通絡玉液湯對2型糖尿病心肌病大鼠糖脂代謝及氧化指標的影響*

李淑貞，楊曉暉，崔茂香，張蘭蘭滄州醫學高等專科學校，河北滄州061001

?

通絡玉液湯對2型糖尿病心肌病大鼠糖脂代謝及氧化指標的影響*

李淑貞，楊曉暉，崔茂香，張蘭蘭
滄州醫學高等專科學校，河北滄州061001

目的：探討通絡玉液湯對糖尿病心肌病（DC）大鼠糖脂代謝的改善作用及其機制。方法：采用高糖高脂飲食+小劑量鏈脲佐菌素腹腔注射的方法復制2型糖尿病心肌病大鼠模型。將48只大鼠隨機分為4組：正常對照組、糖尿病心肌病組、通絡玉液湯4周組、通絡玉液湯8周組。分別處理4～8周后，測定大鼠血糖（FBG）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性的改變，觀察胰島細胞的病理變化。結果：用藥組大鼠FBG、TC、TG、LDL-C、MDA水平明顯下降（P＜0.05），HDL-C水平、SOD活性明顯上升（P＜0.05），且隨干預時間的延長，治療效果更加顯著。結論：通絡玉液湯可能通過抗氧化作用改善糖脂代謝紊亂、修復胰島β細胞。

通絡玉液湯；2型糖尿病心肌病；糖脂代謝；抗氧化

糖尿病心肌病（diabetic cardiomyopathy DC）是一種獨立于冠心病、高血壓、先天性心病和其他種類的心臟病之外的特異的心臟病變，發病率高、危害大，與糖尿病患者心血管疾病的高發生率和高病死率密切相關，是嚴重威脅人類健康的世界性公共衛生問題［1-4］。通絡玉液湯在玉液湯、生脈散原方基礎上加減化裁組成，具有益氣養陰、活血通絡之功效。本實驗旨在高糖高脂喂養+小劑量鏈脲佐菌素腹腔注射建立接近臨床特征的實驗性2型糖尿病心肌病大鼠模型的基礎上，通過觀察空腹血糖（FBG）、血脂、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）等指標，探討該藥對DC大鼠糖脂代謝的改善作用及其機制。

1　材料與方法

1.1實驗動物SD大鼠，雄性，體質量150～180g，SPF級，中國人民解放軍軍事醫學科學院衛生學環境醫學研究所動物實驗中心提供，合格證號：SCXK-（軍）2009-003。

1.2藥物及試劑通絡玉液湯（生曬參、生黃芪、生山藥、麥冬、知母、花粉、葛根、五味子、雞內金等）中藥飲片均購自滄州同仁堂藥店。浸泡，煎煮、濃縮成每毫升含2.5 g生藥的液體；鏈脲佐菌素（STZ），購自美國Sigma公司；FBG、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、MDA、SOD試劑盒均購自南京建成生物制品研究所。

1.3實驗方法

1.3.1分組與造模48只SD雄性大鼠，適應性喂養1周后，參考董世芬等［3］方法，并根據預實驗結果，分為正常對照組（NC組）和模型組。NC組一直采用基礎飼料喂養，模型組先用高脂高糖飼料（20%蔗糖、10%豬油、2.5%膽固醇和67.5%基礎飼料）喂養4周，然后一次性腹腔注射1%STZ 30 mg/kg，NC組僅給予等量枸櫞酸鈉緩沖液（pH=4.4）腹腔注射，不采血。72小時后測大鼠FBG，大于11.1 mmol/L認為是2型糖尿病模型成功大鼠，持續高脂高糖飼料喂養6周，即成DC模型。選擇成模大鼠36只，隨機分為3組：糖尿病心肌病組（DC組）、通絡玉液湯4周組（TYD4周組）、通絡玉液湯8周組（TYD8周組）；每組數量均為12只。

1.3.2給藥方法DC模型成功后開始給藥，TYD組灌服通絡玉液湯25 g/（kg·d）；NC組和DC組每日灌服相應劑量的生理鹽水，每周根據大鼠體質量以及飼料消耗來調整藥物劑量。4周組連續灌藥4周，8周組連續灌藥8周。各組大鼠均以原飼料繼續喂養至實驗結束，整個實驗過程中自由攝食和飲水。

1.4指標測定

1.4.1血生化指標測定實驗結束后各組動物禁食12小時從頸總動脈取血2 mL，制備血清-20℃保存以備檢測各生化指標。葡萄糖氧化酶法測定FBG，全自動生化分析儀測定TC、TG、LDL-C、HDL-C、MDA、SOD。

1.4.2胰腺組織形態學檢查取胰腺以4%多聚甲醛固定，石蠟切片，常規HE染色，光鏡下觀察胰島細胞的病理變化。

1.5統計學方法全部數據采用SPSS 16.0統計軟件分析，計量資料用±s）表示，多組間比較用單因素方差分析和q檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2　結果

