MMP-2、CXCR 4和BMP-2在乳腺癌患者中的表達及其生物學(xué)意義

陳艷飛

MMP-2、CXCR 4和BMP-2在乳腺癌患者中的表達及其生物學(xué)意義

陳艷飛

目的 檢測MMP-2、CXCR 4和BMP-2在乳腺癌組織中的表達及其與臨床指征的相關(guān)性，探討它們在乳腺癌中的生物學(xué)意義。方法 選擇臨床及病理資料完整的乳腺癌患者103例。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測腫瘤組織中MMP-2、CXCR 4和BMP-2的表達情況，并結(jié)合患者腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期等，探討它們之間的相互關(guān)系。結(jié)果 MMP-2、CXCR 4和BMP在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織中的陽性表達率均高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的陽性表達率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。MMP-2分別與CXCR 4、BMP-2的陽性表達率呈正相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論 MMP-2、CXCR 4和BMP-2共同參與乳腺癌的浸潤和轉(zhuǎn)移，聯(lián)合檢測三者表達可評估乳腺癌的轉(zhuǎn)移情況。

MMP-2；CXCR 4；BMP-2；乳腺癌

乳腺癌（Breast Cancer）是一種發(fā)生在乳腺上皮組織中的惡性腫瘤，在女性腫瘤發(fā)病率中居第一位［1］。MMP-2、CXCR 4和BMP-2是多種惡性腫瘤重要的轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白，參與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移。本實驗通過檢測乳腺癌組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）、趨化因子（CXCR 4）和骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP-2）的表達情況，并結(jié)合患者淋巴轉(zhuǎn)移狀況、臨床分期等，探討它們之間的相互關(guān)系及在乳腺癌轉(zhuǎn)移中的意義。

1　材料與方法

1.1臨床資料

收集2005年1月～2013年12月在蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院和附屬第二醫(yī)院接受手術(shù)確診為乳腺癌的患者103例，所有患者均具有完整的臨床病理資料，術(shù)前均未接受放療和化療。患者均為女性，年齡28～88歲，為浸潤性乳腺癌患者，伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移48例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移55例。

1.2主要試劑

一抗均購自于Abcam公司，二抗購自于基因科技（上海）有限公司。

1.3免疫組織化學(xué)染色法

為En Vision兩步法，按試劑盒說明書步驟進行操作。

1.4染色結(jié)果判定

陽性染色為棕黃色顆粒。根據(jù)陽性細胞在觀察細胞中所占比率與染色強度的乘積為最終結(jié)果：0～1分為陰性（-），2～3分為陽性（+），4～5分為陽性（++），6～9分為強陽性（+++）。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學(xué)處理，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1乳腺癌組織中MMP-2、CXCR 4與BMP-2的表達

MMP-2和BMP-2定位于細胞質(zhì)，陽性染色為棕黃色顆粒。CXCR 4蛋白定位在細胞質(zhì)和細胞膜。見圖1。

圖1　MMP-2、CXCR 4和BMP-2在乳腺癌組織中的表達（En Vision法，×400）

2.2乳腺癌組織中MMP-2、CXCR 4及BMP-2陽性表達率與各病理指標的關(guān)系

有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織中MMP-2、CXCR 4及BMP-2陽性表達率均明顯高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。不同腫瘤大小的乳腺癌組織中BMP-2陽性表達率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.5），在組織學(xué)分級中，BMP-2的陽性表達率隨著級別的增高，陽性表達率在逐漸降低，組織學(xué)分級（G 1）級和G 3級之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。在雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及人表皮生長因子受體2（HER 2）的檢測中發(fā)現(xiàn)：在HER 2表達陽性的患者乳腺癌組織中BMP-2的陽性表達率高于HER 2表達陰性者（P＜0.05）。見表1。2.3乳腺癌組織中MMP-2、CXCR 4與BMP-2表達的關(guān)系

MMP-2、CXCR 4及BMP-2在乳腺癌組織中的表達均呈兩兩正相關(guān)（P＜0.05）。見表2和表3。

3　討論

MMP-2是基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）家族的重要成員，是降解微環(huán)境中細胞外基質(zhì)（ECM）和基底膜（BM）的重要酶。在乳腺癌患者中常可見MMP-2表達水平的增加，其機制主要是［2-3］：（1）降解細胞外基質(zhì)。MMP-2活化后，能特異性的降解IV型膠原，破壞ECM和BM的屏障作用，利于腫瘤細胞的浸潤；（2）促進血管形成。MMP-2可促進多種血管生長調(diào)節(jié)因子的釋放，促進腫瘤內(nèi)新生血管的生成；（3）促進細胞增殖；（4）調(diào)節(jié)細胞間的粘附力；（5）誘導(dǎo)腫瘤細胞的免疫逃逸，促進腫瘤細胞增殖。

