Beckman Coulter Access DXI800與Cobas e411兩種化學發光免疫檢測系統檢測血清總β-HCG結果的比對分析

秦雪君，安敏芝，李揚宇，毛起官，林青福建中醫藥大學附屬人民醫院檢驗科，福建福州　350009

Beckman Coulter Access DXI800與Cobas e411兩種化學發光免疫檢測系統檢測血清總β-HCG結果的比對分析

秦雪君，安敏芝，李揚宇，毛起官，林青
福建中醫藥大學附屬人民醫院檢驗科，福建福州350009

目的 通過比較同一實驗室2臺不同化學發光免疫檢測系統（貝克曼DXI800直接化學發光、Cobas e411電化學發光）測定血清總β-HCG的結果，探討2種方法檢測β-HCG的是否具有可比性，為不同儀器測定實驗結果互認提供依據。方法Beckman Coulter Access DXI800使用美國伯樂公司提供的質控品Biorad低值、中值，Cobas e411采用羅氏原裝質控品低值、中值分別對兩臺儀器進行日常室內質控，保證結果均在控。在此基礎上，選取不同濃度常規血清標本40份先在Beckman Coulter Access DXI800化學發光系統進行檢測，再用Cobas e411電化學發光檢測系統進行檢測。選擇貝克曼DXI800化學發光檢測系統作為參考儀器進行數據比對。所有檢測結果均在2 h內完成。結果2種檢測系統對不同濃度的質控品檢測總β-HCG的結果日間CV及總CV均小于15%的日間CV允許范圍。40個不同濃度的β-HCG在兩個檢測系統上的檢驗結果進行配對t檢驗的結果P值為0.563＞0.05，結果差異無統計學意義。相關性分析顯示相關系數r2為0.9936＞0.95，符合美國臨床化學實驗室標準化委員會EP9-A2文件的要求，滿足實驗要求。結論 通過比對實驗，可以看出兩種檢測系統對總β-HCG檢測結果具有較高的準確性和一致性，避免了結果差異給臨床診斷帶來的困擾，可以同時發布檢測結果。

化學發光；β-HCG；比對分析

［Abstract］Objective To Compare two different chemiluminescene assays（Beckman Coulter Access DXI800 and Cobas e411）for the detection of human serum total β-chorionic gonadotropin（β-HCG）and discuss they are comparable between the two different ECL assays,in order to provide evidence for mutual accredit between different assay systems.Methods Biorad low and median value QC were used for Beckman Coulter Access DXI800 and Roche original low and median value QC were used for Cobas e411 daily,guaranteed all the results were in control.On this basis,40 different serum sampleswere compared of β-HCG by Beckman Coulter Access DXI800（candidate method）and Cobas e411（reference method）,all data were tested in 2 hours.Results The different QC daily CV and total CV for β-HCG tested by two analyzers were less than 15%of the day CV allows the scope of.Data of 40 different concentrations of β-HCG in two test systems were paired by t test,showed no significant difference（P=0.563＞0.05）.Correlation analysis showed the coefficient r2was 0.9936＞0.975, in line with the requirements of the EP9-A2 file of the American clinical chemistry laboratory standardization committee, which met the requirements of the experiment.Conclusion As results,two kinds of detection system for β-HCG test results had good accuracy and correlation,avoided the trouble of clinical diagnosis caused by the differences as two results were acceptable.

［Key Words］Chemiluminescene；Human Serum Total β-Chorionic gonadotropin；Comparison

人體絨毛膜促性腺激素 （HCG）是一種糖蛋白激素，一旦妊娠即可從血循環中檢測出。HCG測定在臨床中主要用于正常妊娠、異位妊娠、先兆流產、葡萄胎及絨毛膜癌的監測、治療及預后隨訪［1］。HCG在血液中有多種存在形式，除包括一分子α-亞基和一分子β-亞基的完整HCG分子外，還有其他幾種不同形式的HCG分子，如糖基化HCG分子、缺刻HCG分子、β-亞基C末端肽缺失HCG分子、游離β-亞單位、游離α-亞單位等［2］。目前已知的HCG分子上有16個抗原決定簇了，其中5個在α-亞基上，7個在β-亞基上，4個抗原決定簇是結合依賴性的，另外還有4個抗原決定簇只有在游離β-亞基上才能檢出［3］。針對HCG分子的檢測，不同實驗室有不同的檢測系統，有針對血清中所有的HCG分子，或只是檢測全HCG分子，或針對游離的β-亞基。目前，發展較快，應用較廣的檢測方法是針對總β-亞基（β-HCG）的化學發光法［4］。由于其方法穩定，快速，準確而受到各大醫院的歡迎。筆者所在醫院目前有2套不同化學發光檢測系統 （Beckman Coulter Access DXI800直接化學發光、Cobas e411電化學發光）測定血清總β-HCG。兩套系統均為磁性技術，但前者為直接化學發光，后者為電化學發光。為了保證兩臺儀器對血清總β-HCG檢測結果的一致性，作者對2臺儀器的血清總β-HCG檢測結果進行了比對實驗分析，以確保同一實驗室兩套檢測系統結果的可靠性，避免結果差異給臨床診斷帶來的困擾。

