用雙盲法檢測451例住院患者尿標本并記錄，統計分析修改前后復檢規則的復檢情況。依據修改前復檢規則，復檢數為182例，復檢率為31.8%，依據修改后復檢規則，復檢數為104例，復檢率為23.1%，復檢率明顯下降。

表2　2337例患者尿標本復檢記錄的符合情況[n(%)]

表3　修改前與修改后復檢規則

EC：上皮細胞。

2.4.2復檢規則修改前后需復檢的尿標本復檢原因分析分析雙盲法驗證的451例患者尿標本記錄，對修訂前后復檢規則下需復檢的尿標本進行復檢原因分析。同一份標本可以有1個或幾個項目同時復檢，因此修訂前復檢規則下復檢數之和大于182份，修訂后復檢規則下復檢數之和大于104份。依照修訂后復檢規則，SRC復檢例數從131例下降到44例，復檢率由29.1%下降為9.8%；檢測項目PC復檢例數從37例下降到31例，復檢率由8.2%下降為6.9%；其他檢測項目復檢例數均無變化。見圖2。

圖2　驗證的451例患者尿標本修訂前后

2.4.3修訂前后復檢規則下各檢測項目假陽性率與假陰性率分析雙盲法驗證的451例患者尿標本記錄，比較修訂前后復檢規則下各檢測項目的假陽性率與假陰性率。依據修訂后復檢規則，SRC假陽性率從28.8%下降為9.5%，PC假陽性率由7.8%下降為6.4%，YLC假陽性率無變化仍為3.5%。PC假陰性率略有升高，由0.0%上升為0.2%，而SRC和YLC的假陰性率無變化，且均小于5%。見表4。

表4　451例患者驗證標本修訂前后復檢規則下的 假陽性率與假陰性率[n(%)]

3　討　論

本院檢驗科2013年7月24日至9月31日共檢測10 528例住院患者尿標本，其中有記錄進行顯微鏡復檢的患者2 337例，分析復檢記錄得知各項目復檢原因從高到低依次為：WBC(30.5%)、PC(30.0%)、RBC(25.2%)、X′tal(24.1%)、YLC(21.5%)，可能與住院患者標本有關。對2 337例患者復檢的陽性記錄進行符合性分析顯示，檢測項目PC、RBC和YLC的假陽性率分別為27.8%、16.8%、16.6%，表明臨床工作中花費了大量的人力和時間來甄別這些假陽性結果。

分析復檢記錄中PC假陽性率高達27.8%，顯微鏡復檢發現影響因素主要有：黏液絲、上皮細胞(EC)、X′tal、WBC等[5-7]。分析原因可能為：(1)黏液絲具有一定的長條形狀，易被誤認為透明管型，當其黏附一定數量的細胞、細菌或其他雜質時，便被儀器誤認為PC；(2)大量細胞或細菌連續成串通過檢測孔時可被誤認為PC；(3)妊娠婦女的尿液標本極易出現假管型，且數值較高；(4)有些EC的大小、粗細類似管型；(5)長方體的磷酸銨鎂結晶及非晶形尿酸鹽結晶堆積，類似于管型時儀器均會提示有管型，造成假陽性。另外，尿沉渣分析儀不能區分管型的種類，還需顯微鏡復檢明確類型，才能為臨床診斷提供更準確的參考。鑒于此，考慮聯合尿蛋白定性及黏液絲檢測結果修訂復檢規則，以降低復檢率[8]。

分析復檢記錄中RBC的假陽性為16.8%。顯微鏡復檢發現RBC的影響因素有：X′tal、YLC、細菌、脂肪滴、卵磷脂小體等[9-11]。分析原因可能為：(1)大小形態與RBC相似的草酸鈣結晶(尤其是單水草酸鈣)，在散點圖中與紅細胞交叉分布，極易造成假陽性；(2)酵母樣菌、脂肪滴或卵磷脂小體、數個非晶形結晶如RBC，通過儀器分析，其熒光強度和散射光強度與RBC相似，可對RBC計數造成干擾。