CXCR 4是趨化因子CXCL 12的受體，許多惡性腫瘤（如乳腺癌、胃癌、宮頸癌等）均可見CXCR 4表達水平的增高［4-5］。研究表明［6］，在乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的CXCL 12的表達水平高于原發(fā)腫瘤灶，對表達CXCR 4的乳腺癌細胞產(chǎn)生趨化作用，趨使乳腺癌細胞向CXCL 12表達增加的淋巴結(jié)組織移動，與CXCL 12相結(jié)合，促進了腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移。

BMP-2是誘導(dǎo)成骨活性最強的BMPs家族成員之一。有學(xué)者使用聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）技術(shù)，在乳腺癌高轉(zhuǎn)移細胞系MDAMB-231和低轉(zhuǎn)移細胞系MCF-7中均檢測出了BMP II型受體，在分子水平上證實了BMP-2存在于乳腺癌細胞中［7］。已發(fā)現(xiàn)BMP-2在非小細胞肺癌、前列腺癌及中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤等中均有過表達［8］。但也有BMP-2的高表達抑制腫瘤細胞增殖的報道。龍騰等［9］研究結(jié)果表明，不同濃度的BMP-2可以對人結(jié)腸癌細胞株的增殖產(chǎn)生抑制作用，且具有一定的濃度依賴性。

本次實驗中，MMP-2、CXCR 4及BMP-2在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者乳腺癌組織中的陽性表達率均顯著高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者（P＜0.05）。提示三者在乳腺癌組織中的表達均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)。腫瘤越大，BMP-2陽性率越高。而隨著組織學(xué)級別的增高，BMP-2陽性表達率在逐漸降低，G 1級和G 3級之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。提示在乳腺癌的發(fā)展過程中，BMP-2可能起到了促進和抑制雙重作用，需要進一步的實驗論證，尋找相關(guān)機制。HER 2陽性者的BMP-2表達明顯高于陰性組，間接證實了BMP-2的表達與乳腺癌的轉(zhuǎn)移和預(yù)后有關(guān)。

本次實驗結(jié)果顯示，MMP-2、CXCR 4和BMP-2的表達呈明顯正相關(guān)。提示MMP-2、CXCR 4和BMP-2在乳腺癌的浸潤轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮協(xié)同作用，共同促進了乳腺癌的發(fā)展。

綜上所述，MMP-2、CXCR 4和BMP-2協(xié)同促進了乳腺癌的浸潤和轉(zhuǎn)移，可以通過聯(lián)合檢測乳腺癌組織中MMP-2、CXCR 4 和BMP-2的表達來指導(dǎo)臨床并預(yù)測預(yù)后，對臨床治療效果做出正確評價。

表1　MMP-2、CXCR 4和BMP-2在不同臨床因素下的乳腺癌組織中的表達

表2　MMP-2與CXCR 4、BMP-2在乳腺癌組織中表達的關(guān)系

表3　CXCR 4與BMP-2在乳腺癌組織中表達的關(guān)系

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Expression and Biological Significance of MMP-2，CXCR 4 and BMP-2 in Breast Cancer

CHEN Yanfei Clinical Laboratory，Maternal and Child Health Hospital of Yancheng City，Yancheng Jiangsu 224001，China

Objective To investigate the expression and the biological significance of MMP-2，CXCR 4 and BMP-2 in patients with breast cancer and analyze their correlation.Methods A total of 103 breast cancer patients were analysed.The expressions of MMP-2，CXCR 4 and BMP-2 were detected by inmunohistochemical staining.The correlations among the expressions of MMP-2，CXCR 4，BMP-2 and clinical stage，lymph node metastasis and tumor size were analysed.Results The positive expression rates of MMP-2，CXCR 4 and BMP-2 in the group of breast cancer with lymph node metastasis，significantly higher than those in the group of breast cancer without lymph node metastasis（P＜0.05）.Positive correlation could be found between MMP-2 and CXCR 4，BMP-2 expression（P＜0.05）.Conclusion These results suggest that they might be important factors in breast metastasis，these proteins are indicators of metastasis of breast cancer.

MMP-2，CXCR 4，BMP-2，Breast cancer

R36

A

1674-9308（2016）23-0031-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.23.019

江蘇省鹽城市婦幼保健院檢驗科，江蘇 鹽城 224001