濮陽縣金銀花道地性分析

王彥科

?

濮陽縣金銀花道地性分析

王彥科

河南省濮陽市食品監(jiān)督所 (濮陽 457000)

摘要：目的根據(jù)道地金銀花的成因，對濮陽縣金銀花進(jìn)行對比研究，探討濮陽縣金銀花的道地性。方法道地中藥材的形成主要取決于當(dāng)?shù)氐刭|(zhì)生態(tài)環(huán)境以及藥材本身的質(zhì)量品質(zhì)。從地質(zhì)背景系統(tǒng)、土壤理化性狀及元素含量，金銀花有效成分及微量元素含量等方面，將濮陽縣金銀花與道地產(chǎn)區(qū)河南新密、封丘及山東平邑進(jìn)行比較，對濮陽縣金銀花的道地性進(jìn)行分析。結(jié)果濮陽縣與新密、封丘、平邑在地理位置、氣候區(qū)劃、土壤理化性狀等方面具有明顯共性，土壤元素含量具有道地產(chǎn)區(qū)土壤養(yǎng)分標(biāo)識特征；濮陽縣金銀花有效成分含量與新密、封丘、平邑?zé)o明顯差異，所含微量元素具有道地金銀花的標(biāo)識特征。結(jié)論濮陽縣金銀花或可列為道地藥材。

關(guān)鍵詞：道地藥材；金銀花；地質(zhì)背景；生態(tài)環(huán)境；微量元素；有效成分；

金銀花是忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb.)[1]的干燥花蕾或帶初開的花，味甘性寒，功能清熱解毒、疏散風(fēng)熱，是常用大宗中藥材。濮陽縣素有種植金銀花的傳統(tǒng)[2]，近年來種植規(guī)模不斷擴(kuò)大。中醫(yī)治病用藥，向來講究道地藥材。現(xiàn)代中藥研究證明，道地產(chǎn)區(qū)金銀花的綠原酸、木犀草苷、總黃酮、常春藤皂苷元、齊墩果酸、環(huán)烯醚萜苷等有效成分的含量及微量元素Sr、Fe的含量，明顯髙于非道地產(chǎn)區(qū)；重金屬Cr、Pb含量明顯低于非道地產(chǎn)區(qū)；道地產(chǎn)區(qū)金銀花與非道地產(chǎn)區(qū)品質(zhì)的差異主要是道地產(chǎn)區(qū)特殊的地質(zhì)背景系統(tǒng)、土壤理化性質(zhì)及土壤元素狀況等生態(tài)因素綜合作用的結(jié)果[3～6]。為挖掘道地金銀花，本文將濮陽縣的地質(zhì)背景、土壤理化性質(zhì)及元素含量，濮陽金銀花有效成分及微量元素含量，與新密、封丘、平邑進(jìn)行了比較。結(jié)果如下。

1　地質(zhì)背景系統(tǒng)比較

見表1、表2。

表1　地質(zhì)背景系統(tǒng)比較之一

表2　地質(zhì)背景系統(tǒng)比較之二

2　土壤理化性質(zhì)及土壤元素含量比較

2.1材料與來源土壤樣品分別取自濮陽縣八公橋鎮(zhèn)、新密市牛店鎮(zhèn)、封丘縣陳橋鎮(zhèn)、平邑縣流峪鎮(zhèn)，以梅花形布點(diǎn)，用采土器取樣，在植株根系外圍，樹冠的滴水線附近，取0～30cm的耕層土，混勻，用4分法縮分，陰干，粉碎過篩，封裝供測定用。

2.2土壤理化性質(zhì)比較土壤pH值用水土比2.5∶1的pH計電位法測定；土壤鹽基飽和度(BS)用乙酸銨交換法-中和滴定法測定；土壤陽離子交換總量(CEC)用氯化鋇-硫酸強(qiáng)迫交換法測定[7]。結(jié)果見表3。

