瑞香狼毒毒性部位的化學成分研究

黃彌娜　曹青青　李云青　費揚　李洋　李盛建　呂磊　趙亮

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·論著·

瑞香狼毒毒性部位的化學成分研究

黃彌娜曹青青李云青費揚李洋李盛建呂磊趙亮

目的研究瑞香狼毒的毒性部位及毒性部位的化學成分。方法通過小鼠急性毒性實驗篩選出瑞香狼毒的毒性部位，采用多種色譜技術分離毒性部位提取物，并根據(jù)化合物的理化性質和光譜數(shù)據(jù)分析鑒別單體化合物的結構。結果確定乙酸乙酯極性部位為狼毒毒性部位，在乙酸乙酯部位中分離得到12個化合物，分別鑒定為：Epiafzelechin (1)、Scopoletin (2)、Isolariciresinol (3)、Lirioresinol B (4)、Stelleranol (5)、Daphnoretin (6)、Chamaechromone (7)、Neochamaejasmin A (8)、Chamaejasmine (9)、Isochamaejasmin (10)、7-methoxyneochamaejasmin A (11)及Matairesinol (12)。結論本文首次報道了瑞香狼毒的毒性部位研究，并分離鑒定毒性部位的化學成分。

瑞香狼毒；毒性部位；化學成分

瑞香狼毒StellerachamaejasmeL.始載于《神農本草經(jīng)》，一般取其根部入藥，味辛、性平、有毒，入肺、肝，有逐水祛痰、散結殺蟲的功效[1-2]，中醫(yī)用其治療一切有形的腫塊，包括惡性腫瘤、良性腫瘤、淋巴結腫大、皮疹、皮下結節(jié)等癥。多篇綜述及文獻曾有報道[3-7]，瑞香狼毒對于肺癌、神經(jīng)性皮炎、小鼠惡性腹水均有一定的治療作用，但考慮到其本身也存在一定的毒性，因此筆者決定對瑞香狼毒的毒性成分進行深入系統(tǒng)地研究。本實驗將篩選瑞香狼毒的毒性部位，并深入研究乙酸乙酯部位的化學成分，采用柱層析技術及高壓液相制備色譜技術對瑞香狼毒乙酸乙酯部位的單體化合物進行分離純化，并且通過使用高效液相——飛行時間質譜聯(lián)用技術獲得單體化合物的詳細質譜信息，同時結合高分辨核磁共振波譜結果，對提取分離到的單體化合物進行結構鑒定。

1　儀器與試劑

Bruker AVANCE Ⅲ 600高分辨核磁共振波譜儀系統(tǒng)(布魯克科技有限公司，德國)；Agilent 1260高效液相色譜儀(安捷倫科技有限公司，美國)；Agilent 6220飛行時間質譜儀(安捷倫科技有限公司，美國)；Shimadzu LC-20AP制備液相色譜儀(島津公司，日本)；Heal Force SMART-N超純水機(力康生物醫(yī)療科技控股有限公司，香港)；RE-52型旋轉蒸發(fā)儀(上海申生科技有限公司，上海)；玻璃層析柱(南通三晶玻璃儀器有限公司，江蘇)；Kromasil 100-5 C18制備柱(50×250 mm)；所用試劑(強盛功能化學股份有限公司，江蘇)均為分析純試劑，水為實驗室自身制備的超純水。柱層析用硅膠、硅膠GF254薄層板(煙臺江友化工有限公司，山東)；羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH-20(國藥集團化學試劑有限公司，上海)反相C18硅膠(大曹株式會社，日本)。

瑞香狼毒購于安徽亳州藥材市場，原產(chǎn)地內蒙古，批號：20140214，經(jīng)第二軍醫(yī)大學藥學院生藥教研室的孫蓮娜教授鑒定為瑞香科植物瑞香狼毒StellerachamaejasmeL.的干燥根。ICR小鼠，體質量19～24 g，均由第二軍醫(yī)大學藥學院動物房提供。

