茶源酵母菌吸附茶多酚條件及機理初步分析的研究

姚勇芳,趙　鑫,廖延智

(廣東輕工職業技術學院,廣東廣州 510300)

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茶源酵母菌吸附茶多酚條件及機理初步分析的研究

姚勇芳,趙鑫*,廖延智

(廣東輕工職業技術學院,廣東廣州 510300)

本實驗主要研究茶源酵母菌富集茶多酚的吸附機理和條件。以吸附率及酵母菌數為指標,研究死活酵母吸附差異、吸附方式以及活酵母對茶多酚吸附條件。結果表明:茶源酵母對茶多酚吸附能力不同;編號C的酵母菌表面結構上擁有更具優勢的氫鍵基團,帶正電量較多,細胞表面的范德華力特性強,與茶多酚中的酚類基團有更大吸附作用,對茶多酚的吸附率最高,達到15.49%。活酵母吸附茶多酚能力顯著性強于死酵母。活酵母通過物理性吸附使茶多酚附著于酵母細胞表面,通過主動吸附為主進入細胞內部。茶多酚吸附率與酵母菌生長量密切相關,培養20 h,酵母菌與吸附率達到最高;培養轉速為200 r/min,培養溫度33 ℃,培養基pH為4.0,添加10 mL的30 mg/mL茶多酚溶液時,酵母菌對茶多酚吸附率達到21.03%。通過實驗研究,能夠為富含茶多酚應用于食品藥品行業提供一定的科學依據。

茶源酵母菌,茶多酚,吸附機理,吸附條件

酵母細胞具有很好的吸附性能,能吸附重金屬、酚類化合物、硫代化合物、芳香族化合物等,酵母細胞吸附重金屬的特性已廣泛地應用于污水處理[1-2],其表面的強吸附能力,也可用于食品生產中,用于改善食品的風味及口感,提高其穩定性,如Pradelles等[3]采用酵母細胞吸附去除紅酒中的4-乙基苯酚,降低了紅酒的辛辣味,提高了穩定性。

茶酵母是來源于低溫發酵制作烏龍茶時,發酵液底部的沉淀,經洗凈、消毒、干燥等再制造而成。它含有茶葉所有營養的精華包括咖啡因、茶堿、兒茶素、黃酮,茶氨酸、天冬氨酸等30多種氨基酸以及鉀、磷、鈣等30種無機元素。茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶葉中一類主要的化學成分。從天然茶葉中提取的茶多酚類物質具有抗氧化、抗誘變、抗輻射、抗癌[4]、抗菌、清除自由基[5]等多種功效。茶多酚的常規提取方法有溶劑浸提法、金屬離子沉淀法、樹脂吸附分離法、超臨界流體萃取法、超聲波浸提法及微波浸提法[6]。酵母細胞可以作為酚類物質的承載體,將其從某個體系中吸附去除或胞裂釋放于另一個體系,從而有效提取茶多酚,但目前相關研究報道極少。

茶多酚及其衍生物的開發和利用,已引起國內外茶學、藥學及食品行業等研究領域人士的極大關注,有必要對其吸附機理及其吸附的影響因素進行深入研究。本實驗通過對茶源性酵母細胞對茶多酚的吸附機理及富集條件影響因素研究,為富含茶多酚酵母應用于食品藥品行業提供一定的科學依據。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

普洱茶(用于分離酵母菌)廣州三支葉貿易有限公司;茶多酚河南天成生物科技有限公司。

馬鈴薯葡萄糖培養基:稱馬鈴薯(洗凈去皮)200 g取切塊,加適量水煮沸2 min打漿2 min,沖洗勻漿機并定容到1000 mL,加入葡萄糖20 g,溶化分裝,121 ℃滅菌20 min,待用。

虎紅培養基廣東環凱微生物科技有限公司。

10%的福林酚試劑廣州翔博生物科技有限公司;7.5%碳酸鈉溶液廣州正和公司;500 mg/kg農用鏈霉素東莞國豐生物科技有限公司;磷酸鹽緩沖鹽廣州市都博化工有限公司;三氯甲烷、十六烷、無水乙醚、正己烷廣州市櫧鑫化工有限公司,所用試劑為分析純配制。