2.3土壤元素含量測定

2.3.1儀器及設(shè)備Agilent 7500ce電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，包括Babington高鹽霧化器；霧化室：石英雙通道，Piltier半導(dǎo)體控溫于(2±0.1)℃；矩管：石英一體化, 2.5mm中心通道；樣品錐：鎳材質(zhì)錐。MARS Xpress微波消解儀(美國CEM公司)，帶聚四氟乙烯消解罐。DKQ-3C智能控溫電加熱器。ED54多孔消煮爐。

2.3.2試劑25種元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液Part5183-4688 (Agilent，USA)；鍶標(biāo)準(zhǔn)溶液GBW (E) 080242 (100 μg·mL-1，中國計量科學(xué)研究院)：內(nèi)標(biāo)溶液 Part5188-6525 (Agilent, USA)，調(diào)諧溶液 Part5188-6564 (Agilent, USA)。硝酸、氫氟酸均為優(yōu)級純，水為超純水。

2.3.3含量測定按照參考文獻(xiàn)[8]方法測定。稱取土壤樣品0.1 g ( 精確至0.0001 g) 于聚四氟乙烯微波消解罐中，加入6.0 mL硝酸，浸泡過夜，再加2.0 mL氫氟酸，按微波消解程序上機(jī)消解，待消解完全并冷卻后，用超純水轉(zhuǎn)移至聚四氟乙烯材料的量瓶中，重量法定重至50 g，同時做試劑空白實(shí)驗(yàn)。按照文獻(xiàn)方法測定。結(jié)果見表3。

表3　土壤理化性質(zhì)及元素含量比較

3　品質(zhì)比較

3.1樣品來源2014年6月，分別在濮陽縣八公橋鎮(zhèn)、新密市牛店鎮(zhèn)、封丘縣陳橋鎮(zhèn)、平邑縣流峪鎮(zhèn)，現(xiàn)場采集人工栽培第一茬鮮金銀花，以紙盒盛裝帶回濮陽，一部分在烘箱內(nèi)烘干：先在35℃初烘4小時；再升溫至45℃烘10小時；最后升溫至55 ℃再烘9小時，移出烘箱，涼4小時，密封保存。一部分用去離子水淋洗3遍，稍晾后烘干。樣品經(jīng)鑒定均為忍冬(Lonicera japonica Thunb.)的花蕾。

3.2有效成分含量比較

3.2.1綠原酸含量測定

3.2.1.1儀器與試藥Agilent 1260 高效液相色譜儀，配有四元梯度泵和Agilent chenstation 數(shù)據(jù)工作站，編號DEABJ00471；Sartorius CPA 225D 分析天平，編號：26190055。綠原酸對照品(110753-201314)購自中國食品藥品檢定研究院。

3.2.1.2色譜條件色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18(250mm×4.6 mm，5μm)；流動相：乙腈-0.4%磷酸溶液(13∶87)，流速為1.0 ml·min-1，檢測波長327 nm，柱溫30 ℃；進(jìn)樣量10μL。

3.2.1.3含量測定按照2010版《中國藥典》一部金銀花項(xiàng)下含量測定項(xiàng)[1]測定。結(jié)果見表4。

3.2.2木犀草苷含量測定

3.2.2.1儀器與試藥儀器同3.2.1.1；木犀草苷對照品(111720-201307)購自中國食品藥品檢定研究院。

3.2.2.2色譜條件色譜柱：Agilent ZORBAX SB-phenyl(250mm×4.6 mm，5μm)。流動相A：乙腈；流動相B：0.5%冰醋酸；流速為1.0 ml·min-1，檢測波長350 nm，柱溫30 ℃；進(jìn)樣量10μL。

