新疆部分規(guī)模化奶牛場牛病毒性腹瀉調(diào)查

劉潔瓊　新疆兵團畜牧獸醫(yī)工作總站　830000

新疆部分規(guī)模化奶牛場牛病毒性腹瀉調(diào)查

劉潔瓊新疆兵團畜牧獸醫(yī)工作總站830000

為了了解新疆部分規(guī)模化奶牛場BVDV的感染情況，對采集的奶牛血清、流產(chǎn)死胎和鼻拭子等組織病料應(yīng)用Ruminant BVD/BD p80-Serum阻斷ELISA實驗及牛病毒性腹瀉 （BVD）實時熒光RTPCR的方法進行檢測，BVDV血清學(xué)檢測陽性率為63.8%，組織病料樣品中陽性率為13.46%，結(jié)果表明BVDV在新疆規(guī)模化奶牛場中已存在感染，因此應(yīng)該對發(fā)病動物進行隔離或者淘汰，避免相互感染傳播，降低感染率。

牛病毒性腹瀉；阻斷ELISA；實時熒光RT-PCR

牛病毒性腹瀉（BVDV）又稱牛病毒性腹瀉-黏膜病，簡稱黏膜病。與豬瘟病毒和羊邊界病病毒同屬黃病毒科瘟病毒屬。其特征為黏膜發(fā)炎、糜爛、壞死和腹瀉，還引起患畜的持續(xù)性感染，產(chǎn)生免疫抑制或免疫耐受現(xiàn)象。

BVDV是奶牛的主要病原之一，可引起奶牛多種病變或臨床綜合征。自1980年國內(nèi)首次報道該病以來，我國許多地區(qū)先后報道有該病的發(fā)生，給畜牧養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。新疆部分地區(qū)牛場有犢牛腹瀉和母牛流產(chǎn)等現(xiàn)象，影響和制約了奶牛業(yè)的發(fā)展。為了了解BVDV的感染情況，我們對采集的血清和組織病料應(yīng)用Ruminant BVD/BD p80-Serum阻斷ELISA實驗及牛病毒性腹瀉（BVD）實時熒光RT-PCR的方法進行檢測，結(jié)果報告如下。

1　材料與方法

（1）樣品來源。血清學(xué)樣品。為了查明新疆地區(qū)部分規(guī)模化奶牛場牛病毒性腹瀉感染狀況，2011～2014年，從A、B、C、D、E五個規(guī)模化牛場采集存在流產(chǎn)、死胎、弱犢、肺炎和腹瀉等臨床表現(xiàn)的0～8歲齡奶牛的血液樣品。F場主要飼養(yǎng)生活在天山深處（巴音布魯克草原）的牦牛，上世紀50～60年代從青海引進，經(jīng)過60年的繁衍，已經(jīng)適應(yīng)在天山深處的生活環(huán)境，臨床表現(xiàn)健康。病原學(xué)樣品。采集流產(chǎn)死胎的肝、脾和腎等組織59份，1～2月齡有咳嗽、流鼻涕癥狀的犢牛鼻拭子81頭份及耳組織31頭份，2月齡內(nèi)存在腹瀉癥狀犢牛的糞便37頭份，總共208頭份。

（2）主要試劑。Ruminant BVD/BD p80-Serum試劑盒（批號：1-BVD-015 03-2014）購自法國LSIVET公司，牛病毒性腹瀉（BVD）實時熒光RT-PCR檢測試劑盒（批號BVD20140926P）。

（3）檢測方法。BVDV阻斷ELISA和實時熒光RT-PCR的檢測均參照試劑盒說明書進行。

2　結(jié)果

（1）對6個牛場522份血清進行檢測，結(jié)果顯示有333份陽性，陽性率為63.8﹪，結(jié)果詳見表1。

表1　牛病毒性腹瀉抗體檢測結(jié)果

（2）采用實時熒光RT-PCR方法檢測的組織病料樣品中的陽性率為13.46%。在流產(chǎn)死胎和鼻拭子中檢出BVDV病毒，糞便和耳組織中未檢出該病毒，結(jié)果詳見表2。

表2　牛病毒性腹瀉病原學(xué)檢測結(jié)果

3　討論和分析

（1）本次調(diào)查的規(guī)模化奶牛場BVDV血清學(xué)檢測陽性率為63.8﹪，采用實時熒光RT-PCR方法檢測的組織病料樣品中陽性率為13.46%，并且所采牛群均未進行BVDV疫苗免疫，說明BVDV在新疆規(guī)模化奶牛場中已存在感染。我國內(nèi)蒙古部分地區(qū)的陽性率為62.5%，個別牛場陽性率高達100%［1］。從陜西、甘肅、寧夏、青海和四川五省（區(qū)）部分地區(qū)的黃牛群、牦牛群采集血清，用細胞中和試驗檢測牛病毒性腹瀉/黏膜病（BVD-MD）抗體，結(jié)果黃牛群BVD-MD陽性檢出率為46.15%，牦牛群BVD-MD陽性檢出率為30.08%［2］。

（2）此次檢測中牦牛陽性率為38.3%，其生活在天山深處，有機會接觸野生動物和家養(yǎng)牛群，但牦牛群和野生動物與家養(yǎng)牛群之間的傳播機制尚不明確，有待進一步驗證。

（3）在OIE的陸生動物診斷試驗和疫苗手冊中推薦病料采集耳廓組織作為檢測樣品進行檢測，此次采用實時熒光RT-PCR的方法在發(fā)病犢牛的耳組織未檢測到BVDV陽性樣品，一種可能是確實耳廓樣品中不含有檢測病毒，另外一種可能是采集時機不是帶毒時間區(qū)段，再有一種可能是耳廓的核酸提取有問題，需進一步驗證。

（4）BVDV感染牛后引起患畜的持續(xù)性感染，產(chǎn)生免疫抑制或免疫耐受現(xiàn)象，而且很少出現(xiàn)臨床癥狀。多數(shù)動物外觀健康但生產(chǎn)性能下降，這些外觀健康的持續(xù)性感染動物在傳播中具有重要作用。因此，及時對發(fā)病動物進行隔離或者淘汰，避免相互感染傳播。對感染率高的牛群，可通過疫苗免疫的方法降低發(fā)病率，同時保持環(huán)境衛(wèi)生和消毒工作，減少有害致病菌的滋生。

［1］申之義，關(guān)平原，李平安等內(nèi)蒙古地區(qū)牛病毒性腹瀉-粘膜病流行病學(xué)調(diào)查.中國獸醫(yī)雜志，1995，21（8）：5-6.

［2］高雙娣，邱昌慶，周繼章等西北和西南五省（區(qū)）部分地區(qū)黃牛牦牛牛病毒性腹瀉/粘膜病血清學(xué)監(jiān)測.中國獸醫(yī)科技，1999，29（7）：17-18.

兵團重點領(lǐng)域科技攻關(guān)計劃項目—集約化奶牛場奶牛繁殖障礙類傳染病流行病學(xué)調(diào)查與防控技術(shù)研究（2013BA004）。