2.1血糖、血脂水平與NC組比較，DC組大鼠血清中FBG、TC、TG、LDL-C含量明顯升高，差異有統計學意義（P＜0.05），HDL-C水平明顯下降，差異有統計學意義（P＜0.05）；經用藥干預后，各治療組大鼠血清中FBG、TC、TG、LDL-C含量明顯降低，HDL-C含量明顯升高，與DC組比較差異有統計學意義（P＜0.05）；與TYD4組比較，TYD8組大鼠血清中FBG、TC含量明顯降低，差異有統計學意義（P＜0.05），TG、LDL-C水平下降，HDL-C升高，但差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1　各組大鼠血糖、血脂水平的比較s）mmol/L

表1　各組大鼠血糖、血脂水平的比較s）mmol/L

注：與NC組比較，**表示P＜0.01；與DC組比較，△△表示P＜0.01；與TYD4組相比，★表示P＜0.05，★★表示P＜0.01，※表示P＞0.05。

組別NC組DC組TYD4組TYD8組只數12 12 12 12 FBG 5.82±1.12 22.57±2.84**14.91±2.48△△10.42±2.52△△★★TC 1.29±0.13 3.36±0.21**2.69±0.17△△2.50±0.19△△★TG 0.17±0.05 0.82±0.12**0.43±0.09△△0.34±0.07△△※LDL-C 0.33±0.10 0.79±0.08**0.66±0.08△△0.60±0.09△△※HDL-C 1.37±0.16 0.86±0.11**1.12±0.09△△1.16±0.09△△※

2.2各組大鼠血清SO D活性、M D A含量與NC組比較，DC組大鼠血清中MDA含量明顯升高（P＜0.01），SOD水平明顯下降（P＜0.01）；經用藥干預后，各治療組大鼠血清中MDA含量明顯降低，SOD含量明顯升高，與DC組比較有顯著差異（P＜0.05）；與TYD4組比較，TYD8大鼠血清中MDA含量明顯降低（P＜0.05），SOD水平明顯上升（P＜0.01）。見表2。

2.3胰島細胞的病理學變化光鏡下觀察：NC組大鼠胰島清晰可辨且體積較大，胰島細胞的數量最多且細胞分布均勻，細胞核居中，胞漿豐富均勻；DC組大鼠胰島體積縮小，細胞數量減少，分布稀疏，腺泡細胞間有明顯的脂肪空泡，胞漿疏松，嗜酸性染色明顯減弱，細胞核固縮，胰島內有少量的淋巴細胞浸潤；與DC組比較，各治療組大鼠胰島細胞有不同程度的修復增生，胰島體積相對增大，細胞數目相對增多，胞漿較豐富。見圖1。

表2　各組大鼠血清SO D活性、M D A含量比較±s）

表2　各組大鼠血清SO D活性、M D A含量比較±s）

注：與NC組相比，**表示P＜0.01；與DC相比，△表示P＜0.05，△△表示P＜0.01；與TYD4組比較，★表示P＜0.05。

組別NC組DC組TYD4組TYD8組例數12 12 12 12 SOD/（nU·mL-1）261.40±61.58 143.59±15.09**190.86±28.34△234.35±46.46△△★MDA/（nmol·mL-1）3.69±0.87 7.24±1.68**5.93±0.71△4.68±0.83△△★

圖1　各組大鼠胰腺組織HE染色（×400）

3　討論

胰島素抵抗和β細胞功能障礙是2型糖尿病主要發病機制［4-9］。本實驗先采用高糖高脂飲食喂養大鼠，誘導其產生胰島素抵抗，并引起血脂升高，繼以小劑量鏈脲佐菌素腹腔注射，破壞大鼠胰島β細胞，造成大鼠胰島素分泌缺陷，成功復制出與臨床2型糖尿病心肌病的發生發展過程較相似的2型糖尿病心肌病大鼠模型［10-14］。大量研究表明高血糖是誘發糖尿病心肌病的主要病因。長期高血糖刺激，誘導氧化應激反應，產生過量高活性的自由基，導致心肌細胞壞死，心肌肥厚、纖維化，影響心臟正常功能，最終導致糖尿病心肌病的發生［15-17］。

中醫學中并無糖尿病心肌病之名，大部分醫家將其歸屬于“消渴”“胸痹”“真心痛”等范疇。中醫認為消渴病經久不愈，耗氣傷陰，導致氣陰兩傷，久病及心，因虛致瘀，瘀血痹阻心脈，形成消渴病心病即糖尿病心肌病。氣陰兩虛，瘀血阻絡為其主要病機。

通絡玉液湯是在玉液湯、生脈散原方基礎上加減化裁而成，具有益氣養陰、活血通絡之效。本實驗顯示，模型組大鼠FBG升高，血清中MDA水平升高，SOD活性下降，TC、TG、LDL-C增高和HDL-C降低，與文獻描述一致。給予通絡玉液湯干預后，糖尿病心肌病大鼠FBG、MDA水平明顯下降，SOD活性明顯上升，TC、TG、LDL-C降低和HDL-C增高，且隨干預時間的延長，治療效果更加顯著，表明通絡玉液湯的抗氧化作用可能是改善糖脂代謝紊亂、修復胰島β細胞的作用機理之一。

［1］吳鏗，游瓊，黃瑞娜，等.柚皮苷對實驗性2型糖尿病心肌病大鼠模型糖脂代謝的影響［J］.廣東醫學，2012，33（13）：1863-1865.