3.2.2.3含量測定按照2010版《中國藥典》一部金銀花項(xiàng)下含量測定項(xiàng)[1]測定。結(jié)果見表4。

3.2.3總黃酮含量測定

3.2.3.1儀器與試藥KQ5200DE 型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，UV-4100 紫外可見分光光度儀(日本日立公司)，Sartorius CPA 225D 分析天平；蘆丁對照品(100080-201408)購自中國食品藥品檢定研究院，其余試劑為分析純。

3.2.3.2含量測定按參考文獻(xiàn)[9]方法測定。精密稱定過60目篩金銀花細(xì)粉1.0 g，置具塞錐形瓶中，加入70%乙醇25 mL，超聲處理(功率100W，頻率40 kHz)3次，第1次1 h，第2、3 次各0.5 h，過濾，將3次提取濾液合并，定容至100mL。取上述樣液1 mL于25 mL容量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，搖勻即得供試液。取1 mL供試液置于25 mL的容量瓶中，加入50 g·L-1亞硝酸鈉溶液1 mL，搖勻，放置6 min；加入100 g·L-1硝酸鋁溶液1 mL，搖勻，放置6 min；加入40 g·L-1氫氧化鈉10 mL，水定容，搖勻，放置15 min，在波長510 nm處測定，回歸計算總黃酮含量。結(jié)果見表4。

3.2.4常春藤皂苷元、齊墩果酸含量測定

3.2.4.1儀器與試藥儀器同3.2.1.1。甲醇、乙腈為色譜純( Tedia公司,美國),水為純化水，其他試劑為分析純。對照品常春藤皂苷元(111733-201205)、齊墩果酸(110709-201206)購自中國食品藥品檢定研究院。

3.2.4.2色譜條件Agilent ZORBAX SB-C18(250mm×4.6 mm，5μm)；流動相A為乙腈-水(85∶15)，B為乙腈-0.4%磷酸溶液(13∶87)；梯度洗脫程序:從0～13min，A 100%；13～15min，B 0～100%；15～ 30 min，B 100%；30～60 min，A 50%。流速為1.0 mL·min-1; 檢測波長:0～13min，210 nm；30～60 min，350 nm。柱溫30℃; 進(jìn)樣量10μL。

3.2.4.3含量測定按參考文獻(xiàn)[10]方法測定。取過60目篩的金銀花細(xì)粉,精密稱取約0.5 g,置圓底燒瓶中,精密加入1mol·L-1硫酸溶液25 mL,再加入甲醇25 mL,稱定質(zhì)量,加熱回流2h后,放冷,用甲醇補(bǔ)足損失的質(zhì)量,搖勻,用微孔濾膜濾過,棄去初濾液,精密量取續(xù)濾液5mL,置50 mL量瓶中,用50%甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得供試液。依色譜條件測定峰面積，計算含量，結(jié)果見表4。

3.2.5當(dāng)藥苷、馬錢苷含量測定

3.2.5.1儀器與試藥KQ5200DE 型數(shù)控超聲波清洗器，其它儀器同3.2.1.1。乙睛為色譜純、分析純，甲醇為分析純， 水為純化水。對照品當(dāng)藥苷(111742-200501)、馬錢苷(111640-201005)均購自中國食品藥品檢定研究院。

3.2.5.2色譜條件色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18(250mm×4.6 mm，5μm)，流動相為乙腈-水(15:85)，流速1mL·min-1, 柱溫: 室溫, 檢測波長240nm,進(jìn)樣量10μL。

3.2.5.3含量測定按參考文獻(xiàn)[11]方法測定。取過60目篩的金銀花細(xì)粉3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，稱重，超聲處理(功率250W，頻率35kHz)45min，靜置，放冷，再稱定質(zhì)量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，棄去初濾液,取續(xù)濾液過0.45μm微孔濾膜，即得供試液。依色譜條件測定峰面積，計算含量，結(jié)果見表4。

表4　有效成分含量比較

3.3微量元素含量比較

3.3.1儀器、設(shè)備Agilent 7500ce電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，Perkinelmer OPTIMA -DV5300 電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀(美國PE公司)，MARS Xpress微波消解儀(美國CEM公司)，帶聚四氟乙烯消解罐。

