不同臨床分期對原發性肝癌患者血清VEGF、TNF-α表達的影響*

李華偉林曉輝藍紅英

不同臨床分期對原發性肝癌患者血清VEGF、TNF-α表達的影響*

李華偉①林曉輝②藍紅英②

目的：探討原發性肝癌（PHC）患者血管內皮生長因子（VEGF）活性和腫瘤壞死因子-α （TNF-α）水平的變化及臨床意義。方法：選擇63例PHC患者，采用2001年中國抗癌協會肝癌專業委員會制定的PHC診斷及分期標準分為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期，另選取30例健康體檢者作為對照組，檢測所有受試者VEGF、TNF-α表達的情況。結果：不同分期PHC患者血清中VEGF、TNF-α含量均顯著高于對照組（P＜0.01）； Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期PHC患者VEGF、TNF-α含量逐漸增高；Ⅱ期VEGF、TNF-α含量明顯低于Ⅲ期 （P＜0.05）；Ⅳ期VEGF、TNF-α水平顯著高于Ⅱ期 （P＜0.01）。結論：VEGF、TNF-α的表達水平可以作為判斷PHC發生發展、分化程度及轉移的檢測指標。

原發性肝癌； 肝癌分期； 血管內皮因子； 腫瘤壞死因子-α

First-author’s address：Shenzhen City Baoan District Songgang People’s Hospital，Shenzhen 518105，China

原發性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是指發生在肝細胞或肝內膽管細胞的腫瘤［1］。新生血管的形成對于肝癌細胞的惡性轉化及遠處擴散至關重要［2］，血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF） 是目前已知的、調節血管形成的關鍵因子，特異性很高［3］。腫瘤壞死因子-α （tumor necrosis factor-α，TNF-α）是重要的前炎性細胞因子，具有抗腫瘤作用［4-5］。本研究通過觀察PHC患者血清VEGF及TNF-α水平，探討VEGF和TNF-α水平的變化與PHC臨床分期的關系，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料 選擇2011年8月-2015年8月本院收治的63例PHC患者，均經AFP及肝臟CT證實為PHC，其中男43 例，女20例，年齡28～79歲，平均（51.27±7.43）歲。采用2001年中國抗癌協會肝癌專業委員會制定的PHC診斷及分期標準［6］確診肝癌并分為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期，所有患者受試前均未接受化學治療、放射治療、免疫治療和手術治療。其中肝癌Ⅱ期14例，Ⅲ期26例，Ⅳ期23例。隨機抽選健康體檢者30例作為對照組，其中男16例，女14例。年齡26～77歲，平均（53.75±7.32） 歲。經實驗室檢查無乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等病毒感染，無心臟病、慢性支氣管肺炎等重要臟器疾病，無腫瘤家族病史。各組研究對象性別、年齡比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2檢測方法 清晨采集受試者空腹靜脈血5 mL，分離血清，分裝，置-20 ℃冰箱保存備用。根據說明書上的步驟進行各項檢測。采用定量ELISA 法測定血清中VEGF的含量，試劑盒由上海森雄科技實業有限公司提供；采用酶聯免疫吸附法測定血清中TNF-α含量，試劑盒由北京中杉金橋生物技術有限公司提供；操作嚴格按照產品說明書進行。所有標本均為復管檢測。

1.3統計學處理 應用SPSS 18.0 統計學軟件處理數據，計量資料以（±s）表示，兩兩比較采用t檢驗，計數資料比較采用 字2檢驗；檢驗水準α=0.05，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

不同分期PHC患者血清中VEGF、TNF-α含量均顯著高于對照組（P＜0.01）；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期PHC患者VEGF、TNF-α含量逐漸增高，Ⅱ期VEGF、TNF-α含量明顯低于Ⅲ期 （P＜0.05）；Ⅳ期VEGF、TNF-α水平顯著高于Ⅱ期 （P＜0.01）。見表1。

表1　所有對象血清VEGF與TNF-α水平比較（±s）pg/mL

表1　所有對象血清VEGF與TNF-α水平比較（±s）pg/mL

*與對照組比較，P＜0.01；△與Ⅱ期比較P＜0.05；#與Ⅲ期比較，P＜0.05

組別　VEGF　TNF-α對照組（n=30）　99.36±60.61　20.09±10.29Ⅱ期（n=14）　353.29±156.95*　126.37±86.36*Ⅲ期（n=26）　489.55±165.48*△　224.43±78.84*△Ⅳ期（n=23）　593.07±186.69*△#　296.22±73.97*△#

