青花菜蘿卜硫素合成相關基因BoCYP83A1的克隆與表達分析

高燦紅，董麗麗，關曉彎，趙良俠，林俊城，徐福樂，張水明*

(1 安徽農業大學，合肥 230036；2 福州超大現代農業發展有限公司，福州 350003)

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青花菜蘿卜硫素合成相關基因BoCYP83A1的克隆與表達分析

高燦紅1，董麗麗1，關曉彎1，趙良俠1，林俊城2，徐福樂2，張水明1*

(1 安徽農業大學，合肥 230036；2 福州超大現代農業發展有限公司，福州 350003)

CYP83A1基因是蘿卜硫素合成代謝中的關鍵基因，該試驗以青花菜品種CDBY-10為材料，利用RACE和RT-PCR方法，獲得BoCYP83A1基因的全長序列。該基因全長1 509 bp，編碼502個氨基酸，包含保守的P450結構域。通過實時熒光定量PCR分析了BoCYP83A1基因在不同品種、不同組織以及不同激素處理下的表達水平。系統進化樹分析表明，BoCYP83A1與結球甘藍親緣關系最近。BoCYP83A1基因在不同品種間的組織特異性不同：在青花菜品種CDBY-10的根、莖、葉3個組織間表達水平差異較小，在品種CDBY-12中表現為莖>葉>根，在CDBY-14中則表現為根>莖>葉。MeJA及SA處理均能夠引起BoCYP83A1基因表達量的變化：經MeJA處理后，BoCYP83A1基因表達量升高至對照的1.9倍，而后有少量下降；經SA處理后，BoCYP83A1基因表達水平迅速降低，在6 h時降低至對照的0.1倍，而后逐漸回升至對照的表達水平。研究表明，BoCYP83A1基因在不同青花菜品種中的表達特性不同，其表達能夠被MeJA和SA所調控。青花菜BoCYP83A1的克隆及鑒定為培育高蘿卜硫素含量的青花菜新品種奠定了理論基礎。

青花菜; 蘿卜硫素;BoCYP83A1; 茉莉酸甲酯；水楊酸

青花菜 (Brassicaoleracea. var.italicaPlanch)營養豐富且具有保健效果，是發達國家進口量最大的蔬菜之一，被譽為“蔬菜皇冠”[1]。青花菜最具特色的是富含功能成分——蘿卜硫素 (Sulforaphane, SF)，該成分具有極強的促進致癌物解毒、抑制癌細胞生長的功效，在癌癥前期、中期、擴散期均能發揮作用，是迄今為止在蔬菜中發現的抗癌活性最強的天然活性成分[2-3]。隨著分子……