張義敏, 李萍, 田明濤, 唐承
(1.山東中醫藥大學,山東濟南 250355;2.威海市胸科醫院,山東威海 264200)
β-欖香烯干預人肝細胞癌HepG2細胞蛋白質組學研究
張義敏1,2,李萍2,田明濤2,唐承2
(1.山東中醫藥大學,山東濟南250355;2.威海市胸科醫院,山東威海264200)
【目的】通過觀察不同濃度β-欖香烯作用于體外培養人肝細胞癌HepG2細胞的產生的差異性蛋白質表達,篩選β-欖香烯防治肝癌的作用靶點。【方法】于體外常規條件下,以0、10、30 μg/mL β-欖香烯培養基孵育人肝細胞癌HepG2 24 h,提取蛋白質后采用十二烷基硫酰鈉—聚丙烯酸胺凝膠電泳法(SDS-PAGE)分離蛋白,選取表達量升高或降低3倍以上的蛋白質點進行質譜鑒定,隨后運用Protein Chip PBS1j-C型蛋白質芯片閱讀儀將其檢測繪制成蛋白質質譜。使用GPS Explore V 3.6軟件對所有蛋白質質譜進行分析,并通過MASCOT V 2.1搜庫軟件進行檢索,以鑒定蛋白質質點。【結果】通過對β-欖香烯處理前后肝癌HepG2細胞蛋白雙向凝膠電泳圖譜分析,共得到91個差異蛋白質點。選擇表達量差異明顯的53個蛋白質點進行質譜分析,得到具有統計學意義的差異蛋白質點9個,其中表達上調3個,分別是UBE2V1、SF1、Annexin V;表達下調6個,分別是β-Actin、S100A6、HSP70、Keratin4、FUBP1、Keratin18。【結論】β-欖香烯可影響人肝細胞癌HepG2細胞的蛋白質表達,這些蛋白質可能是β-欖香烯防治肝癌的作用靶點。
β-欖香烯;肝癌;蛋白質組學;HepG2
原發性肝癌是嚴重危害人類生命健康的重大疾病之一。目前原發性肝癌的治療以手術為主[1],但對于特殊部位或者晚期患者,仍缺乏有效的治療手段。近年來,研究者們從中國傳統中藥中發現了一些具有抗腫瘤活性的有效成分,中藥有效成分抗腫瘤研究已成為國內外研究的熱點[2]。……