1　資料與方法

1.1一般資料

隨機收集該院40例患者的新鮮血清標本，年齡（25～80歲），無溶血，黃疸，按照項目檢測要求保存。其血清β-HCG濃度盡可能均勻分布在檢測范圍內（0～1 000 U/L）。其中有17%的標本血清β-HCG濃度超過試劑盒的檢測范圍。

1.2儀器與試劑

一臺Beckman Coulter Access DXI800化學發光免疫檢測儀（購于2010年）用于免疫常規項目檢驗，一臺Cobas e411電化學發光免疫檢測儀（購于2012年）用于急診檢驗。2臺儀器檢測試劑均為廠家提供的配套試劑，校準品。

1.3方法

1.3.1實驗原理以Beckman Coulter Access DXI800化學發光測定為參比方法 （X），Cobas e411電化學發光測定為待評方法 （Y），儀器檢測原理均為雙抗體夾心法。Beckman Coulter Access DXI800化學發光測定以兔抗βHCG-堿性磷酸酶結合物和包被著山羊抗小鼠IgG-小鼠單克隆抗βHCG復合物的順磁性微粒及血清HCG形成夾心復合物，借磁場結合，通過化學發光底物Lumin-Phos 530發光檢測。Cobas e411以生物素化的抗HCG、釕標記的抗HCG與血清HCG形成夾心復合物，借生物素與鏈霉素親和素包被的微粒子結合，通過電極加壓后發光。

1.3.2實驗標本測定實驗前按儀器說明書對儀器進行常規維護和保養、校準和質控，然后測定標本。實驗期間每天的低、中質控值在控才能進行樣本測定，每天隨機收集2～10份新鮮血清，2 h內在2臺儀器上完成檢測。

1.3.3數據離群值篩查按照EP9-A2文件進行方法間離群值篩查，通過測定方法間測定值間的均值，均值間的差值，超過均值的4倍為離群值，若離群值＞1應調查標本。

1.3.4兩臺儀器相關性分析按照EP9-A2文件進行可信度判斷，根據比對數據得出回歸方程及相關系數r2，并用相關系數r2做粗略判斷，若r2≥0.95則認為X取值范圍合適，直線回歸統計的斜率和截距可靠，兩檢測系統結果間具有良好相關性。

1.3.5兩種系統給定濃度水平檢測結果偏倚評估根據臨床要求，將給定的3個預定水平濃度Xc低值（5 IU/L）、中值（500 IU/L）、高值（1000 IU/L）代入回歸方程，計算待評方法（Y）與參比方法（X）之間的系統誤差（SE）和相對偏倚（SE%）。SE=lYc-Xcl，SE%=（SE/Xc）×100%。本文設定的β-HCG TEa為20%，以SE＜1/2 TEa為臨床可接受標準，則認為兩種系統間的檢測結果具有可比性。

1.4統計方法

采用SPSS 17.0統計學軟件對數據進行秩和檢驗及相關性分析。

2　結果

2.1精密度比較

表1　兩臺儀器測定總β-HCG的精密度比較（IU/L）

2.2方法間離群值檢測

2種檢測系統的數據經過分析，無離群值。

2.3比對實驗

2臺儀器分別檢測40份血清樣本總β-HCG檢測結果呈非正態分布，對此進行秩和檢驗，結果顯示P值為0.563（＞0.05），兩臺儀器的結果差異無統計學意義。

2.4相關性分析

2種檢測系統的相關分析見圖1，相關系數r2= 0.9936＞0.95，截距a=0.799，斜率b=0.909，回歸方程y= 0.909x+0.799。說明回歸統計的斜率和截距可靠，可以用此評估兩種檢測系統間的系統偏倚。

圖1　兩臺儀器測定結果均值散點圖

2.5結果偏倚評估

總β-HCG在Cobas e411檢測系統上的3個濃度水平以Beckman Coulter Access DXI800化學發光測定為參比方法的SE和SE%，均＜1/2 TEa。見表2。

