曾饒瓊,付婷婷,魏薇,魏光河(.四川省宜賓職業技術學院四川宜賓644003;.西南大學榮昌校區動物醫學系重慶40460)
一例豬傳染性胃腸炎的診治和分析
曾饒瓊1,付婷婷2,魏薇2,魏光河2
(1.四川省宜賓職業技術學院四川宜賓644003;2.西南大學榮昌校區動物醫學系重慶402460)
為獲得針對規模豬場暴發頑固性腹瀉的有效防控方法,對來自重慶市巫山縣某規模豬場的送檢病死仔豬通過問詢法臨床調查、實地尸體病理解剖及實驗室疑似病原的分子生物學檢測,制定防控方案并實施,于全群防控方案執行后的第30天及分群治療方案執行后的第15天時分別收集結果。結果表明,準確診斷、全群自家組織滅活疫苗緊急接種、分群治療使用雞抗豬流行性腹瀉三聯高免卵黃抗體口服液是規模豬場暴發仔豬流行性腹瀉的原則和有效措施。
TGP;卵黃抗體;自家組織滅活疫苗;分析
伴隨養豬業規模化程度越來越高,規模豬場急性、頑固性腹瀉也成為引起仔豬死亡的主要因素,導致規模豬場養殖效益降低,嚴重影響養豬業的順利發展。以豬傳染性胃腸炎病毒(Transmissible Gastroenteritis of Pigs virus,TGP)、流行性腹瀉病毒(Porcine Epidemic Diarrhea virus,PEDV)、輪狀病毒為主導引起仔豬腹瀉的主要病毒性病原因素;大腸桿菌、沙門氏桿菌及梭菌性腸炎是仔豬腹瀉主要細菌性病原因素[1-4]。目前,加強飼養管理及強化免疫是防控規模豬場仔豬腹瀉的主要手段[5,6]。
1.1病料來源及處理
宜賓市江安縣某生豬養殖場的自繁自養10頭病死哺乳期外三元仔豬。通過對其隨機選擇的其中2頭死仔豬,無菌采集脾、腸系膜淋巴結及小腸、大腸內容物,作實驗室疑似病原的抗原分子生物學檢測病料。
1.2主要試劑及檢測單位
抗原檢測試劑盒為豬流行性腹瀉病毒PCR快速檢測試劑盒,通用引物由上海生工合成;檢測單位為西南大學榮昌校區動物疫病快速診斷中心實驗室;雞抗豬傳染性胃腸炎-流行性腹瀉-偽狂犬三聯高免卵黃抗體口服液及實驗室病理解剖診斷,由西南大學榮昌校區動物醫學系基礎獸醫Ⅱ室提供和完成。
1.3病例描述
2016年3月16日,重慶市宜賓江安縣某生豬養殖場仔豬出現頑固性腹瀉,常規方法不能控制病情,初生仔豬發病率接近100%,死亡率60%~100%不等。經技術人員建議,送病死豬及瀕死仔豬樣本到西南大學榮昌校區動物醫學系實驗室病理解剖診斷及分子生物學診斷并提具體的防控方案。
1.4診斷方法及內容
采取描述流行病學調查法對發病豬場發病經過、養殖規模、養殖品種、免疫疫苗類型及時間、用藥情況、豬場硬件設備、豬場管理水平等進行臨床調查;利用實驗室病理解剖病死及瀕死仔豬主要器官的獲得病理變化結果[7];通過問詢法了解發病仔豬發病日齡、腹瀉糞便色澤、形狀等。通過臨床調查、實驗室病理解剖診斷及腹瀉表征得出初步診斷結果,采集瀕死仔豬或病死仔豬大腸、小腸內容物及脾、腸系膜淋巴結等于實驗室作疑似病原的抗原分子生物學檢測[8],并據此作出準備診斷。
1.5緊急防控方案
1.5.1病豬群分類根據體溫、體況、精神狀態、呼吸頻率、食欲包括飲水欲及對外界刺激的反應程度將病豬群分為淘汰豬群、重癥豬群、中度及以下癥狀豬群。淘汰豬群是針對體溫低于38℃正常體溫以下、心率、呼吸頻率低而弱、無食欲、極度消瘦及對外界刺激無反應的豬群;重癥豬群指體溫正常或低燒(約40℃)、有飲水欲望、食欲廢絕、心率及呼吸頻率中等或略快、對外界刺激有微弱反應、體況介于正常與極度消瘦之間的豬群;體溫正常或低燒(約40℃)、有飲水欲及食欲、心率及呼吸頻率中等或偏快、對外界刺激即時反應、體況略顯脫水、精神正常或略顯沉郁為中度及以下癥狀豬群。根據病豬群分類方法,將16頭病仔豬歸為淘汰病豬群;28頭病仔豬歸類為重癥豬群;285頭病仔豬歸類為中度及以下癥狀豬群。