2　方法與結果

2.1急性毒性實驗

2.1.1各極性部位溶液制備取瑞香狼毒藥材若干，用高速萬能粉碎機進行粉碎。從中稱取3 kg藥材粉末，加入4 L的80%乙醇溶液，浸泡1小時后開始加熱進行回流提取，提取時間2小時，趁熱用布氏漏斗抽濾得到濾液。于濾渣中再次加入2 L的80%乙醇溶液，重復上述操作，將兩次所得的濾液合并，使用旋轉蒸發(fā)器減壓回收乙醇溶液，然后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇溶液分別多次萃取濃縮得到其石油醚浸膏、乙酸乙酯浸膏、正丁醇浸膏及總提物浸膏。稱取瑞香狼毒的石油醚浸膏、乙酸乙酯浸膏、正丁醇浸膏、總提物浸膏若干，分別加入15%乙醇溶液使其溶解，將溶液置于超聲波儀中超聲30分鐘，以期增加其溶解度，得到濃度為0.25 g/mL的四種藥物混懸溶液，同時設置空白對照組(15%乙醇溶液)。

2.1.2灌胃實驗將實驗所用的ICR小鼠隨機分為5組，平均每組12只，雌雄各半。實驗前禁食12小時，不禁水，將小鼠稱重后計算所需灌胃劑量(規(guī)格：0.4 mL/10 g體質量)，各組分別灌胃10 g/kg的石油醚部位混懸液、乙酸乙酯部位混懸液、正丁醇部位混懸液、總提物混懸液及15%乙醇溶液(空白對照組)，記錄動物死亡情況如圖1。

圖1　瑞香狼毒各極性部位急性毒性試驗小鼠的死亡情況

根據(jù)上圖可發(fā)現(xiàn)，在灌胃相同劑量(10 g/kg)的不同極性部位提取物混懸藥液的情況下，乙酸乙酯組的小鼠存活率最低。灌胃完成1小時后，總提物組、石油醚組、乙酸乙酯組及正丁醇組的小鼠均出現(xiàn)不同程度的腹瀉現(xiàn)象，之后陷入萎靡狀態(tài)，空白對照組的小鼠并未發(fā)生任何異常。灌胃3小時后，乙酸乙酯組的個別小鼠開始死亡，石油醚組與正丁醇組也相繼有小鼠死亡。統(tǒng)計灌胃當天，石油醚組的小鼠死亡數(shù)量為2只，正丁醇組的小鼠死亡數(shù)量為1只，乙酸乙酯組的小鼠死亡數(shù)量為8只。連續(xù)觀察7天，發(fā)現(xiàn)存活下來的小鼠生命體征恢復正常，且體質量每天逐漸增加的趨勢。該實驗證明了在相同劑量下的不同極性部位灌胃溶液中，乙酸乙酯毒性最強，初步確定瑞香狼毒的毒性部位在于乙酸乙酯部位。

2.2化學成分提取與分離

取瑞香狼毒藥材30 kg粉碎后，加入200 L的80%乙醇溶液于65℃下熱提2小時，提取液趁熱過濾，于濾渣中再次加入150 L的80%乙醇溶液熱提2小時，趁熱過濾，合并兩次濾液濃縮至無醇殘留，濃縮至體積為6 L。取濃縮液2 L，依次用石油醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇各萃取三次，每次的萃取溶劑體積為2 L。分別合并各萃取層溶劑，濃縮，干燥后得到石油醚浸膏110 g，乙酸乙酯浸膏242 g和正丁醇浸膏47 g。