3.3.2試劑同2.3.2

3.3.3含量測定按參考文獻(xiàn)[12]方法測定。取經(jīng)去離子水淋洗后烘干的金銀花適量，研成粉末。稱取樣品粗粉0.2 g，精密稱定，置微波消解罐中，加入硝酸4mL和鹽酸1mL，放入微波消解儀中進(jìn)行消解，取出，放冷，轉(zhuǎn)移至50mL聚四氟乙烯材料的量瓶中，用去離子水洗滌罐蓋及罐壁數(shù)次，并將洗液合并入量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，混勻待測。按照文獻(xiàn)方法測定，結(jié)果見表5。

表5　微量元素含量比較

4　討論

4.1濮陽縣地質(zhì)背景系統(tǒng)與金銀花道地產(chǎn)區(qū)具有明顯共性由地質(zhì)、氣候及生物等各因子組成的地質(zhì)背景系統(tǒng)制約著金銀花的分布、生長發(fā)育及產(chǎn)量和質(zhì)量，這是道地藥材具有強(qiáng)烈地域性之本質(zhì)[5]。由表1、表2知，濮陽縣與新密、封丘、平邑具有明顯的地域共性：分布在34°～35°的中緯度帶；海拔500m以下；土壤粘土礦物組分以水云母為主；年日照時數(shù)2300～2500h；年降水量600～800mm；年無霜期200～220d，土壤區(qū)劃、植被區(qū)劃、水文區(qū)劃、氣候區(qū)劃及氣候類型完全相同。與封丘的地域共性還有：處于黃河故道，為黃河沉積、沖積平原；成土母質(zhì)為黃河沖積物；土壤類型為潮土。

4.2濮陽縣土壤具有金銀花道地產(chǎn)區(qū)土壤標(biāo)識特征研究表明，金銀花的道地性土壤質(zhì)地為砂質(zhì)壤土；道地金銀花適宜在中性或偏堿性的土壤中生長；要求土壤的交換性能比較高[5]。土壤元素中鍶、鉀、鈉、鎂和鈣的含量高，鉻、鉛含量較低[6]。由表3知，濮陽縣土壤具有新密、封丘、平邑產(chǎn)區(qū)土壤的標(biāo)識特征:土壤質(zhì)地為砂質(zhì)壤土；偏堿性土壤；鹽基飽和度、土壤陽離子交換總量等土壤理化指標(biāo)，以及土壤中鍶、鉀、鈉、鎂和鈣、鉻、鉛等元素含量均相近。

4.3濮陽縣金銀花有效成分含量與道地金銀花相近金銀花有效成分復(fù)雜，除了《藥典》規(guī)定的綠原酸、木犀草苷外，所含的其他黃酮類化合物及常春藤皂苷元、齊墩果酸、環(huán)烯醚萜苷(如當(dāng)藥苷、馬錢苷)也是重要的藥效成分。由表4知，濮陽金銀花無論是綠原酸、木犀草苷的含量，還是總黃酮、常春藤皂苷元、齊墩果酸、當(dāng)藥苷、馬錢苷的含量均與新密、封丘、平邑金銀花十分接近。

4.4濮陽縣金銀花微量元素特征與道地金銀花相似道地金銀花藥材中鍶、鐵含量較高，鉛、鉻含量較低，對鉀、鎂、銅、鋅富積能力較強(qiáng)[6，4]。由表5知，濮陽縣金銀花中上述元素的含量與新密、封丘、平邑金銀花無明顯差異。

5　結(jié)論

綜合以上各因素，濮陽縣金銀花或可列為道地藥材。

參考文獻(xiàn)

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].2010版，一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：205-206.

[2]楊俊杰, 李娟. 河南金銀花產(chǎn)地生產(chǎn)狀況調(diào)查[J].時珍國醫(yī)國藥，2011，22(4)：974-975.

