2012-2013年廣西犬狂犬病監測及免疫效果分析

韋顯凱,鄭敏,鄭列豐,蘇姣秀,尹彥文,梁晟,蘭斌

(1.廣西大學動物科技學院,廣西南寧530005;2.廣西動物疫病預防控制中心,廣西南寧530001)

2012-2013年廣西犬狂犬病監測及免疫效果分析

韋顯凱1,2,鄭敏2,鄭列豐2,蘇姣秀2,尹彥文2,梁晟2,蘭斌2

(1.廣西大學動物科技學院,廣西南寧530005;2.廣西動物疫病預防控制中心,廣西南寧530001)

為了解當前廣西家犬狂犬病流行情況,評價防控效果,采集免疫過狂犬病疫苗的犬血清2 325份進行抗體檢測,抗體陽性的有1 571份,陽性率為67.57%.另外,采集交易市場或屠宰場表觀健康犬的腦組織樣品1 012份,通過RT-PCR方法檢測狂犬病病原,結果表觀,健康犬1份樣品呈陽性,陽性率為0.099%.結果表明,實施狂犬病疫苗免疫后,廣西家犬總體免疫抗體水平良好,表觀健康犬攜帶狂犬病病毒比率下降到極低水平.提示應繼續加強農村犬只的免疫和管理,有效降低狂犬病的發生.

狂犬病;調查;RT-PCR;抗體監測

狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus)引起的一種人畜共患病,當人被患有狂犬病的動物咬傷后,病毒可以通過傷口的外周神經傳至中樞神經系統,人一旦發病,死亡率100%.世界上每年因狂犬病死亡的人數達到55 000人,上千萬人需要進行病毒暴露后處理[1],中國每年因狂犬病死亡的人數達3 300人,為世界第二,僅次于印度[2].在中國,因狂犬病死亡的人大部分為攜帶狂犬病病毒的犬和貓咬、抓傷后引起,犬是引起中國狂犬病病人高發的最主要原因[3].而對犬進行狂犬病疫苗的免疫則是預防犬感染狂犬病,進而降低犬咬傷人發病幾率的重要措施.本研究通過在廣西區內對犬進行狂犬病疫苗免疫后采集犬血清,并收集市場上的狗腦,分別進行狂犬病抗體及病原檢測,分析疫苗免疫和狂犬病抗體產生以及病原攜帶情況的相互關系,為控制狂犬病的發生提供理論依據.

1　材料與方法

1.1樣品來源2012年和2013年分別安排8個縣、區用狂犬病疫苗進行免疫,采集免疫后1個月的犬血清共計2 325份,其中2012年1 305份,2013年1 020份.2012年和2013年分別從市場上采集狗肉攤點的狗腦506份.其中隆安縣用進口的疫苗進行犬的免疫,每年采集血清300份以上,犬腦100份.其他縣用國產疫苗進行免疫,其中2012年用國產弱毒苗進行免疫,2013年用國產滅活苗進行免疫,每年每個縣采集血清約100份,犬腦50份.

1.2試劑狂犬病抗體ELISA檢測試劑盒,購自浙江同點生物科技有限公司;RT-PCR所需試劑為寶生物工程(大連)有限公司產品.

1.3方法對犬血清進行狂犬病抗體檢測,檢測方法按照試劑盒說明書進行.犬腦則通過RTPCR方法進行狂犬病病毒檢測,引物和反應條件依據曾蘭等[4]的方法進行,引物序列為L1:5′-GAACAACTGGCAACACTTCTCAAC-3′,L2:5′-AGACAAGAC TTGATCC CCAGCAAT-3′.

2　結果

2.12012-2013年狂犬病抗體檢測結果2012-2013年共采集的犬血清樣品2 325份,抗體合格1 571份,合格率為67.57%.2012年采集的犬血清1 305份,其中抗體合格795份,合格率60.92%.2013年采集血清1 020份,抗體合格776份,合格率為76.08%.2013年的合格率比2012年高15.16%,差異顯著(P<0.05),如表1所示.

2.2不同類別犬抗體合格情況在采集的犬血清樣品中,有1 928份來自散養犬,抗體合格數為1 380份,合格率71.58%.寵物犬397份,抗體陽性191份,合格率為48.11%,兩者相比差異極其顯著(P<0.01).

2.3不同疫苗類別抗體合格情況在采集樣品的犬中所應用的疫苗類別主要有進口滅活苗、國產弱毒苗和滅活苗.其中使用進口滅活苗的血清樣品有928份,抗體合格的有730份,合格率78.66%.使用國產疫苗的犬所采集樣品1 397份,抗體合格841份,合格率為60.20%,差異顯著(P<0.05).其中國產弱毒苗免疫合格率38.89%,國產滅活苗的合格率80.43%,差異極顯著(P< 0.01),但進口疫苗和國產滅活苗相比差異不顯著(P>0.05).

