犢牛巴氏桿菌病的診斷與防治

王　燚，崔婷婷，陳　亮，薛麗君，張婷婷，劉　敏，胥洪超

（1.四川省德陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 德陽(yáng) 618000；2.四川省德陽(yáng)市旌陽(yáng)區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 德陽(yáng) 618000；3.四川省中江縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 德陽(yáng) 618000）

犢牛巴氏桿菌病的診斷與防治

王燚1，崔婷婷1，陳亮1，薛麗君2，張婷婷1，劉敏1，胥洪超3

（1.四川省德陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 德陽(yáng) 618000；2.四川省德陽(yáng)市旌陽(yáng)區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 德陽(yáng) 618000；3.四川省中江縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 德陽(yáng) 618000）

牛巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌引起的，常以高溫、肺炎、急性胃腸炎以及內(nèi)臟器官?gòu)V泛性出血為特征，發(fā)病率和死亡率均較高，犢牛致死率可達(dá)80%以上，給畜牧業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。2014年7月，四川省中江縣某牛場(chǎng)新購(gòu)進(jìn)犢牛出現(xiàn)發(fā)熱、咳嗽、腹瀉等癥狀，2頭犢牛醫(yī)治無(wú)效死亡。經(jīng)對(duì)牛場(chǎng)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)診斷、流行病學(xué)調(diào)查及實(shí)驗(yàn)室診斷，確診此次疫情為牛巴氏桿菌病，隨后采取綜合防制措施，控制住了疫情，現(xiàn)報(bào)告如下。

1　發(fā)病情況

2014年7月初，該牛場(chǎng)從周邊鄉(xiāng)鎮(zhèn)購(gòu)買犢牛70余頭，年齡均在4～6月齡之間。1周后部分新購(gòu)犢牛出現(xiàn)食欲減退、咳嗽、腹瀉等癥狀。場(chǎng)內(nèi)技術(shù)人員診斷為感冒，未對(duì)病牛進(jìn)行隔離，采用氨芐西林、鏈霉素、安乃近等治療，病情沒(méi)得到控制，隨后2只犢牛相繼死亡。

2　臨床癥狀

現(xiàn)場(chǎng)臨床發(fā)現(xiàn)病牛消瘦，被毛無(wú)光澤，眼結(jié)膜充血、潮紅，精神沉郁，食欲減少，體溫升高達(dá)41℃，呈稽留熱。呼吸急促，鼻鏡干燥，呈腹式呼吸，有時(shí)發(fā)出干咳聲，鼻腔流出漿液性或黏性鼻液。聽(tīng)診時(shí)可聽(tīng)到心音亢進(jìn)，有支氣管呼吸音及水泡性雜音，有疼痛反應(yīng)及實(shí)音區(qū)。部分病牛出現(xiàn)腹瀉，糞便中含有腸黏膜，腹瀉后體溫隨之下降。

3　剖檢病變

病死牛剖檢可見(jiàn)胸腔有少量淡紅色滲出液，其間混有纖維素性絮狀物；肺臟體積明顯增大，肺臟大部分出現(xiàn)出血、淤血及不同程度的實(shí)質(zhì)性變性，病變嚴(yán)重的出現(xiàn)黑紫色實(shí)變區(qū)，切割肺部時(shí)發(fā)現(xiàn)間質(zhì)性肺炎病變，切面滲出物增多；肝臟腫大，有塊狀壞死灶和白色小結(jié)節(jié)。

4　實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1病原分離培養(yǎng)無(wú)菌采集病死牛的心臟、肺臟、肝臟、脾臟等組織接種鮮血瓊脂固體培養(yǎng)基，37℃恒溫培養(yǎng)24 h，生長(zhǎng)出露珠樣的細(xì)小菌落，菌落周圍無(wú)溶血現(xiàn)象，鏡檢小短桿菌，革蘭染色陰性。純培養(yǎng)物接種普通瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)貧瘠，麥康凱培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，在普通肉湯培養(yǎng)基中，液面開(kāi)始輕度渾濁，4～5 d后液體變得清晰，管底出現(xiàn)黏稠沉淀。

4.2生化試驗(yàn)?zāi)馨l(fā)酵葡萄糖、果糖、甘露醇，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不發(fā)酵麥芽糖、乳糖、鼠李糖，吲哚、M.R.、V-P試驗(yàn)為陰性，初步鑒定該菌為巴氏桿菌。

4.3致病性檢測(cè)將普通肉湯液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的分離細(xì)菌，分別腹腔接種3只小鼠，0.2 mL/只，對(duì)照組注射等體積相同培養(yǎng)基，接種病料的小鼠均在1 d內(nèi)全部死亡，對(duì)照組的小鼠全部存活。剖檢死亡小鼠，可見(jiàn)腹腔液明顯增多，心包和胸腔有不同程度的漿液性纖維素性滲出物，心內(nèi)外膜、腸黏膜出血，肝、淋巴結(jié)腫大。采取死亡小鼠病料涂片鏡檢，鏡下觀察到的細(xì)菌為革蘭陰性短桿菌，美藍(lán)染色具有明顯的兩極特性，有莢膜。