SE6027型電子天平梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;HPX-9162 MBE型數顯電熱培養箱日本Yamato公司;SPX-150C型恒溫恒濕培養箱日本Yamato公司;SW-CJ-2D型紫外超凈工作臺,蘇州凈化設備有限公司;SC-3614高容量低速離心機安徽中科中佳科學儀器有限公司;QYC-200 恒溫培養搖床上海福瑪實驗設備有限公司;S22PC可見分光光度計上海棱光技術有限公司;AB204-N電子分析天平梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;DK-S26數顯電熱恒溫水浴鍋上海精宏實驗設備有限公司;YXQ-3OSH高壓滅菌鍋上海博迅實業有限公司;勻漿機天津泰斯特儀器有限公司。

1.2實驗方法

1.2.1茶多酚檢測標準曲線方程研究

1.2.1.1茶多酚標準系列茶多酚標準儲備液:稱取(0.110±0.001)g茶多酚,于100 mL容量瓶中溶解并定容到刻度,搖勻(現配)。采用移液管分別移取1.0、2.0、3.0、4.0、7.0、10.0 mL于50 mL容量瓶中,分別用水定容到刻度,搖勻。

1.2.1.2測定移取茶多酚工作液,水(空白對照),測試液各1.0 mL于50 mL容量瓶內,分別加入5.0 mL的10%福林酚,反應5 min,加入4.0 mL 7.5% Na2CO3,加水定容至刻度,搖勻,室溫下放置1 h,用10 mm比色皿在765 nm波長下,采用可見分光光度計測定吸光度,以吸收度A對系列濃度c(μg/mL)作回歸,得到標準曲線方程。

1.2.2茶源酵母菌吸附茶多酚機理的研究

1.2.2.1吸附茶多酚的茶源酵母菌篩選普洱茶用無菌杯2～8 ℃冷藏2 h后用勻漿機磨粉,80～200目過篩收集。無菌水稀釋涂布到裝有500 mg/kg農用鏈霉素的虎紅培養基平板上。挑選酵母菌典型特征菌落,40倍鏡檢,劃線分離,分別編號,收集虎紅斜面培養基。分別挑取2環不同酵母菌斜面接入裝有100 mL馬鈴薯葡萄糖培養基的錐形瓶中,同時加入10 mL 50 mg/mL過濾除菌的茶多酚溶液,于28 ℃ 200 r/min的搖床中培養20 h,采用福林酚法測茶多酚吸光度,計算吸附率,篩選具有吸附茶多酚能力的酵母菌。酵母菌菌落總數依據GB 4789.15-2010方法。茶多酚吸附率測定:取適量茶多酚土豆培養液于離心管,3500 r/min離心15 min,取上清液,用水稀釋至100 mL,測定參照1.2.1測定吸光度。

式中,A:樣品測試液吸光度;V:樣品體積,100 mL;d:稀釋因子(通常為1 mL稀釋成100 mL,則其稀釋因子為100);SLOPEstd:茶多酚標準曲線斜率;V1:上清液體積,mL。

式中a:吸附前溶液的茶多酚含量;b:吸附后溶液的茶多酚含量。

1.2.2.4茶源酵母菌吸附茶多酚方式研究取3瓶裝有100 mL馬鈴薯葡萄糖培養基的錐形瓶,包扎滅菌。冷卻后向其中兩瓶接種2環酵母菌C,28 ℃搖床培養20 h后,其中1瓶加入10 mL 50 mg/mL經過濾除菌的茶多酚溶液;另外1瓶進行加熱煮沸,滅活酵母菌,再加入10 mL 50 mg/mL經過濾除菌的茶多酚溶液,兩瓶平行于28 ℃靜置20 h后檢測茶多酚吸光度,比較死酵母、活酵母對茶多酚吸附區別。同時,將10 mL 50 mg/mL過濾除菌的茶多酚溶液加入第3瓶馬鈴薯葡萄糖滅菌培養基中,28 ℃靜置20 h,檢測茶多酚吸光度,作為酵母吸附對照實驗。

