大豆SbPRP3基因表達及轉基因煙草非生物脅迫鑒定

翟　瑩，張　軍，楊曉杰，趙　艷，陳　陽

(1 齊齊哈爾大學 生命科學與農林學院，黑龍江齊齊哈爾 161006；2 黑龍江省獸醫科學研究所，黑龍江齊齊哈爾 161005)

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大豆SbPRP3基因表達及轉基因煙草非生物脅迫鑒定

翟瑩1，張軍2，楊曉杰1，趙艷1，陳陽1

(1 齊齊哈爾大學 生命科學與農林學院，黑龍江齊齊哈爾 161006；2 黑龍江省獸醫科學研究所，黑龍江齊齊哈爾 161005)

為研究大豆(GlycinemaxL.)細胞壁脯氨酸富集蛋白基因(SbPRP3)在逆境脅迫中的作用，利用實時熒光定量PCR，對SbPRP3在高鹽、干旱和低溫處理下的表達情況進行檢測。結果顯示，SbPRP3在高鹽處理下表達量升高，在干旱和低溫處理下表達量先升高后降低。將SbPRP3構建到植物表達載體pRI101-AN上并轉化煙草，獲得陽性轉基因煙草3株。對轉基因煙草植株進行高鹽、干旱和低溫脅迫處理。結果表明，與對照相比，高鹽和低溫處理下轉基因煙草脯氨酸積累量增加，而丙二醛產生量降低。但干旱處理后轉基因煙草脯氨酸和丙二醛的含量與對照相比沒有顯著差異。由此推測SbPRP3可以提高轉基因煙草的耐鹽性和耐寒性。

大豆；脯氨酸富集蛋白；SbPRP3；表達分析；抗逆性

植物細胞壁的組成和結構在細胞發育及應對不良環境因子時會發生變化。這些變化包括細胞壁中多糖(例如纖維素、果膠和半纖維素)以及結構蛋白含量的改變[1]。結構蛋白含量占植物細胞壁干重的10%左右，這些蛋白主要分為5類：富含羥脯氨酸糖蛋白(hydroxyprolin-rich glycoproteins, HRGPs)、茄科凝集素(Solanaceous lectins)、阿拉伯半乳糖蛋白(arabinogalactan proteins, AGPs)、甘氨酸富集蛋白(glycine-rich proteins, GRPs)和脯氨酸富集蛋白(proline-rich proteins, PRPs)[2-3]。PRPs是一類廣泛分布于植物中的富含脯氨酸和羥脯氨酸的蛋白質。……