取乙酸乙酯浸膏203 g進行正相柱層析(石油醚∶乙酸乙酯分離，1∶1洗脫)，得53 g Fr1；乙酸乙酯洗脫，得32 g Fr2。Fr1經(jīng)硅膠柱層析(二氯甲烷∶甲醇，50∶1～10∶1洗脫)，得8.3 g Fr1-1，6.4 g Fr1-2，3.1 g Fr1-3和3.5 g Fr1-4。Fr1-1經(jīng)過硅膠層析柱(二氯甲烷∶甲醇，50∶1洗脫)，得2號化合物10 mg，將其他流分合并后上凝膠柱層析(氯仿∶甲醇，1∶1洗脫)得11號化合物9.8 mg和12號化合物10.2 mg；Fr1-2經(jīng)過硅膠層析柱(二氯甲烷∶甲醇，10∶1等度洗脫)，得1號化合物49 mg和7號化合物111 mg；Fr1-3經(jīng)Prep. HPLC高壓制備(流動相梯度及溶液為0～30分鐘，65%～70%甲醇水溶液，流速為80 mL/min，紫外波長為210 nm)，得到8號化合物52 mg，9號化合物44 mg和10號化合物25 mg。Fr2經(jīng)硅膠柱層析(石油醚∶丙酮，2∶1洗脫)，得3號化合物35 mg，4號化合物39 mg和6號化合物40 mg；將其他流分合并后上凝膠柱層析(氯仿∶甲醇，1∶1洗脫)，得5號化合物32 mg，具體流程見圖2。

2.3結構鑒定

利用Agilent HPLC-ESI-TOF/MS對分離提取到的12種化合物進行質譜分析，同時利用Bruker AVANCE Ⅲ 600高分辨核磁共振波譜儀對其進行核磁共振分析，采集它們的1H-NMR譜與13C-NMR譜。結合理化性質及過往文獻中對于它們核磁數(shù)據(jù)的報道，對化合物進行結構鑒別，具體結構見圖3。

化合物1：白色粉末，C15H14O5，ESI-MS的質核比(m/z)為275.1033 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 7.19 (2H，d，J=8.8 Hz，H-2′,6′)，6.79 (2H，d，J=8.8 Hz，H-3′,5′)，5.91 (1H，d，J=1.6 Hz，H-8)，5.82 (1H，d，J=1.6 Hz，H-6)，4.59 (1H，d，J=8.0 Hz，H-2)，3.96 (1H，dd，J=5.6，13.6 Hz，H-3)，2.88 (1H，d，J=5.6 Hz，H-3)，2.49 (1H，dd，J=5.2，1.6Hz，H-4)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 157.81 (C-8)，157.20 (C-5)，156.98 (C-4′)，156.39 (C-6)，130.79 (C-1′)，128.98 (C-2′,6)，115.39 (C-3′,5)，100.19 (C-4)，95.61 (C-6)，94.79 (C-8)，82.22 (C-2)，68.18 (C-3)，28.29 (C-4)。核磁數(shù)據(jù)與文獻[8]基本一致，判斷該化合物是Epiafzelechin。

化合物2：白色粉末，C10H8O4，ESI-MS的質核比(m/z)為193.0521 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 10.28 (1H，s,7-OH)，7.90 (1H，d，J=9.3 Hz，H-4)，7.20 (1H，s，H-5)，6.76 (1H，s，H-8)，6.20 (1H，d，J=9.4 Hz，H-3)，3.79 (3H，s，6-OCH3)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 162.53 (C-2)，153.01 (C-7)，151.38 (C-9)，147.12 (C-6)，146.36 (C-4)，113.57 (C-3)，112.49 (C-10)，111.49 (C-5)，104.64 (C-8)，57.89 (OCH3)。 核磁數(shù)據(jù)與文獻[9]基本一致，判斷該化合物是Scopoletin。