1.2.3茶源酵母菌吸附茶多酚條件研究

1.2.3.1培養時間對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響8瓶裝有100 mL馬鈴薯葡萄糖培養基的錐形瓶,分別加入10 mL 50 mg/mL過濾除菌的茶多酚溶液,調pH至4.0,接種2環編號C酵母菌,于28 ℃的搖床中恒溫培養,轉速200 r/min,分別培養0、4、8、12、16、20、24、28 h后測定酵母菌數,研究酵母菌生長曲線,檢測茶多酚吸光度,計算培養基茶多酚含量。另準備8瓶100 mL馬鈴薯葡萄糖培養基,不加茶多酚溶液,作為對照,研究酵母菌生長曲線。

1.2.3.2培養轉速對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響5瓶裝有100 mL馬鈴薯葡萄糖培養基的錐形瓶,各加入10 mL 50 mg/mL過濾除菌的茶多酚溶液,調pH至4.0,接種2環編號C酵母菌,分別100、150、200、250、300 r/min搖瓶培養,溫度28 ℃培養20 h。測定茶多酚吸光度,計算吸附率,選擇適宜的培養轉速。

1.2.3.3溫度對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響5瓶裝有100 mL馬鈴薯葡萄糖培養基的錐形瓶,各加入10 mL 50 mg/mL過濾除菌的茶多酚溶液,調pH至4.0,接種2環編號C酵母菌,轉速為200 r/min,分別在23、28、33、38、43 ℃搖瓶培養20 h,測定培養基茶多酚吸光度,測定培養基中茶多酚含量,選擇最適吸附溫度。

1.2.3.4茶多酚濃度對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響吸取10 mL 10、30、50、70、90 mg/mL 過濾除菌的茶多酚溶液分別加入裝有100 mL馬鈴薯葡萄糖培養基錐形瓶中,調pH至4.0,分別接種2環編號C酵母菌,33 ℃轉速為200 r/min搖瓶培養20 h,測定培養基中茶多酚吸光度,計算吸附率,選擇最適茶多酚濃度。

1.2.3.5pH對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響5瓶裝有100 mL馬鈴薯葡萄糖培養基的錐形瓶,各加入10 mL 30 mg/mL過濾除菌的茶多酚溶液,調pH分別至 3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、6.0、7.0,各接種2環編號C酵母菌,33 ℃轉速為200 r/min搖瓶培養20 h,測定培養基中茶多酚吸光度,計算吸附率,選擇最適茶多酚pH。

1.2.3.6正交設計優化酵母C的吸附條件考慮到諸多因素對酵母C的吸附率影響,本文在單因素考察的基礎上,選取影響較顯著的4個因素作為考察對象,即培養時間、溫度、轉速以及茶多酚濃度,以吸附率為指標,通過L9(34)正交設計(表1)實驗優選出最佳工藝條件。

表1　正交設計水平因素表Table 1　Factor level in orthogonal designing test

2　結果與分析

2.1茶多酚檢測標準曲線方程研究

由圖1可知,茶多酚檢測的標準曲線方程為y=0.0014x-0.0084,決定系數R2為0.9992,說明直線與原始數據擬合度較好。

圖1　茶多酚檢測標準曲線圖Fig.1　Standard curve of tea polyphenols detection

2.2茶源酵母菌吸附茶多酚機理的研究

2.2.1吸附茶多酚茶源酵母菌的篩選研究將普洱茶粉通過鏈霉素虎紅培養基選擇性分離,得到典型酵母菌菌落,如圖2。研究資料表明[9],茶源性酵母菌主要是產生酒精和產酯等生香酵母。如:異型漢遜酵母(Hansenulaanomala),魯氏酵母(Saccharomycesrouxii),球擬酵母(TorulopsisBerlese),釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae),酒香酵母屬(Brettanomycessp),假絲酵母屬(Candidarkhout),產膜畢氏酵母(Pichiamembranaefaciens),小橢圓酵母(Saccharomycesmicroellipsoides)等。

圖2　茶源酵母篩選及編號C酵母菌鏡檢圖片Fig.2　The pictures of tea yeast selection and microscopic examination of serial number C yeast

通過茶多酚吸附能力實驗,將吸附能力較強的五種酵母菌,隨機編號A～E。酵母細胞的成分對其吸附性能有較大影響,不同酵母菌中蛋白質和脂類種類及含量不同,新陳代謝能力不同,造成不同酵母菌的吸附能力不同。由圖3可知,編號C的酵母菌對茶多酚的吸附率最高,達到15.49%。

