冉 巧,吳嬋娟,高永峰,唐運來,黃才芝,劉繼愷*
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NtMTP1基因過表達對增強煙草Zn脅迫耐受性的研究
冉巧,吳嬋娟1, 2,高永峰1,唐運來1, 2,黃才芝1,劉繼愷1, 2*
(1 西南科技大學 生命科學與工程學院,四川綿陽 621010;2 西南科技大學 核廢物與環境安全國防重點實驗室,四川綿陽 621010)
該研究采用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)技術,對煙草金屬耐受蛋白1(MTP1)基因(NtMTP1)在煙草不同組織以及不同質量濃度ZnSO4處理下的表達進行了分析;利用農桿菌介導法,將NtMTP1基因植物過表達載體pBI121-35S∶∶MTP1轉化野生型煙草,篩選得到NtMTP1基因過表達的轉基因煙草植株,并進行不同質量濃度ZnSO4處理,檢測NtMTP1基因過表達對煙草Zn脅迫耐受性的影響。結果表明:NtMTP1基因在煙草中呈現組織特異性表達,主要在花與葉中表達;NtMTP1基因的表達受到Zn2+誘導,在400 μmol/L ZnSO4處理后,表達量達到最高,為對照組的3.81倍;3株轉基因煙草植株中NtMTP1基因表達量分別為野生型的10.42、7.61和11.84倍,與野生型相比,過表達植株對Zn脅迫的耐受性顯著增強。研究結果為闡明NtMTP1基因在煙草體內Zn2+轉運過程中的生物學功能提供了重要依據。
煙草;金屬耐受蛋白1;鋅;耐受性
Zn是植物必需的微量營養元素之一,是植物細胞內300多種酶與2 000多個轉錄因子的輔助因子,與植物生長素代謝、膜的完整性和生殖發育密切相關。但細胞內Zn2+過量積累同樣會對植物產生毒害作用,比如,會引起植物膜脂過氧化作用,丙二醛含量上升,葉綠素含量降低等,從而破壞植物質膜的完整性和光合系統[1-4]。為減少Zn2+等重金屬離子的毒害作用,生物體進化出一套以陽離子擴散促進因子(cation diffusion facilitator,CDF)蛋白家族為載體的跨膜轉運機制[5]。……