化合物3：白色粉末，C20H24O6，ESI-MS的質核比(m/z)為361.0019 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，CDCl3，δ，ppm)： 6.88 (1H，d，J=8.1 Hz，H-5′)，6.87 (1H，d，J=8.1 Hz，H-5)，6.84 (1H，dd，J=8.1，1.76 Hz，H-6′)，6.81 (1H，dd，J=8.1，1.76 Hz，H-6)，6.70 (1H，d，J=1.84 Hz，H-2′)，6.69 (1H，d，J=1.85 Hz，H-2)，4.79 (1H，d，J=6.6 Hz，H-7)，4.08 (1H，dd，J=8.5，6.6 Hz，H-9α)，3.75 (1H，m，H-9β)，3.90 (1H，m，H-9′α)，3.77 (1H，m，H-9′β)，2.93 (1H，dd，J=5.2，13.6 Hz，H-7α)，2.57 (1H，dd，J=5.2，13.6 Hz，H-7β)，2.73 (1H，m，H-8)，2.43 (1H，m，H-8′)。13C-NMR (150 MHz，CDCl3，δ，ppm)： 148.08(C-3)，147.97(C-3′)，146.47(C-4′)，145.43 (C-4)，136.21 (C-1′)，133.71 (C-1)，122.63 (C-6)，120.18 (C-6′)，115.86 (C-5)，115.62 (C-5′)，112.65 (C-2)，109.76 (C-2′)，84.26 (C-7′),74.32 (C-9)，62.34 (C-9′)，62.34 (C-9′)，57.36 (OCH3)，43.84 (C-8′)，34.74 (C-7)。核磁數(shù)據(jù)與文獻[10]基本一致，判斷該化合物是Isolariciresinol。

化合物4：白色粉末，C22H26O8，ESI-MS 的質核比(m/z)為419.1680 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，CDCl3，δ，ppm)： 6.58 (4H，s，H-2，6，H-2′，6′)，5.49 (2H，s,-OH)，4.73 (2H，d，J=4.4 Hz，H-7，7′)，4.28 (2H，m，H-9，9′)，3.91 (2H，m，H-9，9′)，3.90 (12H，s，-OCH3×4)，3.12 (2H，m，H-8，8′)。13C-NMR (150 MHz，CDCl3，δ，ppm)： 148.58 (C-3，3′，5，5′)，135.71 (C-1,1′)，133.52 (C-4，4′)，104.11 (C-2，2′，6，6′)，87.50 (C-7,7′)，73.23 (C-9，9′)，57.80 (OCH3×2)，55.78 (C-8，8′)。 核磁數(shù)據(jù)與文獻[11]基本一致，判斷該化合物是Lirioresinol B。

圖2　瑞香狼毒乙酸乙酯部位的單體分離過程

圖3　12種單體化合物的結構圖

化合物5：棕色粉末，C30H22O11，ESI-MS的質核比(m/z)為559.1358 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 7.08 (2H，d，J=8.7 Hz，H-2?，6?)，6.72 (2H，d，J=8.7 Hz，H-3?，5? )，6.56 (2H，d，J=8.6 Hz，H-2′，6′)，6.49 (2H，d，J=8.6 Hz，H-3′，5′)，6.06 (1H，d，J=2.1 Hz，H-8″)，6.03 (1H，d，J=2.1 Hz，H-8″)，6.52 (1H，s，H-2″)，5.95 (1H，s，H-6)，5.68 (1H，s，H-2)，4.84 (1H，br s，H-3)，2.45 (1H，d，J=16.6 Hz，H-4)，2.36 (1H，dd，J=17.1，4.0 Hz，H-4)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 192.79 (C-4″)，188.87 (C-5)，170.26 (C-7)，169.40 (C-7″)，165.33 (C-8″)，162.33 (C-5″)，160.05 (C-8α，4″)，158.25 (C-4′)，131.74 (C-2″，6″)，130.18 (C-1′)，129.07 (C-2′，6′),124.14 (C-1?)，116.52 (C-3′，5′)，116.11 (C-3?，5?)，110.38 (C-4α)，102.62 (C-6)，101.86 (C-4″α)，98.68 (C-6″)，98.22 (C-8″)，91.83 (C-2″)，87.15 (C-8)，81.87 (C-2)，81.05 (C-3″)，65.16 (C-3)，28.80 (C-4)。 核磁數(shù)據(jù)與文獻[12]基本一致，判斷該化合物是Stelleranol。