表2　兩種檢測系統的偏倚評估

3　討論

醫學檢驗結果的互認是檢驗醫學發展的需要，而報告互認的基礎則是同一檢測項目在不同檢測系統得出的結果是否具有可比性。近年來，隨著自動化儀器的大量使用，同一實驗室經常有2套不同的檢測系統。該院擁有Beckman Coulter Access DXI800與Cobas e411 2種化學發光免疫檢測系統，2套檢測系統由于反應體系不同，反應池差異有統計學意義，因此如何減少誤差，保證結果的準確可靠，實現結果之間的可比性，是檢驗工作的重點。比對實驗是實現準確度溯源和檢驗結果可比性的重要途徑［5-6］。為了使各檢測系統的檢測結果達到一致，需要進行系統間結果的比對及偏倚評估，不同檢測系統間的比對結果超過預期偏倚時，分析原因后進行校正，確保檢測結果一致，檢驗報告正確發出，便于臨床結果解釋。

血清β-HCG在臨床應用廣泛，對于先兆流產，輸卵管妊娠及妊娠滋養層疾病有重要意義。為保證我科兩套檢測系統測量結果的準確性和一致性，此次實驗對血清β-HCG這一檢測項目進行了比對實驗。該研究參考了美國CLSI EP9-A2文件［7］，使用病人樣本進行方法比對，這樣可以減少基質效應。由于室間質評、室內質控品的制備與血清樣本制備過程不同，參與室間質評、室內質控品的樣本進行質量控制時，無法評估患者分析前的各步驟，即標本采集、傳遞及處理等對測定結果的影響［8］。因此使用臨床新鮮血清比對能更加準確反映測定結果偏倚的真實情況。

該院Beckman Coulter Access DXI800化學發光免疫檢測系統參加了2015年衛生部臨床檢驗中心全國腫瘤標志物室間質評，成績優秀，結果可靠，故以該系統為參考系統。實驗室對標本的檢測，通常每份樣本只做一次檢驗就發出報告，這要求檢測系統檢出的結果必須有良好的重現性。精密度是檢測重現性的指標,因此，對檢測系統進行精密度驗證是必需的，最基本的要求［9-10］。該實驗室2臺儀器低值、高值2個批號的質控物測定β-HCG結果日間及總CV均＜15%，表明兩套檢測系統的精密度較好，檢測結果可靠。本次比對實驗的結果表明：2臺儀器的檢測對β-HCG的測量結果差異無統計學意義，相關性良好。該文參照澳大利亞室間質評的評價標準［5］的允許總誤差（TEa）：hCG≤20 mU/mL,允許總誤差為±4 mU/mL；hCG＞20 mU/mL,允許總誤差為20%設置了SE%＜1/2 TEa為可接受標準。在評價低、中、高濃度水平的β-HCG的預期偏差均在可接受范圍內，待評方法的偏倚是可接受的。但是在β-HCG高于試劑盒的直接檢測上限1 000 IU/L，兩套系統的檢測結果出現較大偏差。在該研究的40組比對數據中有6組比對數據值＞1 000 IU/L，偏差從5.88%～23.6%不等，其中有3組比對數據出現較大偏差（＞10%），分別為15.58% （DXI：49 874 IU/L，E411：42 102 IU/L），19.9%（DXI：5 688 IU/L，E411：4 552 IU/L），23.6%（DXI：10 428 IU/L，E411：7 966 IU/L）。分析其原因，可能由于2套系統在檢測大于1 000 IU/L的β-HCG時都采用稀釋模式，檢測系統存在不同程度的差異，另外由于儀器部件損耗造成的儀器狀態問題，反應系統的差異也會給檢測帶來誤差，導致結果出現一定的偏差。這可能是由于兩套系統在檢測大于1 000 IU/L的β-HCG時超出試劑盒上限范圍，都采用稀釋模式，導致結果出現一定的偏差。以上研究表明2種檢測系統的系統偏差在可接受范圍內，與參比系統具有可比性，可以同時發布檢測結果，避免了結果差異給臨床診斷帶來的困擾。

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The Comparative Analysis for the Detection of Human Serum Total βchorionic Gonadotropin between Beckman Coulter Access DXI800 and Cobas e411

QIN Xue-jun，AN Min-zhi，LI Yang-yu，MAO Qi-guan，LIN Qing
Department of Clinical Laboratory,FuJian University of Traditional Chinese Medicine Laboratory,Fuzhou,Fujian Province, 350009 China

R446.6

A

1674-0742（2016）08（b）－0033-04

10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.23.033

秦雪君（1984.1-），女，湖南永州人，碩士，檢驗技師，研究方向：臨床生化。

林青（1969.4-），女，福建南平人，主任技師，研究方向：臨床生化，E-mail：371038389@qq.com。

2016-05-16）