表2　酵母細胞表面的疏水性Table 2　Cell surface hydrophobicity of yeast

表3　酵母細胞菌懸液對不同有機溶劑的吸附情況Table 3　Adsorption of yeast cell suspension for different organic solvents

圖3　吸附茶多酚的茶源酵母篩選結果Fig.3　The screening results of tea polyphenols adsorbed tea polyphenols

2.2.2茶源酵母菌細胞表面疏水性對吸附的影響非極性分子之間存在有弱的、非共價的疏水相互作用,它們在水相中為避開水分子而相互聚集。細胞表面與其它分子的聚集吸附的傾向可用細胞表面疏水性表示[[10]。采用微生物粘著碳烴化合物法(MATH法)測得分離得到五種不同茶源酵母細胞表面疏水性,結果如表2所示。CSH值越大,表明疏水性越強由表2可見,酵母C的CSH值達到50.2±3.17,細胞表面具有強的疏水性。茶源酵母細胞表面具有可形成氫鍵的基團可能是影響細胞表面疏水性的重要因素,且這些基團暴露位點越多,與茶多酚結合的位點則越多,則該細胞具有的茶多酚吸附能力則更強[11],酵母細胞壁存在富含-OH的β-葡聚糖,編號C的酵母菌對茶吸附率較高酵母細胞壁可能原因是該酵母菌在結構上擁有較其他酵母更有優勢的作用基團,與茶多酚中的酚類基團有更大吸附作用力,可通過氫鍵的作用吸附茶多酚。

2.2.3酵母細胞表面給電性的測定選用三氯甲烷、十六烷、無水乙醚和正己烷四種溶劑測定CEC,其中三氯甲烷呈酸性,作為電子接受體,而無水乙醚呈堿性,可作為電子給予體;十六烷和正己烷為中性非極性溶劑,十六烷的性質與三氯甲烷接近,正己烷的性質與無水乙醚相似,但是,十六烷比正己烷表面存在更大的范德華力[12-13]。酵母細胞菌懸液對不同有機溶劑的吸附情況(CEC)如表3表示,從不同茶源細胞對三氯甲烷和無水乙醚的吸附情況比較來看,茶源酵母A和B與三氯甲烷(電子接受體)的親和力比與無水乙醚的更強,細胞表面帶負電,與細胞本身的正電性相比,茶源酵母B帶負電量較多。茶源酵母C和D與無水乙醚(電子給予體)親和力更強,細胞表面帶正電,與自身的負電性相比,茶源酵母D帶正電量較多。茶源酵母E與三氯甲烷和無水乙醚的親和力相近。與本身電荷相互作用相比,C、D、A細胞表面的范德華力更加顯著,與十六烷的親和力較強,而B、E的范德華力比電荷作用力小。細胞表面的范德華力特性很強,也有利于其對茶多酚的吸附。

結合表3和圖3結果,可知酵母細胞對茶多酚的吸附性能與細胞表面的帶電性及范德華力有關,細胞表面帶正電量大,且范德華力越大,越有利于吸附茶多酚,吸附量可能越大。相反,細胞帶負電可能會對茶多酚的吸附產生影響,帶負電量越大,可能越不利于吸附。這與Pradelles等采用酵母吸附紅酒中4-乙基苯酚進行吸附機制的研究結論一致[3]。

2.2.4茶源酵母菌吸附茶多酚方式研究由圖4可知,由于自動氧化引起的茶多酚的損失,不影響死活酵母對茶多酚吸附能力比較實驗。活酵母菌和死酵母菌對于茶多酚的吸附能力不同,活酵母菌的吸附率為15.88%±2.45%,而死酵母菌的吸附率僅為5.20%±1.02%,兩者對于茶多酚的吸附能力具有顯著的差異(p<0.05)。活酵母細胞對茶多酚的吸附包含了結構吸附(物理吸附)與代謝吸附(化學吸附),酵母細胞壁存在富含-OH的β-葡聚糖,可通過氫鍵的作用吸附茶多酚;同時,由于細胞表面的疏水性、電性以及范德華力等特性,使茶多酚首先以物理吸附的方式附著于酵母細胞表面[14]。同時茶多酚受到細胞內部大量蛋白質的化學吸附作用進入細胞內部,茶多酚依靠氫鍵或者疏水鍵與細胞內蛋白質多點結合,茶多酚的大量酚羥基與蛋白質主鏈的-NHCO,側鏈上的-OH、-NH2以及-COOH以氫鍵的形式多點結合[15]。茶多酚進入細胞內部,以主動吸附為主。對于活體細胞而言,可以利用細胞新陳代謝作用提供能量供茶多酚完成主動運輸過程;而被動吸附行為不需要新陳代謝作用提供能量,主要依靠胞內的化學物質與茶多酚的氫鍵作用而進行,可以少量地發生在死亡酵母細胞上。

