乳腺癌新輔助化療前后ER、PR、Ki-67和Her-2變化

周曉芳，王　增，李楚倩

(浙江省腫瘤醫院藥劑科，浙江 杭州 310022)

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乳腺癌新輔助化療前后ER、PR、Ki-67和Her-2變化

周曉芳，王增，李楚倩

(浙江省腫瘤醫院藥劑科，浙江 杭州 310022)

目的探討乳腺癌患者新輔助化療前后雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、Ki-67抗原(Ki-67)、人表皮生長因子受體-2(Her-2)表達的變化及意義。方法回顧性分析99例接受新輔助化療的乳腺癌患者臨床資料，觀察化療近期療效，免疫組化檢測化療前后乳腺癌組織中ER、PR、Ki-67、Her-2的表達，分析化療前四者的相關性，療效與其化療前表達的關系以及化療對其表達的影響。結果新輔助化療前ER與PR呈顯著正相關(r=0.731，P=0.000)，與Ki-67呈顯著負相關(r=-0.298，P=0.003)，PR也與Ki-67呈顯著負相關(r=-0.265，P=0.014)；化療結束后16例獲得PCR，PCR率為16.16%，ER、PR陰性表達的患者病理完全緩解(PCR)率高于陽性表達患者，差異有統計學意義(χ2值分別為12.038、10.834，均P<0.05)；化療前激素受體、Ki-67和Her-2陽性/陰性表達或過表達/非過表達間總有效率的比較差異均無統計學意義(χ2值分別為0.38、0.17、0.13、0.04，均P>0.05)；除去16例獲得PCR患者，剩余83例患者新輔助化療后Ki-67陽性率顯著降低，差異有統計學意義(χ2=7.923，P<0.05)，ER、PR陽性率、Her-2過表達率均無顯著變化，差異均無統計學意義(χ2值分別為0.965、1.364、0.392，均P>0.05)。結論ER、PR陰性表達的乳腺癌患者Ki-67表達增加，提示增殖能力較強，而新輔助化療可以下調Ki-67表達，降低腫瘤的增殖活性，ER、PR陰性患者對新輔助化療更為敏感。乳腺癌組織ER、PR和Ki-67表達的變化可以有效預測新輔助化療的療效。

乳腺癌；雌激素受體；孕激素受體；Ki-67抗原；人表皮生長因子受體-2

乳腺癌是婦科最常見的惡性腫瘤之一，發病率呈上升且年輕化的趨勢[1]。新輔助化療能夠有效殺滅病灶癌細胞，縮小手術范圍，降低臨床分期，增加保乳率，降低局部復發，是局部晚期乳腺癌的標準治療方法，也可應用于能手術的早期乳腺癌患者中[2-3]。雌激素受體(estrogen receptor，ER)和孕激素受體(progesterone receptor，PR)以及Ki-67抗原(Ki-67)、人表皮生長因子受體-2(human epidermal growth factor receptor-2，Her-2)是乳腺癌患者重要的預后指標，對于指導術后化療、分子靶向治療和內分泌治療以及療效預測具有重要的價值[4-5]。然而其對新輔助化療的療效預測價值尚存在爭議，為此，本研究探討了乳腺癌患者新輔助化療前后乳腺癌組織中ER、PR、Ki-67、Her-2表達的變化及意義。

1資料與方法

1.1一般資料

回顧性分析2013年1月至2015年5月浙江省腫瘤醫院收治的乳腺癌患者臨床資料，入選患者均符合以下條件：①均經病理診斷確診；②均行新輔助化療治療方案；③腫瘤-淋巴結-轉移(tumor-node-metastasis，TNM)分期Ⅱ～Ⅲ期；④化療前血、尿常規正常，影像檢查腫瘤無遠處轉移；⑤排除既往接受過內分泌治療、化療或手術治療患者。共納入99例患者，年齡29～69歲，中位年齡46歲；絕經前58例，絕經后41例；TNM分期Ⅱ期72例，Ⅲ期27例；組織學類型均為浸潤性導管癌。