[3]邢俊波，李萍，張重義. 金銀花質(zhì)量與生態(tài)系統(tǒng)的相關(guān)性研究[J].中醫(yī)藥學(xué)刊，2003，21(8)：1237-1238.

[4]張重義，李萍，李會軍，等. 道地與非道地產(chǎn)區(qū)金銀花質(zhì)量的比較[J]. 中國中藥雜志，2007，32(9)：786-788.

[5]張重義，李萍，齊輝，等. 金銀花道地與非道地產(chǎn)區(qū)地質(zhì)背景及土壤理化狀況分析[J]. 中國中藥雜志，2003，28(2)：114-117.

[6]張重義，李萍，陳君，等. 金銀花道地與非道地產(chǎn)區(qū)土壤微量元素分析[J]. 中國中藥雜志，2003，28(3)：207-212.

[7]張彥雄，李丹，張佐玉，等. 兩種土壤陽離子交換量測定方法的比較[J]. 貴州林業(yè)科技，2010，38(2)：45-49.

[8]陳秋生，張強(qiáng)，劉燁潼，等. 電感耦合等離子體質(zhì)譜法同時測定土壤中多種元素含量的研究[J]. 中國土壤與肥料，2013(4)：97-101.

[9]霍文杰，李衛(wèi)民，高英. 干燥方法對金銀花中綠原酸、木犀草苷及總黃酮含量的影響[J]. 廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2013，30(5)：737-741.

[10]張雪，何丙輝，楊憲，等. HPLC法測定金銀花中常春藤皂苷元、齊墩果酸、槲皮素、木犀草苷和綠原酸[J]. 中草藥，2008，39(10)：1576-1577.

[11]馬雙成，劉燕，畢培曦，等. 金銀花藥材中抗呼吸道病毒感染的環(huán)烯醚萜類成分的定量研究[J]. 藥物分析雜志，2006，26(8)：1039-1042.

[12]王枚博，夏晶，王欣美，等. 金銀花等10種中藥材中15種無機(jī)元素分布規(guī)律及其相關(guān)性研究[J]. 中國藥學(xué)雜志，2012，47(8)：620-625.

doi:10.3969/j.issn.1003-8914.2016.11.067

文章編號：1003-8914(2016)-11-1662-04

收稿日期：(本文校對：李鳳琴2015-07-30)

Analysis of the Geo-herbalism of Flos Lonicerae Japonicae Produced in Puyang County

WANG Yanke

(Puyang Food Supervision Institute, Henan, Puyang 457000, China)

Abstract：ObjectiveAccording to the causes of formation of genuine Flos Lonicerae Japonicae, to do comparative study of Flos Lonicerae Japonicae in Puyang County and to explore the geo-herbalism of Flos Lonicerae Japonicae in Puyang County. MethodsDue to that the formation of Chinese herbs mainly depends on the quality of the local ecological environment and geological materials itself, this paper compares the Flos Lonicerae Japonicae in Puyang County with that in typical genuine producing areas—Xinmi, and Fengqiu ,Henan province and Pingyi, Shandog province, in the aspects of geologic background system, soil physical and chemical characteristics and element content to do the genuineness analysis. ResultsPuyang County has obvious similarities in geographical location, climatic regionalization, soil physical and chemical properties etc. with Xinmi, Fengqiu and Pingyi and the soil element contents are with identifying characteristics of genuine producing areas. Effective components content of the Flos Lonicerae Japonicae in Puyang County has no significant difference with the above-mentioned genuine producing areas and the contented trace elements are with identifying characteristics of genuine Flos Lonicerae Japonicae. ConclusionThe Flos Lonicerae Japonicae in Puyang County can be classified as geoherbs.

Key words：Geoherbs; Flos Lonicerae Japonicae; Geological background; Ecological environment; Trace elements; Effective components