圖4　活酵母與死酵母吸附茶多酚能力比較Fig.4 　Comparison of the adsorption of tea polyphenols with live yeast and yeast

2.3茶源酵母菌吸附茶多酚條件研究

2.3.1培養時間對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響研究由圖5可知,添加茶多酚的培養基茶源酵母生長速度優于未添加茶多酚的對照組,20 h生長量最高,說明適當添加茶多酚可以促進茶源酵母生長,這與茶源酵母長期在茶葉中的適應特性有關。

圖5　茶源酵母菌生長與吸附茶多酚的關系Fig.5　The relationship between the growth of tea yeasts and the adsorption of tea polyphenols

培養基中茶多酚含量隨培養時間延長而逐漸下降,20 h時含量最低,此時酵母菌生長量最高,說明酵母菌吸附茶多酚有利于增殖。20 h后,酵母菌生長進入衰亡期,部分酵母菌出現自溶現象,導致吸附到胞內的茶多酚又暴露出來,轉移到培養基中,培養基中茶多酚含量略有上升[16]。

2.3.2培養轉速對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響研究由圖6可知,在發酵液溶氧濃度充足時,酵母菌以好氧生長為主,菌體增殖迅速。同時,提高轉速,茶多酚能夠與酵母菌表面充分接觸,提高活性酵母菌化學吸附茶多酚的能力。轉速為200～300 r/min時,酵母菌吸附茶多酚吸附趨于飽和,吸附率穩定。因此,酵母菌吸附培養轉速設置為200 r/min適宜。

2.3.3培養溫度對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響研究由圖7可知,培養溫度在28～38 ℃之間的酵母菌吸附率較高,33 ℃達到最高。茶源酵母菌來源于發酵茶,茶葉渥堆過程內部溫度高,造成茶源性酵母菌具有較高耐熱性,最適生長溫度較一般酵母菌(28～30 ℃)比較寬,所以培養基中茶多酚減少與活酵母菌生長明顯相關。同時,最適生長溫度的提高,會使酵母蛋白質的結構變得松散,分子內的疏水性基團就會充分的暴露出來,有利于多酚的羥基與之絡合,更多的酵母蛋白與茶多酚參與絡合反應[17]。

圖6　轉速對酵母菌吸附茶多酚的影響Fig.6　Effect of rotational speed on the adsorption of tea polyphenols by yeasts

圖7　溫度對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響Fig.7　Effect of temperature on the adsorption of tea polyphenols by tea yeasts

2.3.4茶多酚濃度對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響研究由圖8可知,培養基中茶多酚濃度對酵母菌生長影響不大,培養基中添加10 mL的30 mg/mL茶多酚溶液時,酵母菌吸附茶多酚的量趨于飽和[7],細胞中蛋白質不能提供充足的空間位點供茶多酚分子絡合。而繼續提高培養基中茶多酚的量,酵母菌的吸附總量差異不大,造成吸附率幾乎成線性下降。因此,培養基中添加10 mL 30 mg/mL茶多酚量,較為合適。

圖8　茶多酚濃度對酵母菌吸附茶多酚的影響Fig.8　Effects of tea polyphenols concentration on the adsorption of tea polyphenols by yeasts