化合物6：無色透明晶體，C19H12O7，ESI-MS的質核比(m/z)353.0639 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 8.03 (1H，d，J=9.6 Hz，H-4′)，7.85 (1H，s，H-4)，7.70 (1H，d，J=8.6 Hz，H-5′)，7.20 (1H，s，H-5)，7.17 (1H，d，J=2.4 Hz，H-8′)，7.10 (1H，dd，J=8.6，2.4 Hz，H-6′)，6.84 (1H，s，H-8)，6.37 (1H，d，J=9.5 Hz，H-3′)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 161.84 (C-2)，161.54 (C-2′)，158.83 (C-7′)，156.87 (C-9′)，152.21 (C-7)，149.29 (C-9)，147.53 (C-3′)，145.93 (C-6′)，137.61 (C-3)，132.73 (C-4)，131.77 (C-5′)，116.27 (C-10)，115.76 (C-10′)，115.32 (C-4′)，112.06 (C-5)，111.28 (C-6)，105.89 (C-8)，104.63 (C-8′)，57.90 (-OCH3)。 核磁數(shù)據(jù)與文獻[13]基本一致，判斷該化合物是Daphnoretin。

化合物7：黃色粉末，C30H22O10，ESI-MS的質核比(m/z)為543.1637 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 8.15 (1H，s，H-2)，7.12 (1H，d，J=8.6 Hz，H-27，31)，6.98 (1H，d，J=8.6 Hz，H-21，25)，6.55 (1H，d，J=8.6 Hz，H-28，30)，6.45 (1H，d，J=8.6 Hz，H-22，24)，6.42 (1H，d，J=11.9 Hz，H-12)，6.22 (1H，d，J=2.1 Hz，H-8)，6.08 (1H，d，J=2.1 Hz，H-8)，5.68 (1H，s，H-18，16)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 204.73 (C-13)，181.28 (C-4)，166.71 (C-7)，165.95 (C-17),165.85 (C-15)，165.85 (C-19)，163.32 (C-5)，158.82 (C-9)，157.89 (C-2),157.16 (C-23)，157.16 (C-29)，136.17 (C-26)，135.15 (C-20)，131.26 (C-21)，131.26 (C-25)，130.34 (C-27)，130.34 (C-31)，122.26 (C-3)，116.71 (C-28)，116.71 (C-30)，116.45 (C-22)，116.45 (C-24)，106.21 (C-14)，105.49 (C-10)，100.73 (C-6)，96.52 (C-16)，96.52 (C-18)，95.39 (C-8)，54.43 (C-11)，48.72 (C-12)。 核磁數(shù)據(jù)與文獻[13]基本一致，判斷該化合物是Chamaechromone。

化合物8：淡黃色粉末，C30H22O10，ESI-MS的質核比(m/z)為543.1266 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 6.99 (4H，d，J=8.6 Hz，H-2′，H-6′，H-2?，H-6?)，6.77 (4H，d，J=8.6 Hz，H-3′，H-5′，H-3?，H-5?)，5.72 (2H，d，J=2.1 Hz，H-6，H-6″)，5.86 (2H，d，J=2.1 Hz，H-8，H-8″)，4.72 (2H，s，H-2，H-2″)，3.66 (2H，s，H-3，H-3″)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 196.5 (C-4，4″)，169.5 (C-7，7″)，165.3 (C-5，5″)，164.3 (C-9，9″),160.2 (C-4′，4?)，131.4 (C-2′，6′，2?，6?)，128.5 (C-1′，1?)，117.4 (C-3′，5′，3?，5?)，102.7 (C-10，10″)，98.2 (C-6，6″)，97.0 (C-8，8″)，82.4 (C-2，2″)，49.0 (C-3，3″)。 核磁數(shù)據(jù)與文獻[14]基本一致，判斷該化合物是Neochamaejasmin A。