1.2治療方法

所有患者均接受新輔助化療，其中42例采用蒽環類聯合紫杉類化療方案(表柔比星100mg/m2，多西他賽75mg/m2，環磷酰胺500mg/m2)；另57例采用蒽環類化療方案(表柔比星100mg/m2，氟尿嘧啶500mg/m2，環磷酰胺500mg/m2。以21天為1個化療周期，兩組均化療2～4個周期，化療結束后根據患者的意愿和化療反應情況，其中76例選擇乳腺癌改良根治術，23例選擇保乳手術。

1.3免疫組化檢測及判定標準

化療前均行空心針活檢穿刺獲取組織標本，化療后手術切除標本經10%的甲醛溶液固定后送檢，采用免疫組化檢測化療前后激素受體ER和PR、Ki-67和Her-2表達情況。判定標準為：ER和PR：>50%的細胞染色為強陽性(+++)，26%～50%的細胞染色為中等陽性(++)，1%～25%的細胞染色為陽性(+)，<1%的細胞染色為陰性(-)，定義ER和PR(+++/++/+)為ER和PR陽性表達，(-)為陰性表達；Ki-67：在高倍鏡下計數1 000個細胞，Ki-67陽性細胞計數≥10%判定為陽性表達，反之為陰性表達；Her-2：>10%的細胞重度的全細胞膜染色為陽性(+++)，>10%的細胞輕到中度的全細胞膜染色為可疑(++)，>10%細胞部分細胞膜的輕度染色或<10%細胞的細胞膜染色為沒有染色為陰性(-～+)，定義(-～++)為Her-2非過表達，+++為Her-2過表達。

1.4 療效標準

常溫彩色瀝青混合料的拌和，除拌和溫度和拌和時間外，其他工藝參數應符合JTG F40—2004中5.4的規定。

定義手術標本中無浸潤性腫瘤細胞為病理完全緩解(pathologic comp lete response，PCR)，根據實體瘤的療效評價標準(response evaluation criteria in solid tumors，RECIST)評價療效，腫瘤完全消失，持續時間達1個月以上為臨床完全緩解(complete response，CR)，腫瘤體積縮小量達30%以上且持續1個月以上為臨床部分緩解(partial response，PR)，腫瘤體積縮小不足30%但增加不足20%為病情穩定(stable disease，SD)，腫瘤體積增加超過20%或出現新的病灶為疾病進展(progressivedisease，PD)，其中CR、PR記為有效，SD、PD記為無效。

1.5統計學處理

采用SPSS 18.0統計軟件，計數資料用百分比表示，采用卡方檢驗；采用Spearman相關分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1新輔助化療前激素受體、Ki-67和人表皮生長因子受體-2表達的相關性分析

Spearman相關分析顯示，新輔助化療前ER與PR呈顯著正相關，與Ki-67呈顯著負相關，PR也與Ki-67呈顯著負相關，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1新輔助化療前激素受體、Ki-67和Her-2表達的相關性分析(r,P)

Table 1Correlation analysis of expressions of hormone receptor, Ki-67and Her-2 before neoadjuvant chemotherapy(r,P)

因子ERPRKi-67Her-2ER----PR0.731/0.000---Ki-67-0.298/0.003-0.265/0.014--Her-20.038/0.744-0.056/0.635-0.041/0.709-

2.2新輔助化療療效與化療前激素受體、Ki-67和人表皮生長因子受體-2表達的關系

化療結束后16例獲得PCR，PCR率為16.16%，ER、PR陰性表達的患者PCR率高于陽性表達患者，差異有統計學意義(χ2值分別為12.038、10.834，均P<0.05)；臨床療效方面，化療結束后CR27例，PR53例，SD15例，PD4例，化療前激素受體、Ki-67和Her-2陽性/陰性表達或過表達/非過表達間總有效率的比較差異均無統計學意義(χ2值分別為0.38、0.17、0.13、0.04，均P>0.05)，見表2。

表2　　新輔助化療療效與化療前激素受體、Ki-67和Her-2表達的關系[n(%)]

注：組內相比*P<0.05。

2.3新輔助化療前后激素受體、Ki-67和人表皮生長因子受體-2表達的變化

除去16例獲得PCR患者，剩余83例患者新輔助化療后Ki-67陽性率顯著降低，差異有統計學意義(χ2=7.923，P<0.05)，ER、PR陽性率，Her-2過表達率均無顯著變化，差異無統計學意義(P>0.05)，見表3。