2.3.5pH對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響研究反應體系的 pH在一定程度上也會影響茶源酵母細胞對茶多酚的吸附。由于茶多酚溶液在pH>8.0時極不穩定,所以,在本實驗考察的pH范圍為3.0～7.0。由圖9可知,茶源酵母細胞在pH為3.0～4.0時對茶多酚的吸附率能力強于pH為4.5～7.0時的吸附,可能是因為茶源酵母細胞中大多數蛋白質的等電點在pH3.0～4.0附近,而在等電點附近1個pH的范圍內,蛋白質的靜電斥力小于多酚和蛋白質之間交聯的引力[18]。當 pH在此附近時,有較多的蛋白質與茶多酚參與絡合反應。

圖9　pH對茶源酵母菌吸附茶多酚的影響Fig.9　Effect of pH value on the adsorption of tea polyphenols by yeasts

2.3.6正交設計優化酵母C的吸附條件由表4和表5的實驗結果分析表明,酵母C對茶多酚吸附的因素影響順序為時間(A)>溫度(B)>轉速(C)>茶多酚濃度(D),最佳實驗方案為A2B2C2D1,即培養時間為20 h,培養溫度為33 ℃,攪拌速率為200 r/min,添加10 mL濃度為30 mg/mL茶多酚。

表4　正交實驗結果表Table 4　Projects and results of orthogonal designing test

表5　方差分析表Table 5　ANOVA table

按正交實驗結果得出的最優吸附條件,重復實驗3批,所得的吸附率分別為21.28%、20.03%、21.78%,平均吸附率為21.03%±0.91%,說明優選吸附工藝重現性良好。今后進一步對茶源酵母吸附茶多酚因素研究以及因素水平顯著性差異優化的條件設計。

3　結論

茶源酵母對茶多酚吸附能力不同,編號C的酵母菌表面結構上擁有更有優勢的氫鍵基團,帶正電量較多,細胞表面的范德華力特性強,與茶多酚中的酚類基團有更大吸附作用。對茶多酚的吸附率最高,達到15.49%。活酵母吸附茶多酚能力顯著性強于死酵母。活酵母通過物理性吸附使茶多酚附著于酵母細胞表面,通過主動吸附為主進入細胞內部。

通過茶多酚吸附優化條件研究可知:茶多酚吸附率與酵母菌生長量密切相關,培養20 h時,酵母菌與吸附率達到最高;優化菌培養轉速為200 r/min,培養溫度33 ℃,培養基pH4.0,添加10 mL的30 mg/mL茶多酚溶液時,酵母菌對茶多酚吸附率達到21.03%。

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Study on the mechanism and conditions of adsorption of Yeast cells from fermented tea towards tea polyphenols

YAO Yong-fang,ZHAO Xin*,LIAO Yan-zhi

(Guangdong Industry Technical College,Guangzhou 510300,China)

The mechanism and conditions of adsorption of yeast cells from fermented tea towards tea polyphenols were studied.With the determination of adsorption rate and yeast colony counts as indicators,the difference adsorption mode of tea polyphenols about between live and dead yeast and the adsorption conditions of live yeast were investigated.The results were as follows:the tea yeast had different adsorption capacity for tea polyphenols.Yeast C had more advantage of hydrogen bonding groups on the surface of the structure.The Van Edward force was strong because of the more positive charge of the surface,which lead to more adsorption effect with phenolic groups in tea polyphenols.The adsorption rate of tea polyphenols was higher,reaching to 15.49%.The adsorption ability to tea polyphenols of live yeast was significantly stronger than dead yeast.The adsorption rate of tea polyphenols was closely related to the growth of yeast.The highest adsorption rate was obtained when cultured for 20 h.Yeast gained the highest adsorption rate of tea polyphenols in the optimized culture condition:the rotation speed was 200 r/min,the temperature was 33 ℃,pH was 4.0,and the 10 mL tea polyphenols solution(30 mg/mL)was added.This results may provide some scientific basis for the food and drug industry.

tea yeast;tea polyphenols;adsorption mechanism;adsorption conditions

2015-11-02

姚勇芳(1976-),男,教授,碩士研究生,研究方向：食品生物技術,E-mail:809833140@qq.com。

趙鑫(1982-),男,博士研究生,講師,研究方向：食品生物技術,E-mail:zhaoxin.gy@qq.com。

廣東省教育部產學研結合項目(2012B091100402)；廣東省創新強校工程專項資金項目(1A20201)。

TS201

A

1002-0306(2016)09-0179-07

10.13386/j.issn1002-0306.2016.09.027