1.5.2整體防控根據臨床調查及實驗室病理解剖診斷,對發病仔豬群采取自家組織滅活疫苗按3mL/頭,5~7 d后按2mL/頭加強免疫1次進行緊急接種;發病仔豬群恩諾沙星飲水,上下午各1次,連用3~4 d,后將恩諾沙星更換為慶大霉素,飲水或拌料3~4 d,停藥5 d;同時,葡萄糖及電解質多維混合飲水30~37℃,連用3~4 d,根據豬群表現的癥狀1次/d,至豬群恢復正常停用。除配種1個月內的懷孕母豬外,其他母豬及種公豬均緊急接種自家組織滅活疫苗,第1次9mL/頭,5~7 d后按4~5 mL/頭加強免疫1次。同時,加強飼養管理,及時做好清潔和消毒,在保證豬舍溫度的前提下做好豬舍通風。按上述方案,選擇30 d內生產的10窩仔豬作腹瀉發生情況的跟蹤調查對象,收集并統計結果,備用。
1.5.3分群治療重癥豬只按強心、補液、抗繼發感染及治本的原則處方。肌肉注射樟腦磺酸鈉,按30~50mL/頭口服補液鹽及5~10 m L/頭慶大霉素注射或口服液、按10mL/頭口服雞抗豬傳染性胃腸炎-流行性腹瀉-偽狂犬三聯高免卵黃抗體口服液,均上、下午各1次,連用3~4 d,根據病況減半劑量及減少給藥次數至1次/d至2 d/次[9]。中度及以下癥狀豬群按6mL/頭口服雞抗豬傳染性胃腸炎-流行性腹瀉-偽狂犬三聯高免卵黃抗體口服液,每天上午、下午各1次,連用2 d,第3~5天根據病情1次/d;同時每天上、下午各1次益生菌劑及口服補液鹽,連用2 d,第3~5天根據病情1次/d。于實施處方后第15天時收集分群治療結果。
2.1臨床調查結果
該豬場為典型的自繁自養的家庭農場。無正規的免疫程序表;豬舍設計不規范、管理粗放、保溫措施很差;圈舍空氣污濁、氨氣味較濃,有刺眼感覺。發病仔豬于出生第1天開始腹瀉,排淡黃或黃紅色稀糞,部分病仔豬排黃綠色稀糞,曾使用氟苯尼考、雙黃連或黃芪多糖口服液,未見好轉。
2.2臨床診斷結果
對送檢的2頭瀕死仔豬進行解剖,2頭被解剖病仔豬均脫水嚴重,消瘦,被毛黃色;鼻孔、耳末梢及腹壁皮膚未見淤斑;頭部、頸部皮下、眼瞼未見水腫;腹股溝淋
巴結、下頜淋巴結均不同程度出血,腫大不明顯;胃內均留存有不同程度凝乳塊或乳白色液體狀物,部分胃底腺區出血潰瘍;部分仔豬空腸腸壁血管增生充血明顯,腸壁變厚、腸內積有少量白色或黃白色內容物,剖開腸腔腸黏膜易脫落;回盲乳頭出血,大部分病死仔豬盲結腸充滿黃白色內容物;左右腎形狀均呈近三棱形,表面有不同程度凹陷,除去纖維膜,部分病死豬腎表現有散在的針尖狀出血點;被解剖病死豬肝呈不同程度出血或黃白色塊狀壞死區;膽囊腫脹,積滿近似藍黑色膽汁;膀胱黏膜無明顯病變;腸系膜淋巴程度不等的充血出血,部分病死豬腸系膜淋巴結呈繩索狀腫大;脾不同程度出血,腫大不明顯,部分病死豬脾邊緣有呈黑色連續性梗死灶;被解剖病死豬左右肺均不同程度出血,但未見肉變;肺門淋巴結程度不等的充血出血,腫大不明顯;頸部皮下無水腫;喉黏膜未見充血和出血;腦膜未見水腫、出血、充血。
2.3實驗室分子生物學檢測結果