化合物9：淡黃色粉末，C30H22O10，ESI-MS的質核比(m/z)為543.0741 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 2.85 (2H，br s，H-3，3″)，5.44(2H，br s，H-2，H-2″)，5.74(2H，br s，H-6，H-6″)，5.85(2H，br s，H-8，H-8″)，6.72 (4H，d，J=8.5 Hz，H-2′，H-6′，H-2?，H-6?)，6.98(4H，d，J=8.5 Hz，H-3′，H-5′，H-3?，H-5?)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 196.71(C-4，4″)，167.52(C-7，7″)，164.10 (C-5，5″)，163.43 (C-9，9″)，157.79(C-4′，4?)，130.17 (C-2′，2?)，128.11 (C-6，6?)，127.17 (C-1′，1?)，116.29 (C-3′，3?)，115.96 (C-5′，5?)，102.77 (C-10，10″)，96.34 (C-6，6″)，95.43 (C-8，8″)，80.59 (C-2，2″)，46.88 (C-3，3″)。核磁數(shù)據(jù)與文獻[15]基本一致，判斷該化合物是Chamaejasmine。

化合物10：棕色粉末，C30H22O10，ESI-MS的質核比(m/z)為543.1861 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 6.98 (4H，d，J=8.6 Hz，H-2′，H-6′，H-2?，H-6?)，6.77 (4H，d，J=8.6 Hz，H-3′，H-5′ ，H-3?，H-5?)，5.86 (2H，d，J=2.1 Hz，H-8，H-8″)，5.72 (2H，d，J=2.1 Hz，H-6，H-6″)，4.74 (2H，s，H-2，H-2″)，3.58 (2H，s，H-3，H-3″)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 196.6 (C-4，4″)，169.2 (C-7，7″)，165.4 (C-5，5″)，164.3 (C-9，9″),160.2 (C-4′，4?)，131.4 (C-2′，6′，2?，6?)，128.5 (C-1′，1?)，117.4 (C-3′，5′，3?，5?)，102.8 (C-10，10″)，98.2 (C-6，6″)，97.0 (C-8，8″)，82.4 (C-2，2″)，49.0 (C-3，3″)。 核磁數(shù)據(jù)與文獻[16]基本一致，判斷該化合物是Isochamaejasmin。

化合物11：淡黃色粉末，C31H24O10，ESI-MS的質核比(m/z)為557.1829 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 11.77 (2H，s，5-OH，5″-OH)，6.99，6.98 (each 2H，d，J=8.5 Hz,H- 2′，6′，2?，6?)，6.88 (2H，d，J=8.2 Hz，H-3′,5′)，6.73(2H，d，J=8.6 Hz，H-3?,5?)，6.08 (1H，d，J=2.2 Hz，H-6)，6.03(1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，5.86 (1H，d，J=2.3 Hz，H-6″)，5.77 (1H，d，J=2.0 Hz，H-8″)，5.77 (1H，br s，H-2)，5.72 (1H，br s，H-2″)，3.79 (2H，br s，H-3,3′)，3.75 (3H，s，OCH3)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 198.60 (C-4)，197.77(C-4″)，169.58(C-7)，167.45(C-7″)，165.32(C-5)，165.02(C-5″)，164.30 (C-9)，164.23 (C-9″)，161.82 (C-4)，160.17(C-4″)，128.30 (C-1′)，128.14 (C-1?)，117.42 (C-3′，5′)，117.30 (C-3?，5?)，104.42 (C-10)，103.42 (C-10″)，98.18 (C-6，8)，97.09 (C-6″，8″)，84.88 (C-2，2″)，57.18 (OCH3)，50.98 (C-3，3″)。 核磁數(shù)據(jù)與文獻[17]基本一致，判斷該化合物是7-methoxyneochamaejasmin A。

