規模化豬場偽狂犬病的抗體監測與分析

吳植

（江蘇農牧科技職業學院，江蘇 泰州 225300）

規模化豬場偽狂犬病的抗體監測與分析

吳植

（江蘇農牧科技職業學院，江蘇 泰州 225300）

豬偽狂犬病（Porine Pseudorabies，PR）是由偽狂犬病病毒所引起的一種急性熱性傳染病，臨床上多以發熱和神經癥狀為特征，主要引起種豬不育，妊娠母豬發生流產、死胎和木乃伊胎，新生仔豬和斷奶仔豬死亡，育肥豬生長緩慢等[1-2]。該病感染率和發病率可達100%，死亡率高達80%～100%。該病1年4季均可發生，但以冬春兩季多發。近年來隨著基因缺失苗免疫接種策略的實施，偽狂犬病的流行趨勢有所緩和，但該病的隱性感染現象仍相當普遍，造成長期帶毒排毒[1]。PRV可以侵害免疫系統，導致豬的免疫應答能力降低甚至失敗，嚴重影響著其他疫苗的免疫效果，實踐證明有效的開展野毒感染抗體與免疫抗體水平的跟蹤監測，對保證被檢豬群安全十分重要，為開展該病凈化和制定科學合理的免疫程序提供依據。作者采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）對江蘇鹽城某規模化豬場的血清樣品進行了跟蹤監測，報告如下。

1　材料與方法

1.1血清樣品樣品采集時間為2014年5月至11月，所有樣品來自鹽城市某規模化豬場，該場基礎母豬存欄數為500頭，所有豬只采用gE基因缺失活疫苗免疫。采用橫斷面法分別采集公豬、后備豬、不同胎次的種豬、不同生長階段商品豬的前腔靜脈血分離血清，共采集血清樣品710份，其中種豬血清樣品247份，不同周齡豬群樣品463份，-70℃保存備用。

1.2檢測試劑野毒感染抗體（gE抗體）檢測試劑盒、免疫抗體（gB抗體）檢測試劑盒，購自美國IDEXX公司。嚴格按照豬偽狂犬病ELISA野毒感染抗體和免疫抗體檢測試劑盒操作說明書進行，使用前所有試劑均恢復至室溫。

1.3野毒感染抗體監測豬偽狂犬病病毒野毒抗體檢測采用gE抗體檢測試劑盒，診斷豬群是否感染豬偽狂犬病野毒株。用樣品與陰性對照比率（S/N）作為判定標準，即S/N≤0.6判為陽性，S/ N＞0.7判為陰性，若0.6≤S/N＜0.7的樣品應重測。

1.4免疫抗體監測在確定豬群PR野毒抗體陰性的情況下，采用gB抗體檢測試劑盒對待檢豬血清進行檢測，可診斷豬群免疫豬偽狂犬病疫苗后產生的抗體水平。判斷標準為：S/N≤0.6判為陽性，S/N>0.7判為陰性，若0.6≤S/N<0.7的樣品應重測。

2　結果

2.1種豬野毒（gE）抗體監測種豬野毒感染抗體監測總樣本數為247份，其中母豬為239份。第1次監測發現該豬場種豬野毒感染較為嚴重，平均感染率為18.9%，后備豬為25.8%，1～2胎、3～4胎、5胎以上等不同胎次種豬的感染率分別為8.7%、17.8%、23.5%，呈現出胎次越高陽性率越高的趨勢。第2次、第3次監測平均感染率分別下降至12.1%、6.8%，見表1。整個過程中共采集種公豬血清8份，gE抗體全部為陰性。

表1　種豬野毒抗體監測

2.2不同周齡豬野毒（gE）抗體監測不同周齡豬野毒抗體監測樣品分3次采集，合計采集1～4周齡、5～8周齡、9～12周齡、13～16周齡、17～24周齡豬的血清樣品463份。第1次監測結果發現，除了17～24周齡以野毒感染率隨著周齡的增大而逐漸下降外，3次監測的平均感染率分別為19.2%、11.8%、6.5%，呈下降趨勢，見表2。

表2　不同周齡豬野毒抗體監測

2.3不同月份豬偽狂犬病的免疫抗體監測豬偽狂犬病的免疫抗體監測樣品分3次共采集108份，第一次監測種豬群的抗體陽性率明顯高于仔豬和育成豬，種豬的抗體陽性率在85.3%～91.3%，仔豬和育成豬的抗體陽性率波動較低，為36.9%～83.2%。3次監測的平均陽性率分別為66.8%、78.3%、94.8%，見表3。

表3　不同月份豬免疫抗體的陽性率

3　討論

野毒感染監測結果表明，該規模化豬場的野毒感染比較嚴重，種豬感染率平均為18.9%，不同周齡豬感染率平均為19.2%，同期免疫抗體的陽性率只有66.8%。謝海波等[2]研究表明，免疫合格率達到80%以上才能較為有效地預防豬偽狂犬病的流行。因此立即建議豬場采取加強免疫與淘汰陽性帶毒豬等措施后，野毒感染狀況明顯好轉，第3次檢測發現野毒感染率均在7%以下。分析各胎次母豬的感染率，整體看來胎次越低，陽性率越低，這可能與近年來我國規模化豬場對于種豬選擇使用高質量的基因缺失疫苗強化免疫有關。

免疫抗體檢查結果表明，1～4周齡豬免疫抗體水平3次檢測陽性率均較高，但是隨著時間推移陽性率逐漸下降，可以推斷該免疫抗體來源于母源抗體。在高強度感染壓力下，筆者建議該規模化豬場在仔豬2～3周齡對增加一次滴鼻免疫，以防止出現免疫空白期。

目前我國用于預防的疫苗主要是基因缺失苗，這種疫苗可以準確區分免疫抗體和野毒感染抗體。IDEXX公司研發的gE抗體檢測試劑盒能夠快速、方便、準確的檢測野毒感染抗體，從而評估野毒感染狀態。與之配套的gB抗體檢測試劑盒也是一種極其敏感的檢測方法，能夠反映野毒抗體陰性豬群的疫苗免疫水平，這兩種試劑盒的存在和基因缺失疫苗的確實的免疫效果使得偽狂犬病在豬場的凈化根除成為可能。

[1]吳學敏，王隆柏，陳如敬，等.規模化豬場豬偽狂犬病的凈化及成效分析[J].福建畜牧獸醫，2011，33（4）：36-39.

[2]謝海波，何小華.豬偽狂犬病的流行情況和預防措施[J].中國獸醫雜志，2001，37（6）：21-23.

S858.28文獻標志碼：B

0529-6005（2016）07-0042-02

2015-03-04

江蘇農牧科技職業學院橫向課題（00010114024）

吳植（1980-），男，碩士生，研究方向為獸醫微生物與免疫學，E-mail：yzwuzhi@163.com