表3新輔助化療前后激素受體、Ki-67和Her-2表達的變化[n(%)]

Table 3The expression changes of hormone receptor, Ki-67 and Her-2 before and after neoadjuvant chemotherapy[n(%)]

因子狀態化療前化療后χ2PER陽性49(59.04)43(51.81)0.9650.732陰性34(40.96)40(48.19)PR陽性40(48.19)35(42.17)1.3640.492陰性43(51.81)48(57.83)Ki-67陽性70(84.34)58(69.88)7.9230.031陰性13(15.66)25(30.12)Her-2過表達22(26.51)24(28.92)0.3920.887非過表達61(73.49)59(71.08)

3討論

3.1乳腺癌患者新輔助化療前后激素受體表達的變化及意義

研究認為，乳腺癌患者經治療達到PCR的患者生存率明顯提高，因此，PCR是目前乳腺癌療效的主要評估指標[3]。基于蒽環類化療方案的新輔助化療治療乳腺癌PCR約為10%，聯合紫杉類化療方案后可提高至20%左右。本研究99例乳腺癌患者化療結束后16例獲得PCR，PCR率為16.16%，與Avci等[2]的報道相似。作為激素依賴性腫瘤，乳腺癌細胞的生長依賴于激素受體ER和PR，其在乳腺癌的內分泌治療效果和預后評價中發揮著重要的左右，此外，還有助于預測不同激素受體表達程度患者新輔助化療的獲益程度。本研究結果發現，ER、PR陰性表達的患者PCR率高于陽性表達患者，差異有統計學意義(均P<0.05)。表明ER和PR陰性的乳腺癌患者對新輔助化療具有更好的反應性，能獲得更高的PCR，能從新輔助化療中獲益更多。這可能是由于ER和PR陰性的乳腺癌發展快、分化差，增殖能力較強，對內分泌治療不敏感，而對新輔助化療敏感度好，術后易復發。本研究結果還發現，除去16例獲得PCR患者，剩余83例患者新輔助化療后ER、PR陽性率均無顯著變化，差異無統計學意義(P>0.05)，提示雖然某些化療藥物能夠影響激素受體的表達，造成ER、PR陽性率化療后發生變化，但ER、PR受體是一種非常穩定的表型，化療藥物對其表達的影響有限，因而，化療后ER、PR陽性率并未出現顯著改變。另外，激素受體狀態對于指導內分泌治療具有重要的意義，因而，除了化療前后激素受體均為陰性表達的乳腺癌患者外，其他患者都可以考慮術后輔助內分泌治療[6]。

3.2乳腺癌患者新輔助化療前后Ki-67表達的變化及意義

Ki-67是一種增殖細胞相關的核抗原，是目前較為肯定的核增殖標志物，在細胞的G0期缺如，而G1、S、M、G2期均有表達，與細胞的有絲分裂密切相關，其功能與染色質相連，能反映多種惡性腫瘤的增殖率，與腫瘤的發展、轉移和預后密切相關，是腫瘤細胞增殖活性的可靠標記[7]。研究認為，Ki-67高表達的乳腺癌患者5年生存率低、預后差、復發率高，且Ki-67陽性乳腺癌患者對新輔助化療反應性更好[8]。本研究結果發現，化療前Ki-67陽性/陰性表達間總有效率的比較差異均無統計學意義(P>0.05)，可能是由于本組Ki-67陰性患者較少，只有18例，造成統計學上沒有差異。剩余83例患者新輔助化療后Ki-67陽性率顯著降低，差異有統計學意義(P<0.05)，表明新輔助化療能夠顯著下調Ki-67表達，發揮抗腫瘤增殖的作用。而新輔助化療前ER、PR與Ki-67呈顯著負相關(P<0.05)，表明激素受體陰性的乳腺癌患者具有較強的增殖能力。