利用RT-PCR方法對送檢樣品中的2份病料進行流行性腹瀉病毒和傳染性胃腸炎病毒檢測,圖中1和2泳道分別為送檢樣本A和B豬流行性腹瀉病毒的檢測結果,3和4泳道分別是送檢樣本A和B傳染病胃腸炎病毒的檢測結果。其中豬傳染性胃腸炎病毒陽性目的條帶大小為1 060 bp、豬流行性腹瀉病毒大小為462 bp。經檢測,送檢的兩頭樣本豬傳染性胃腸炎病毒檢測均為陽性,流行性腹瀉病毒檢測均為陽性。

圖1 發病仔豬實驗室分子生物學快速檢測結果
2.4防控及分群治療結果
對執行全群防控后30 d內新出生的10窩仔豬作跟蹤調查,10窩共134頭仔豬,有2窩出現不同程度腹瀉,窩腹瀉率為20%;腹瀉仔豬16頭,占整個統計窩仔豬數的11.9%,即腹瀉率為11.9%;腹瀉仔豬的腹瀉時間延遲到出生后第5~6天開始發生;30 d的統計期內共因腹瀉死亡仔豬6頭,占整個134頭仔豬的4.4%。28頭重癥病仔豬治療后第15天死亡8頭,精神、體溫、食欲基本恢復正常豬只16頭,其他4頭,治愈率57.2%。285頭中度及以下癥狀豬群于實施方案后的第15天時死亡6頭,治愈率97.9%。
1)病毒性病原是引起規模豬場仔豬頑固和惡性腹瀉并導致快速死亡的主要因素,大部分技術人員多根據臨床表征和病理特征定位于豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉或輪狀病毒性腹瀉的診斷結果,沒有從實驗室精確的診斷進行確診。本文通過臨床調查了解其免疫史、豬場管理水平、病仔豬臨床表征為排除各項腹瀉因素奠定了基礎,實驗室多頭病仔豬的病理解剖及抗原分子生物學檢測為驗證是否屬于相同病原引起而進行準確診斷提供了保障,為本文探討針對流行性腹瀉病例的防控方案效果提供了科學依據。
2)規模豬場免疫失敗導致各種疫病散發或繼發流行,使針對仔豬腹瀉的防控更多以提高飼養管理和人工被動免疫、防繼發感染的方案進行;本文利用實驗室研發的雞抗豬傳染性胃腸炎-流行性腹瀉-偽狂犬三聯高免卵黃抗體口服液對重癥豬群實施口服,有利于直接中和、抵抗腸道流行性腹瀉病毒,同時,通過注射對腹瀉性細菌病原敏感的恩諾沙星,達到治本的作用。脫水及心衰是導致腹瀉病仔豬死亡的直接原因,通過注射樟腦磺酸鈉及口服補液鹽,維持病仔豬機體的水鹽代謝平衡,有助于病仔豬的存活,重癥豬群57.2%及中度以下癥狀豬群97.9%的治愈率說明本方案的有效性。
3)自家疫苗是指利用發病豬場分離的病原菌或病毒,或發病仔豬某些組織器官經過實驗室系列工藝制備而成的疫苗,是針對規模養殖場發生大規模疫情時的有效防控措施之一。本病例通過采集來自不同圈舍、不同母豬的病死仔豬脾等制備組織滅活疫苗,既有助于針對性的產生本地流行性腹瀉病毒株的特異抗體,也通過大劑量的免疫刺激被接種豬群的非特異性保護屏障,增加被接種豬群機體的抵抗力,減少腹瀉的發生;從防控前60%~100%降至防控后11.9%的腹瀉發生率,證明通過自家組織滅活疫苗緊急防控,規模豬場暴發腹瀉的方法切實可行且有效。自家組織滅活疫苗本身的滅活是否徹底、是否感染有其他病原等決定該種方式僅限于商品豬場及大規模疫情發生時的緊急防控。(編輯:王申)
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10.3969/j.issn.1008-4754.2016.8.012
曾饒瓊(1969-),女(漢族),四川宜賓人,副教授,碩士,主要從事畜禽生產學的研究。E-mail: zeng-rq@163.com;
西南大學橫向項目專項(項目號:134020-41000316)