3　討論

近年來VEGF、TNF-α與原發性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）的關系正受到越來越多的關注。腫瘤的發展與血管的生成有著密切的關系，VEGF是高度保守的同源二聚體［7］，是目前發現的最強烈的血管生成因子，能促進血管生長，能刺激內皮細胞等其他細胞遷移和增殖，提高內皮通透性［8］。PHC過程與新生血管的生成密切相關，血清VEGF水平與PHC密切相關［9］，誘導腫瘤血管生成，維持腫瘤的繼續生長［10-12］，VEGF表達增加促進了PHC的發展［13-14］。

TNF-α是一種重要的促炎性細胞因子，由具有吞噬效應的免疫細胞和激活的淋巴細胞釋放，具有廣泛的生物活性，誘導免疫細胞產生和釋放白細胞介素類、干擾素等細胞因子，并可誘導肝細胞產生急性期反應蛋白，具有殺傷或者抑制腫瘤細胞、吞噬中性粒細胞和抗感染的能力，在正常值的情況下，對機體有利；若釋放過多，則可導致機體的病理性損傷［15-16］。在分子水平，刺激產生有助于腫瘤生長的物質，有可能導致腫瘤的生物學行為惡化［17］。

研究證實，在PHC中腫瘤的生長必然需要血管的生成，而VEGF在肝癌患者中的表達顯著高于患有肝臟疾病和正常人［18-20］。本研究結果顯示，PHC患者的 VEGF、TNF-α水平較對照組顯著升高。隨著PHC分期的進展，不同分期PHC患者血清中VEGF、TNF-α含量均顯著高于健康對照組（P＜0.01），Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期PHC患者VEGF、TNF-α含量逐漸增高；Ⅱ期VEGF、TNF-α含量明顯低于Ⅲ期 （P＜0.05）；Ⅳ期VEGF、TNF-α水平顯著高于Ⅱ期 （P＜0.01），提示血清VEGF、TNF-α水平與PHC的形成和發展有關。本研究結果還發現，正常健康人群血清VEGF、TNF-α含量較低，而PHC患者VEGF、TNF-α水平均顯著升高，反映了肝組織細胞不斷受腫瘤細胞遷移和增殖的誘導后，不斷產生大量VEGF、TNF-α，并在局部發揮其生物學作用，加重了PHC的進一步惡化；隨著VEGF、TNF-α水平的進一步升高，從而單獨或共同發揮持續性肝損害作用，促進PHC形成和發展。本研究結果顯示，VEGF、TNF-α水平與PHC嚴重程度呈正相關，與文獻［21］報道相符。

綜上所述，VEGF和TNF-α作為PHC發生發展的網絡調控因子，對PHC患者的腫瘤細胞遷移和增殖發揮重要作用，臨床醫師可考慮將TNF-α和IL-1β作為生物治療的靶點。

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Influence of Different Clinical Stages in Patients with Primary Liver Cancer on Serum VEGF，TNF-α Expression

LI Hua-wei
，LIN Xiao-hui，LAN Hong-ying.//Medical Innovation of China，2016，13（21）：104-106

Objective：To investigate the levels change and clinical significance of vascular endothelial growth factor（VEGF） activity and tumor necrosis factor alpha（TNF-α） in primary liver cancer（PHC）. Method：A total of 63 patients with PHC were chosen，using Chinese anti-cancer association professional committee of liver cancer in 2001 formulated the PHC diagnosis and staging of the standard is divided into phaseⅡ，phase Ⅲ，Ⅳ period，and the other 30 cases of healthy physical examination were selected as blank control group， VEGF and TNF-α of all objects were compared.Result：Different stages PHC patients serum VEGF and TNF-αlevels were significantly higher than that of blank control group（P＜0.01）.Phase Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ period PHC patients with VEGF，TNF-αcontent increased gradually.Phase Ⅱ VEGF，TNF-αwere significantly lower than those of phase Ⅲ（P＜0.05）.Phase Ⅳ VEGF and TNF-α were significantly higher than those of phase Ⅱ（P＜0.01）.Conclusion：The expression of VEGF and TNF-α can be used as a judgment of PHC detection index of the development，differentiation and metastasis.

Primary liver cancer； Cancer of liver stages； Vascular endothelial factor； Tumor necrosis factor-α

10.3969/j.issn.1674-4985.2016.21.031

深圳市寶安區科技計劃項目（2010596）
①廣東省深圳市寶安區松崗人民醫院 廣東 深圳 518105
②廣東省深圳市寶安區人民醫院

李華偉

2016-04-20） （本文編輯：程旭然）