4.4藥敏試驗(yàn)分離菌株對(duì)頭孢噻呋鈉、氟苯尼考、替米考星敏感，對(duì)恩諾沙星、氧氟沙星、林克霉素等敏感性居中；對(duì)青霉素、氨芐西林、鏈霉素、四環(huán)素敏感性較低（見(jiàn)表1）。

表2　分離菌株藥敏試驗(yàn)分析結(jié)果　（mm）

5　診斷結(jié)果

根據(jù)臨床診斷、流行病學(xué)調(diào)查及實(shí)驗(yàn)室診斷，診斷此次疫情為牛巴氏桿菌病。

6　防治措施

6.1完善防疫設(shè)施對(duì)病牛及時(shí)隔離治療，防止疾病擴(kuò)散；對(duì)新引進(jìn)牛按規(guī)定進(jìn)行申報(bào)檢疫、隔離飼養(yǎng)；做好圈舍衛(wèi)生，糞便堆積發(fā)酵處理；對(duì)污染圈舍、場(chǎng)地和用具用3%氫氧化鈉全面消毒；對(duì)帶畜圈舍使用百毒殺每天進(jìn)行消毒；建立健全各項(xiàng)防疫、免疫檔案。

6.2加強(qiáng)飼養(yǎng)管理對(duì)新引進(jìn)牛逐步更換飼料，減少消化道疾病的發(fā)生；合理搭配日糧、營(yíng)養(yǎng)平衡，不飼喂霉變飼料；增加防暑降溫設(shè)施，保持注意通風(fēng)、干燥，減少應(yīng)激。

6.3治療措施根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用頭孢噻呋鈉按3 mg/kg體重對(duì)患牛進(jìn)行肌肉注射，并根據(jù)臨床癥狀對(duì)癥治療，經(jīng)過(guò)1周的用藥，病牛癥狀緩解并趨于好轉(zhuǎn)，無(wú)新增死亡病例。同時(shí)對(duì)與病牛密切接觸的同群牛進(jìn)行預(yù)防性給藥，未見(jiàn)新發(fā)病例，很好地控制住了本次疫情。

7　討論

7.1巴氏桿菌正常存在于多種動(dòng)物口腔和咽部黏膜，當(dāng)動(dòng)物處于應(yīng)激狀態(tài)和機(jī)體抵抗力下降時(shí)細(xì)菌大量繁殖并致病，容易發(fā)生內(nèi)源性感染。該牛場(chǎng)對(duì)新引進(jìn)犢牛末按規(guī)定進(jìn)行申報(bào)、隔離飼養(yǎng)觀察；缺少嚴(yán)格的消毒措施；圈舍衛(wèi)生條件差，糞便清理不及時(shí)；飼料配制不科學(xué)，酒糟為主要飼料；夏季潮濕悶熱，防暑降溫設(shè)施不到位。經(jīng)分析，外部引種不規(guī)范、防疫措施不完善、飼養(yǎng)管理不規(guī)范為發(fā)病主要原因。

7.2本次疫情主要為犢牛發(fā)病，病死牛在剖檢過(guò)程中并未發(fā)現(xiàn)有明顯的內(nèi)臟器官的出血性炎癥及各漿膜黏膜出血，而是以肺部病變?yōu)橹饕卣鳎茰y(cè)犢牛死亡的主要原因不是敗血癥，而是肺部感染、腹瀉。

7.3病菌結(jié)果分離培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)莢膜不明顯動(dòng)物接種試驗(yàn)后，再次用動(dòng)物試驗(yàn)病料染色中又發(fā)現(xiàn)了莢膜，這與有關(guān)報(bào)道基本一致，多殺性巴氏桿菌的莢膜是主要的毒力因子，并且莢膜的形成受到培養(yǎng)物的影響，莢膜物質(zhì)會(huì)顯著減少。在動(dòng)物試驗(yàn)中，感染的小鼠在1 d內(nèi)全部死亡，也說(shuō)明分離的牛巴氏桿菌具有較強(qiáng)的致病力。

7.4藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，分離的牛巴氏桿菌對(duì)包括青霉素、氨芐西林、鏈霉素、四環(huán)素等多種抗生素產(chǎn)生不同耐藥性，這也是給病牛使用大量抗菌藥物治療無(wú)效的原因之一。藥敏試驗(yàn)篩選出了頭孢噻呋鈉、氟苯尼考、替米考星等敏感藥物，臨床效果較好，為本地區(qū)牛巴氏桿菌病防控提供了依據(jù)。

S858.23文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

0529-6005（2016）07-0038-01

2015-03-25

王燚（1984-），男，獸醫(yī)師，碩士，主要從事動(dòng)物疫病防控工作，E-mail：364121892@qq.com