p53 p63及p73在鼻咽癌患者組織中的表達及臨床意義

陳天會， 蔣正舉， 王世飛， 賀元杰

（遵義醫學院附屬醫院耳鼻喉科， 貴州 遵義 563003）

p53 p63及p73在鼻咽癌患者組織中的表達及臨床意義

陳天會， 蔣正舉， 王世飛， 賀元杰

（遵義醫學院附屬醫院耳鼻喉科， 貴州 遵義 563003）

目的：研究P53、P63和P73在鼻咽癌患者組織中的表達情況及臨床意義。方法：選擇2012年8月至2014年8月在我院確診的鼻咽癌患者89例為觀察組。并選擇同期在我院接受治療的鼻咽黏膜慢性炎癥患者50例為對照組。對比兩組組織中P53、P63和P73表達情況，并分析其不同臨床病例特征的意義。結果：觀察組P53、P63和P73陽性率為67.4%（60/89）、87.6%（78/89）以及53.0% （48/89），均高于對照組的28.0%（14/50）、36.0%（18/50）、20.0%（10/50），差異均具有統計學意義（P＜0.05）。不同性別、年齡中p53、p63和p73表達陽性率差異均無統計學意義。在具有頸淋巴轉移的鼻咽癌患者中p53、p63表達陽性率更高、在TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的鼻咽癌患者中p63、p73表達陽性率更高以及病理類型為非角化癌鼻咽癌患者中p63表達陽性率更高。差異均有統計學意義（P＜0.05）。結論：鼻咽癌患者組織中P53、P63和P73基因高表達，并且對臨床分期、淋巴轉移以及病理分型有顯著的相關性。通過對P53、P63和P73在兩種基因的監測，對鼻咽癌臨床治療和預后都有較好的指導作用。

鼻咽癌； P53基因； P63基因； P73基因； 臨床分期

鼻咽癌是頭頸部常見的惡性腫瘤之一，我國發病率明顯高于其他地區［1］。病理類型多為低分化鱗狀細胞癌，隨著醫療技術不斷的進步，鼻咽癌的治療已經取得較大進展，但依舊存在預后不良的結果。因鼻咽癌在早期難以發現，并且易出現頸淋巴結轉移、治療后復發等情況，造成臨床上對鼻咽癌的治療效果不佳［2］。本文研究并分析鼻咽癌患者p53、p63和p73相關水平，得到一些結論，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：選擇2012年8月至2014年8月在我院確診的鼻咽癌患者89例為觀察組。其中男性患者54例，女性患者35例。年齡35～73歲，平均年齡48.3 ±4.29歲。同時選擇同期在我院接受治療的鼻炎黏膜慢性炎癥患者50例為對照組。其中男性患者30例，女性患者20例。年齡30～70歲，平均年齡47.1±4.21歲。兩組患者在年齡、性別等基本資料差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法：在纖維鼻咽鏡下鉗取觀察組鼻咽癌組織和對照組鼻咽粘膜慢性炎癥組織，并對是否出現頸淋巴轉移、TNM分期以及病理分型進行統計。將得到的標本應用10%甲醛固定后石蠟包埋，然后制成4μm的連續切片備用。其中鼠抗人的p53、p63和p73單克隆抗體均購自上海長嘉生物科技公司，按照說明書對組織進行免疫組織化學法檢測。最后在顯微鏡下觀察染色結果，并通過對染色陽性腫瘤細胞比例與強度評分。

1.3 結果判定［3］：首先進行染色強度的計分：沒有染色的記為0分、輕度染色記為1分、中度染色記為2分以及強度染色記為3分。然后對染色細胞面積進行定量計分：沒有細胞染色記為0分、＜25%的細胞被染色記為1分、25%～50%的細胞被染色記為2分以及＞50%的細胞被染色記為3分。最后將兩種計分相加記為染色總結果，當總分＞2分記為陽性，反之為陰性。見圖1～3。

圖1 p53在鼻咽癌組織中表達為陽性

圖2 p63在鼻咽癌組織中表達為陽性

圖3 p73在鼻咽癌組織中表達為陽性

1.4 統計學方法：采用SPSS13.0統計軟件分析。計數資料以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組p53、p63和p73表達情況對比：觀察組p53、p63和p73陽性率為67.42%、87.64%及53.03%，均高于對照組的28.00%、36.00%、20.00%，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 p53、p63和p73表達與鼻咽癌的病例特征分析：不同性別、年齡、TNM分期以及病理類型中p53表達陽性率差異無統計學意義。在具有淋巴轉移的鼻咽癌患者中p53表達陽性率高于未出現淋巴轉移患者，差異均有統計學意義（χ2=9.565，P＜0.05）。在具有淋巴轉移、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期以及病理類型為非角化癌鼻咽癌患者中p63表達陽性率更高，差異均有統計學意義（χ2=4.903、11.465、110.095，P＜0.05）。在TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的鼻咽癌患者中p73表達陽性率更高，差異均有統計學意義（χ2=10.347，P＜0.05）。見表2。

表1 兩組標志物表達情況對比n（%）

表2 標志物表達與鼻咽癌的病例特征分析n（%）

3 討 論

鼻咽癌是頭頸部常見的惡性腫瘤之一，目前認為鼻咽癌的發生與遺傳、EB病毒感染及環境因素有關，多發生于鼻咽部的咽隱窩及頂后壁，發病部位比較隱蔽，不易早期發現，臨床確診依靠病理診斷。輔助檢查包括CT以及MRI等進行病變范圍的診斷［4］。