3.3乳腺癌患者新輔助化療前后人表皮生長因子受體-2表達的變化及意義

Her-2是一種跨膜糖蛋白的原癌基因，與腫瘤細胞的生長、增殖和分化密切相關。研究認為，約20%～30%的乳腺癌患者Her-2明顯擴增或過表達，而Her-2過表達患者易復發，生存期短，是預后的獨立預測因子[9]。另外，Her-2過表達患者對內分泌治療反應性差，對新輔助化療以及分子靶向治療反應性好，可以獲得更好的PCR。本研究結果表明，Her-2過表達/非過表達患者間PCR和臨床療效比較差異無統計學意義，化療后Her-2過表達率也無顯著變化，差異無統計學意義。Her-2表達情況在新輔助化療療效評價中的價值尚存在爭議，還需要進一步觀察。

總之，本研究結果發現，ER、PR陰性表達的乳腺癌患者Ki-67表達增加，提示增殖能力較強，而新輔助化療可以下調Ki-67表達，降低腫瘤的增殖活性，ER、PR陰性患者對新輔助化療更為敏感。乳腺癌組織ER、PR和Ki-67表達的變化可以有效預測新輔助化療的療效。

[1]湯紅平,黃犁,張雁瑞,等.536例女性乳腺癌患者年齡構成與病理類型分析[J].中國婦幼健康研究,2013,24(2):209-210,218.

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[專業責任編輯：劉黎明]

Expression changes of ER, PR, Ki-67 and Her-2 in patients with breast cancer before and after neoadjuvant chemotherapy

ZHOU Xiao-fang, WANG Zeng, LI Chu-qian

(Department of Pharmacy, Zhejiang Tumor Hospital, Zhejiang Hangzhou 310022, China)

Objective To explore the expression changes and significance of estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), Ki-67 and human epidermal growth factor receptor-2 (Her-2) in patients with breast cancer before and after neoadjuvant chemotherapy. Methods Retrospective analysis was conducted on clinical data of 99 patients with breast cancer who treated by neoadjuvant chemotherapy. The recent curative effect was observed and the expressions of ER, PR, Ki-67 and Her-2 before and after neoadjuvant chemotherapy were detected with immunohistochemical method. The correlation among them before chemotherapy, the relationship between the expressions of them before neoadjuvant chemotherapy and curative effect as well as the influence of neoadjuvant chemotherapy on expressions were analyzed. Results The expression of ER before neoadjuvant chemotherapy was significantly positively related to PR (r=0.731,P=0.000), while significantly negatively related to Ki-67 (r=-0.298,P=0.003). And the expression of PR before neoadjuvant chemotherapy was also significantly negatively related to Ki-67 (r=-0.265,P=0.014). There were 16 cases with pathologic complete response (PCR) after chemotherapy, and the PCR rate was 16.16%. The PCR rate in ER and PR negative expression patients was higher than that in patients with positive expression, and the difference was statistically significant (χ2value was 12.038 and 10.834, respectively, bothP<0.05). Before chemotherapy, the total effective rate between hormone receptor, Ki-67 and Her-2 positive/negative expression or overexpression/non overexpression had no statistical significance (χ2value was 0.38, 0.17, 0.13 and 0.04, respectively, allP>0.05). The positive rate of Ki-67 after neoadjuvant chemotherapy in 83 cases decreased significantly, and it was statistically significant (χ2=7.923,P<0.05). The positive rate of ER and PR and overexpressoin rate of Her-2 had no significant changes, and the differences were not statistically significant (χ2value was 0.965, 1.364 and 0.392, respectively, allP>0.05). Conclusion The expression of Ki-67 increases in patients with breast cancer whose expressions of ER and PR are negative, which indicates that proliferation is strong. The neoadjuvant chemotherapy can cut down the expression of Ki-67 and reduce tumor proliferation activity. Patients whose expressions of ER and PR are negative are more sensitive to neoadjuvant chemotherapy. The expression changes of ER, PR and Ki-67 in breast cancer tissue can effectively predict the curative effect of neoadjuvant chemotherapy.

2015-12-30

周曉芳(1975-)，女，副主任藥師，主要從事基礎藥物與臨床藥物研究。

10.3969/j.issn.1673-5293.2016.03.013

R459.9

A

1673-5293(2016)03-0320-03