基于ISSR的硬葉兜蘭居群遺傳多樣性研究

李宗艷，管名媛，李　靜，李名揚

(1 西南林業大學 園林學院， 昆明 650224；2 西南大學 園藝園林學院，重慶 400715)

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基于ISSR的硬葉兜蘭居群遺傳多樣性研究

李宗艷1，管名媛1，李靜1，李名揚2*

(1 西南林業大學 園林學院， 昆明 650224；2 西南大學 園藝園林學院，重慶 400715)

利用ISSR標記對7個硬葉兜蘭居群160個體擴增，10對引物共擴增出101個條帶，其中多態性條帶97個，種水平上的多態性條帶比率(PPB)達96.02%，香儂指數(I)為0.488 9，Nei’s基因多樣性指數(H)為0.332 4。居群水平的遺傳參數，多態性條帶比率(PPB)為 33.51%，香儂指數(I)為0.194 3，Nei’s基因多樣性指數(H)為0.133 2。總的遺傳多樣性(HT)為0.323 9，個體遺傳多樣性(Hs)達到0.133 2。 AMOVA結果揭示居群間遺傳分化大，居群間基因流Nm為0.349 2。居群間的Nei’s遺傳距離0.148 1～0.4385。基于UPGMA聚類，在遺傳距離為0.327時，7個居群聚為兩支, 第一支由古林箐和馬固、田壩、夾寒箐和楊柳井居群組成，第二支由斗咀和小壩子居群組成，聚類關系反映居群間遺傳分化與地理距離無顯著相關性。

硬葉兜蘭；遺傳多樣性；遺傳分化；遺傳距離；親緣關系

硬葉兜蘭(Paphiopedilummicranthum)分布于云南東南、貴州西南和北部、廣西西部的亞熱帶石灰巖山區[1-2]，因其具有較高的觀賞價值，自20世紀80年代發現以來，種質資源大量被采挖，被CITES列為一級保護植物，禁止貿易。

作為珍稀花卉，當前主要開展了硬葉兜蘭繁殖、傳粉生物學、育種和遺傳多樣性等研究[3-9]。硬葉兜蘭主要依靠蜂類和食蚜蠅傳粉[3]，自然狀態下，硬葉兜蘭結實率和萌發率較低，人工授粉后種子萌發率最大可達32.4%[4]；因其具有較高的觀賞特性，硬葉兜蘭參與許多園藝栽培品種的雜交，如著名的魔鬼燈籠P.magicLantern(硬葉兜蘭×德氏兜蘭)[5]；……