化合物12：淡黃色粉末，C20H22O6，ESI-MS的質核比(m/z)為359.1443 [M+H]+。1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 6.73 (1H，d，J=1.74 Hz,H-2)，6.67 (1H，d，J=8.0 Hz，H-2′)，6.64 (1H，d，J=7.9 Hz，H-5′)，6.59 (1H，d，J=1.74 Hz，H-5)，6.57 (1H，dd，J=8.0，1.79 Hz，H-6′)，6.46 (1H，dd，J=7.9，1.76 Hz，H-6)，4.08 (1H，m，H-9′α)，3.83 (1H，m，H-9′β)，3.69 (3H，s，OCH3)，3.68 (3H，s，OCH3)，2.80 (1H，dd，J=13.8，5.4 Hz，H-7′α)，2.73 (1H，dd，J=11.1，6.9 Hz，H-8′)，2.67 (1H，dd，J=13.8，6.4 Hz，H-7′β)，2.44 (3H，m，H-7α，7β，8)。13C-NMR (150 MHz，DMSO-d6，δ，ppm)： 180.38 (C-9)，149.37 (C-3′)，149.29 (C-3)，146.98 (C-4′)，146.82 (C-4)，131.48 (C-1′),130.79 (C-1)，123.47 (C-6)，122.58 (C-6′)，117.26 (C-5′)，117.19 (C-5)，115.37 (C-2)，114.59 (C-2′)，72.58 (C-9′)，57.44 (OCH3)，57.38 (OCH3)，47.53 (C-8)，42.78 (C-8′)，38.77 (C-7′)，35.77 (C-7)。 核磁數(shù)據(jù)與文獻[18]基本一致，判斷該化合物是Matairesinol。

3　討論

本研究采用小鼠急性毒性實驗對瑞香狼毒的各個極性部位進行毒性篩選，確定了乙酸乙酯極性部位為其毒性部位。通過柱層析法對乙酸乙酯極性部位的化學成分做了系統(tǒng)分離，鑒定了12個化合物，其中分離得到的化合物多為黃酮類化合物，該研究為進一步探索瑞香狼毒的毒性作用機理提供物質基礎，在后續(xù)的研究中將對各單體化合物的毒性作用進行深入探索。

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(本文編輯： 董歷華)

Study on chemical constituents of toxicity parts inStellerachamaejasmeL.

HUANGMi-na，CAOQing-qing，LIYun-qing，etal.

DepartmentofPharmacy，EasternHepatobiliarySurgeryHospital，SecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200438，China

Correspondingauthor：ZHAOLiang，E-mail：zhaoliangphar@163.com

ObjectiveTo isolate and identify the compounds of the toxic part from theStellerachamaejasmeL. MethodsToxic part of theStellerachamaejasmeL. was screened by acute toxicity，the compounds were separated and purified by chromatographic technique and their structures were established by spectroscopic methods. ResultsThe toxicity part of theStellerachamaejasmeL. was the polar parts of ethyl acetate，and twelve compounds were obtained from ethyl acetate extracts of theStellerachamaejasmeL.，which were identified as Epiafzelechin (1), Scopoletin (2), Isolariciresinol (3), Lirioresinol B (4), Stelleranol (5), Daphnoretin (6), Chamaechromone (7), Neochamaejasmin A (8), Chamaejasmine (9), Isochamaejasmin (10), 7-methoxyneochamaejasmin A (11) and Matairesinol (12). ConclusionThis is the first report of the toxicity of polar fractions ofStellerachamaejasmeL.，separate and identify the chemical composition of the toxicity of polar parts.

StellerachamaejasmeL.；Toxic part；Chemical constituents

國家自然科學基金-青年項目(81303300)

200438上海，中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學東方肝膽外科醫(yī)院藥材科

黃彌娜(1981- )，女，本科，藥師。研究方向：中藥質量控制。E-mail：huangmina1981@163.com

趙亮(1980- )，博士，副主任藥師。研究方向：中藥藥效物質基礎及新藥開發(fā)。E-mail：zhaoliangphar@163.com

R284

A

10.3969/j.issn.1674-1749.2016.09.007

2016-04-14)