隨著醫療技術的不斷發展，臨床上開始對相關基因的表達水平進行深入研究，得到不錯的結果。其中p53基因最早在七十年代被發現，同時被定位為腫瘤抑制基因，對脆弱的細胞發生癌變具有抑制作用［5］。但隨著研究深入發現p53有突變型，并具有致癌作用。臨床上已經有過半的腫瘤患者體內檢測到變異的p53基因，從而引起研究人員的重視。p63和p73都是在1997年被發現的p53成員，這兩種基因和p53具有極高的同源性。兩者可以在相異的啟動子作用下形成不同的異構體，但存在極少數的突變體。當p63和p73被誘導后同樣對細胞具有凋亡作用，同時對p53相應的應答基因的轉錄具有激活效果。在這樣的前提下p63和p73兩個基因都具有抑癌功能，但當他們出現過度表達時又會突變，從而表現為致癌作用。通過對p53、p63和p73臨床特征分析以及相互之間的關系，能幫助我們進一步了解鼻咽癌的發生進程，并為臨床治療提供依據。

本文通過對比鼻咽癌與非鼻咽癌患者相關水平發現：觀察組P53、P63和P73陽性表達率均高于對照組，并且在不同性別、年齡中p53、p63和p73表達陽性率差異均無統計學意義。在具有淋巴轉移的鼻咽癌患者中p53、p63表達陽性率更高；在TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的鼻咽癌患者中p63、p73表達陽性率更高以及病理類型為非角化癌鼻咽癌患者中p63表達陽性率更高。p53基因作為常見的抑癌基因已經被人們所熟知，尤其是p53對細胞具有增殖、凋亡的雙重促進作用。當細胞正常生長時對其有維持作用，一旦細胞受到創傷，p53基因就會對DNA產生明顯的誘導作用。使細胞停止生長，從而嚴重抑制細胞的正常增殖。最嚴重的將會對DNA修復產生阻止作用，直到細胞無法修復而凋亡。一般在野生型p53基因中其細胞含量偏低，以致免疫組化無法檢測出來。而突變型p53基因多集中在細胞核中，采用免疫組化法能高效檢出。尤其是出現淋巴轉移的患者，其p53基因檢出率最高。作為p53家族的p63基因和p73基因，其可能具有對相應突變體腫瘤啟動的特性，進而保證癌癥細胞在有利條件下快速增殖。

［1］ 牛道立，李建鋒，何芬，等.siRNA干擾Pokemon基因對鼻咽癌CNE-2細胞生長作用的研究［J］.中華腫瘤防治雜志，2012，19（14）：1041～1045.

［2］ 黃繼紅，昂杰，牟忠林，等.Treg細胞和Th17細胞在鼻咽癌中相關性的研究［J］.海南醫學院學報，2013，19（9）：1194～1196.

［3］ 鄭大勇，董少婷，陳錦章，等.PTEN與p53在鼻咽癌中的表達及意義［J］.河北醫學，2014，20（9）：1415～1418.

［4］ 樓建林，王升曄，郭良，等.鼻咽癌放療后頸部淋巴結復發或殘留的手術治療［J］.中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2014，49（4）：300～304.

［5］ 李彩蘋，房太勇.尾側型同源轉錄因子-2，P53和Ki67在胃癌組織中的表達及意義［J］.中華消化雜志，2015，35 （5）：340～343.

Expression and Clinical Significance of p53 p63 and p73 in Patients w ith Nasopharyngeal Carcinoma

CHEN Tianhui， JIANG Zhengju， WANG Shifei， et al

（The Affiliated Hospital of ZunyiMedical College，Guizhou Zunyi 563003，China）

【Abstract】Objective：To explore the expression and clinical significance of p53，p63 and p73 in patients with nasopharyngeal carcinoma.M ethods：89 cases of nasopharyngeal carcinoma patients diagnosed from August2013 to August2014 in our hospitalwere chosen as the observation group.The other 50 caseswith chronic inflammatory disease were as the control group.The expression of p73，p63 and p53 in the two groups were compared，and the significance of its characteristics in different clinical cases were analyzed.Results：The positive rates of p73，p63 and p53 in the observation group were 67.42%（60/89），87.64%（78/89）and 53.03%（48/89），which were significantly higher than those in the control group（28%），36% （18/ 50），20%（10/50）.Positive rates of p73，p63 and p53 in different sex and agewere not significantly different.In patients with nasopharyngeal carcinoma with lymphatic metastasis，the expression of p63，p53 was higher，and the positive rate of the expression of p63 and p73 in TNM stage was higher and the pathological type was higher than that of the expression of p63 in patients with nasopharyngeal carcinoma.The differences were statistically significant（P＜0.05）.Conclusion：The expression of p63，p73 and p53 gene in nasopharyngeal carcinoma patients is highly expressed，and it has significant correlation with clinical stage，lymph nodemetastasis and pathological typing.The monitoring of p53，p63 and p73 genes have good guidance for clinical treatment and prognosis of nasopharyngeal carcinoma.

Nasopharyngeal carcinoma； p53 gene； p63 gene； p73 gene； Clinical stage

1006-6233（2016）08-1267-04

A 【doi】10.3969/j.issn.1006-6233.2016.08.017

貴州省科技基金資助項目（編號：［2010］3138號）