分析復檢記錄中YLC假陽性率為16.6%。顯微鏡復檢發現YLC的影響因素有: RBC、X′tal、精子、脂肪滴等[11]。分析原因可能為：(1)腎小球來源的RBC有出芽現象，易被誤認為YLC；(2)大量RBC連續成串通過檢測孔時，可被誤認為YLC；(3)較多單水草酸鈣結晶且大小不均，易被誤認為YLC；(4)精子在尿中易被誤認為YLC。考慮聯合RBC信息(儀器提示RBC來源)修訂復檢規則來降低復檢率。

由于SRC的假陽性率太高[12]，SRC的復檢規則是SRC大于4個/微升則需要復檢，臨床工作中發現，當儀器檢測SRC結果為5、6、7個/微升時，鏡檢SRC常為陰性。對照LIS的修改記錄發現，復檢SRC陰性的標本，直接將檢測結果修改后并未記錄，使本組資料中2 337例患者尿標本的復檢記錄中，僅有4例記錄，使本組資料中SRC總復檢率偏低，復檢記錄假陽性率不真實。顯微鏡復檢發現影響因素包括大量EC或WBC干擾SRC計數，以及某些大小似SRC的結晶均可以造成干擾。考慮聯合EC檢測結果修訂復檢規則，可降低SRC復檢率。

鑒于第4版《全國臨床檢驗操作規程》中，對復檢規則的具體內容沒有明確規定，而多數單位的復檢規則初次建立時多引用儀器制造單位提供的數據進行驗證。由于每個實驗室的檢測儀器與環境條件不同，其復檢規則內容也可以不同。筆者依據對復檢記錄的評估分析后擬出需要修訂的復檢規則有3條：(1)PC大于2.5個/微升修訂為PC大于2.5個/微升，蛋白質大于1+或PC大于2.5個/微升，黏液絲小于5個/微升。(2)SRC大于4個/微升修訂為SRC大于10個/微升，EC小于40個/微升。(3)YLC大于5個/微升修訂為YLC大于5個/微升，RBC提示信息為均一型；YLC大于30個/微升，RBC提示信息為小細胞或混合型。驗證修訂后的復檢規則，總復檢率下降明顯，從31.8%下降為23.1%；修訂后復檢規則下PC復檢率由8.2%下降為6.9%，SRC復檢率由29.1%下降為9.8%，YLC復檢率無變化。制訂復檢規則常常希望在滿足假陰性率的前提下，盡量降低假陽性率。本研究結果顯示，修改復檢規則后，PC假陽性率由7.8%下降為6.4%，SRC假陽性率由28.8%下降為9.5%，YLC假陽性率無變化仍為3.5%。雖然各檢測項目的假陰性率略有上升，但均小于5%，符合中國合格評定國家認可委員會(China National Accreditation Service for Conformity Assessment，CNAS)CNAS-CL41文件[13]及《臨床實驗室醫療機構管理辦法》[14]要求。修訂后的復檢規則可降低部分項目的復檢率，縮短標本周轉時間(turn-around time，TAT)，提高了常規尿液檢測的工作效率。

綜上所述，筆者通過對顯微鏡復檢記錄進行分析，發現各檢測項目的復檢比例，了解尿液分析儀檢測結果的假陽性情況，并且對假陽性較高的復檢規則進行再評估、修訂并驗證。通過驗證結果分析，得出修訂后的復檢率降低，部分項目的假陽性率已有降低，且滿足各檢測項目假陰性率低于5%，符合由CNAS發布的CNAS-CL41[13]及相關文件[14]規定：假陰性率小于5%。通過上述報告筆者認為，對實驗室制訂的尿液檢測復檢規則進行不定期分析再評估非常必要，以評估分析為依據對復檢規則進行修訂，修訂后的復檢規則必須進行驗證。修訂后的聯合復檢規則可以降低復檢率和部分項目的假陽性率，從而減少臨床工作強度，縮短檢測時間，提高檢驗效率。

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·經驗交流·10.3969/j.issn.1671-8348.2016.19.033

國家臨床重點專科建設項目經費資助[財社2010(305)號]。作者簡介：賴利華(1962-)，主管技師，本科，主要從事尿液檢測結果、血液細胞檢測結果與臨床應用分析方面研究。

R446.12

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1671-8348(2016)19-2689-04

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2016-03-06)