［2］Voulgari C，Papadogiannis D，Tentolouris N.Diabetic cardiomyopathy：from the pathophysiology of the cardiac myocytes to current diagnosis and management strategies［J］.Vasc Health Risk Manag，2010，29（7）：6883-6903.

［3］董世芬，洪纓，樊江波，等.實驗性2型糖尿病心肌病大鼠模型的建立與評價［J］.中國實驗動物學報，2009，17（4）：245-251.

［4］王顏剛，許鳳，陳新焰，等.復方中藥生芪降糖顆粒對糖尿病大鼠血清生化指標影響的量效關系［J］.中國臨床康復，2006，10（35）：75-77.

［5］Watanabe K，Thandavarayan RA，Harima M，et al.Role of differential signaling pathways and oxidative stress in diabetic cardiomyopathy［J］.Curr Cardiol Rev，2010，6（4）：280-290.

［6］閆蕊，單虎，林琳，等.鏈脲佐菌素誘導的糖尿病性心肌病大鼠心臟結構及血管緊張素Ⅱ的變化［J］.西安交通大學學報：醫學版，2016，37（2）：199-203.

［7］屈會云.復榮通脈膠囊對糖尿病大鼠心肌TGF-β_1及CTGF表達水平的影響研究［J］.現代中西醫結合雜志，2016，25（14）：1495-1498.

［8］趙一楠.糖尿病性心肌病的研究進展［J］.中國糖尿病雜志，2016，24（4）：381-384.

［9］趙利，鄭直，劉光輝，等.益景湯對糖尿病大鼠心臟血流動力學指標和心肌細胞凋亡的影響［J］.微循環學雜志，2016，26（1）：6-9.

［10］李彩蓉，甘受益，黃紅霞，等.二苯乙烯苷對糖尿病大鼠心肌損傷的保護作用［J］.中國藥理學通報，2016，32（3）：410-415.

［11］李俊龍，曹新冉，王瑩.青蒿素對糖尿病心肌病大鼠心功能及纖維化的影響［J］.上海中醫藥雜志，2016，50（3）：70-73.

［12］趙航，馮景輝，吳秀萍.糖尿病心肌病發病機制的研究進展［J］.國際心血管病雜志，2016，43（1）：16-18.

［13］高毅娜.曲美他嗪治療缺血性心肌病慢性心力衰竭合并糖尿病患者的療效觀察［J］.中國臨床新醫學，2016，9（2）：122-125.

［14］鄒曉榮，陶劍，殷然，等.糖尿病心肌細胞離子通道改變研究進展［J］.第二軍醫大學學報，2016，37（2）：214-219.

［15］楊銳，賈強，劉小粉.硫化氫對大鼠糖尿病心肌病氧化應激及內質網應激的影響［J］.中國應用生理學雜志，2016，32（1）：8-12.

［16］王憲娟.比索洛爾治療糖尿病并發缺血性心肌病的臨床療效觀察［J］.臨床合理用藥雜志，2016，9（8）：43-44.

［17］程明月，郭海，鄭宏.糖尿病心肌中線粒體膜通透性轉化孔變化的研究進展［J］.新醫學，2016，47（2）：73-75.

The Effects of TongLuo YuYe Tang on Oxidation Index，Glucose and Lipid Metabolism of the Rats with Type Two Diabetic Cardiomyopathy

LI Shuzhen，YANG Xiaohui，CUI Maoxiang，ZHANG Lanlan Cangzhou Medical College，Cangzhou 061001，China

Objective：To explore the mechanism of TongLuo YuYe Tang improving glucose and lipid metabolism of type two diabetic cardiomyopathy（DC）rats and its improvement effects.Methods：DC rat model was prepared by the method of high sugar and high fat diet，and peritoneal injection of small dose of streptozotocin.All 48 rats were randomized into four groups：normal control group，DC group，the group of TongLuo YuYe Tang for four weeks and the group of TongLuo YuYe Tang for eight weeks，the levels of FBG，TC，TG，LDL-C and HDL-C，the contents of MDA and the activity of SOD in the rats were detected，pathological changes of islet cells were observed after dealing in four to eight weeks respectively.Results：The levels of FBG，TC，TG，LDL-C and MDA decreased obviously in the medication groups（P＜0.05），the level of HDL-C and the activity of SOD rose notably（P＜0.05），as the intervention time prolonged，therapeutic effects became more evident.Conclusion：TongLuo YuYe Tang could improve the disorder of glucose and lipid metabolism and repair islet β cells by antioxidant effects.

TongluoYuye Tang；type 2 diabetic cardiomyopathy；glucose and lipid metabolism；antioxidation

R285.5

A

1004-6852（2016）06-0004-03

2015-12-28

2013年滄州市科學技術研究及發展指導計劃項目（編號131302077）。

李淑貞（1971—），女，碩士學位，副教授。研究方向：中醫藥防治糖尿病、心肌病。