表1　2012-2013年狂犬病抗體檢測

2.4犬腦狂犬病毒檢測2012-2013年共采集市場銷售犬犬腦1 012份,共檢測到狂犬病病毒1份,陽性率0.099%.其中2012年共檢測506份,病毒陽性1份,2013年檢測506份,病毒陽性0份.

3　討論

從2009年開始,廣西就參與了國家公益性項目子課題"免疫示范區狂犬病的凈化和示范效果評價"和"動物狂犬病快速診斷與有效疫苗研究",在以隆安縣為核心的免疫示范區內進行了狂犬病疫苗免疫,通過抗體檢測得知,8個采樣縣的抗體合格率差異較大,經調查發現,有些地區特別是肉狗養殖場的犬,由于養殖周期相對較短,在進行免疫后的較短時間即進行了采血檢測,造成了抗體滴度較低.而有些地區采集的樣品來源于年齡較大的看家狗,進行過多次的疫苗免疫,抗體水平較高.此外,犬的年齡對免疫效果有影響,可能與年齡小的犬發育不完全、母源抗體影響,免疫機能較差有關[5].

在本研究中,隨機抽取的寵物犬的狂犬病抗體水平較低.從2012年的西鄉塘區送檢樣品的檢測結果發現,僅有9%合格,2013年也僅有33%合格,該地區的樣品全部來自于寵物.趙永旺等[6]對泰州市寵物犬狂犬病免疫情況調查,發現免疫合格率為31.7%.寵物犬使用狂犬病多聯疫苗的犬只狂犬病抗體水平比較低,免疫合格率為11.8%;免疫單聯疫苗的犬抗體水平較好,免疫合格率為61.4%.說明盡管寵物主人對于犬貓的疾病治療較為重視,但對于免疫后的抗體產生效果卻知之甚少.寵物和人類的接觸機會更多,如果免疫后產生抗體較差,則后患無窮,建議寵物主人定期對犬、貓的狂犬病抗體進行檢測.本研究通過對采集樣品的犬中所應用的不同類別狂犬病疫苗的抗體合格率進行比較,結果顯示,進口苗的抗體合格率為78.66%,國產弱毒苗的抗體合格率為38.89%,其中國產滅活苗的抗體合格率為80.43%,滅活苗的效果優于弱毒苗,這和陳軍[5]等的報道一致.

對狂犬病免疫抗體進行監測,以及市場屠宰犬犬腦組織狂犬病抗原的檢測.結果發現,2010-2013年,抗體檢測合格率分別為:86.70%,90.21%, 60.92%,72.08%;市場犬犬腦狂犬病病毒檢出率分別為:3.66%,0.26%,0.20%,0;人間狂犬病發病數分別為:300,280,235,168人.2010-2011年,在廣西區采集市場銷售犬中犬腦狂犬病病毒陽性率1.38%(11/800),疑似狂犬病犬犬腦陽性率20%(5/ 25)[7].病毒檢出率呈下降趨勢,而人間發病數也呈下降趨勢.說明對犬進行免疫,提高犬的狂犬病抗體水平對減少人間狂犬病發病率起到重要作用.不同年份的抗體合格率抗體有差異,尤其是2012年的抗體合格率最低,推測和樣品來源、疫苗質量、不同批次檢測試劑盒的特異性有關.2012年所采集樣品中有較多的寵物樣品,所使用的疫苗主要是國產弱毒疫苗,動物疫病防治人員在免疫過程中,稀釋好的弱毒苗未能及時免疫、保存不當等均能導致免疫抗體合格率較低.

[1]Zhang,Hualei Wang,Fazal Mahmooda.Rabies virus glycoprotein is an important determ inant for the induction of innate immune re?sponses and the pathogenic mechanisms[J].2013,162(2-4): 601-613.

[2]湯重發,俞永新,劉景華,等.狂犬病病毒不同毒株的生物學特性研究[J].中國病毒病雜志,2014,4(3):179-186.

[3]李澤盛,劉愛林,譚榮榮,等.狂犬病研究進展[J].中國畜牧獸醫,2010,37(7):189-191.

[4]曾蘭,陸武,王雯,等.廣西狂犬病野毒株L基因3'端的多態性分析[J].中國預防獸醫學報,2009,31(11):906-909.

[5]陳軍,鄭文成,張朝陽,等.湖南部分地區免疫犬狂犬病免疫效果研究[J].中國動物檢疫,2009,26(12):56-58.

[6]趙永旺,蘇曉健,管遠紅.泰州市寵物犬狂犬病免疫情況調查[J].黑龍江畜牧獸醫,2014,5:114-115.

[7]韋顯凱,鄭敏,鄭列豐,等.2010-2011年廣西狂犬病監測及效果分析[J].畜牧與獸醫,2013,45(7):86-88.

S851.35

B

0529-6005(2016)02-0071-02

2014-10-28

農業公益性行業科研專項項目"動物狂犬病快速診斷與有效疫苗研究"(2001103032)

韋顯凱(1982-),男,獸醫師,博士生,主要從事畜禽傳染病診斷與防控,E-mail:wxkdnnm@163.com

鄭列豐,E-mail:zhengliefeng-999@163.com