白靈菇菌株Pl.n0006的生物學特性研究

王麗星，謝寶貴，黃志偉

（1．福建農林大學食品科學學院，福建 福州 350002；2．福建農林大學菌物研究中心，福建 福州 350002）

白靈菇菌株Pl.n0006的生物學特性研究

王麗星1，謝寶貴2，黃志偉1

（1．福建農林大學食品科學學院，福建 福州 350002；2．福建農林大學菌物研究中心，福建 福州 350002）

研究白靈菇菌株Pl.n0006的生物學特性，探索其在固體發酵條件下的最佳生長條件，為其栽培技術研究奠定基礎。采用不同的固體培養基，研究培養基的組成、含水量、酸堿度及光照對菌絲生長的影響。結果表明：白靈菇菌絲在添加麥皮或稻草粉的木屑培養基中都能較好地生長；在培養基中添加1%～5%的石灰可促進菌絲生長，而添加1%～5%的過磷酸鈣反而會抑制菌絲生長，菌絲在PDA培養基上生長的最佳pH值為8～11；在黑暗條件下培養，菌絲的生長速度顯著比光照條件下快。

白靈菇；生物學特性；菌絲體；固體培養；生長條件

白靈菇（Pleurotus nebrodensis）屬于擔子菌亞綱，層菌綱，傘菌目，側耳科，側耳屬，又名白阿魏蘑，可稱之為刺芹側耳的另一個變種。白靈菇是一種藥、食兩用的大型真菌，蓋厚柄粗，菇體肥大，顏色潔白，肉嫩鮮美，并有豐富的營養價值[1]。白靈菇含有豐富的蛋白質、碳水化合物、粗纖維、維生素C、多糖和礦物元素，具有清熱解毒、治療胃病、傷寒、降血壓防止動脈硬化、防治骨質疏松、增強人體免疫力等功效[2]。盛偉等[3]研究發現，白靈菇有很強的清除羥基自由基和超氧自由基的能力，并且有較強的還原力和清除NO的能力，可以開發成為抗衰老保健食品輔料或功能因子。

對于白靈菇的生長培育，優質的菌種是白靈菇栽培能否成功的關鍵，而培育優質白靈菇菌種的關鍵之一是培養基，培養基雖然有很多種類，但是可以被白靈菇利用的卻不多[4]。王桂芹等[5]研究發現，以豆秸粉為主料培養白靈菇，其生物學效率高，因為白靈菇對碳源的要求高一些，而豆秸粉里含有一定量的稻草粉，說明白靈菇的培養基中要求有一定量的木質素。張浩洋等[6]研究表明，白靈菇菌絲可在pH值為4～11的培養基上生長，最適pH為6～8。張瑞穎等[7]研究發現，白靈菇的培養過程給予一定的散射光（400～600Lux），可使白靈菇的子實體更加潔白。培養料的最適含水量為60～62%，若含水量過低，不能滿足菌絲生長和子實體的生長發育；若含水量過高，則發菌中后期吃料慢。

為了深入研究白靈菇菌株Pl.n0006的人工栽培技術，文章對該菌株的生物學特性進行研究，現將研究結果總結如下。

表1 12個配方培養基的組成

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株

白靈菇菌株Pl.n0006為福建農林大學菌物研究中心提供。

1.1.2 供試培養基配方

1.1.2.1 不同固體培養基配方對白靈菇菌絲生長的影響

采用不同的主料和輔料，按表1分別配制出12種固體培養基配方。在配制培養基之前，先將麥皮、玉米粉、木屑和稻草粉置于105℃下烘干2～3h，并防止返潮（下同）；然后將各種配方培養基的含水量均控制為60%。

1.1.2.2 培養基含水量對白靈菇菌絲生長的影響

配方I：木屑76%、麥皮20%、過磷酸鈣2%、葡萄糖1%、石膏1%；

配方II：木屑76%、稻草粉20%、過磷酸鈣2%、葡萄糖1%、石膏1%。

2種培養基分別設置6個含水量水平，即50%、55%、60%、65%、70%、75%。

1.1.2.3 培養基酸堿度對白靈菇菌絲生長的影響

PDA斜面培養基配方：馬鈴薯200g、葡萄糖20 g、瓊脂20g、水1000mL，PDA培養基配制好后用1mol·L-1HCl或1mol·L-1NaOH調整pH至4、5、6、7、8、9、10、11。

木屑培養基配方：以木屑78%、麥皮（或稻草粉）20%、葡萄糖1%、石膏1%為基礎，分別在木屑麥皮培養基（I）和木屑稻草粉培養基（II）中添加過磷酸鈣或石灰，各設5個劑量，即1%、2%、3%、4%、5%，相應減少配方中木屑的用量，使培養料總和為100%，以不添加過磷酸鈣和石灰的基礎培養基為對照。

培養基的含水量均為65%。

1.1.2.4 光照對白靈菇菌絲生長的影響

馬鈴薯200g，葡萄糖20g，KH2PO4 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，瓊脂20g，水1000 mL。

1.2 方法

1.2.1 不同固體培養基配方對白靈菇菌絲生長的影響

按15g培養料（干重）/試管計算，每個配方約需250g/4培養料（干重）。依表1所述配方計算，并稱取培養基各組分，按配方分別先將除過磷酸鈣、葡萄糖和石膏以外的各組分混合。再分別取自來水375mL/4/配方，加到過磷酸鈣、葡萄糖和石膏的混合物中，溶解后，倒入木屑等的混合物中，并充分混合均勻。然后分裝于25×200mm試管中，并用口徑較小的試管壓實培養料，塞上棉花塞，在126℃下滅菌45min。用接種針挑取白靈菇菌塊，接種到各試管的培養基上，并使有菌絲的一面朝上，然后置于溫度為28℃的培養箱中培養。待菌絲長入料中約1cm時，畫起始線，并注明畫線日期。然后繼續培養，待菌絲長至接近試管底時畫終止線，計算菌絲生長速度（mm·d-1）并評估菌絲長勢，然后用軟件SAS System For Windows Release 6.12 對實驗數據進行方差分析與顯著性測驗（下同）。

1.2.2 培養基含水量對白靈菇菌絲生長的影響

參照1.2.1所示方法準備好不同含水量的培養基，每個處理4個重復，高壓滅菌，接種，培養，記錄菌絲的生長情況。

1.2.3 培養基酸堿度對白靈菇菌絲生長的影響

不同pH值的PDA培養基分裝于18×180mm試管中，每個處理4個重復，在121℃下高壓滅菌30min后，制作斜面培養基。配制木屑培養基時，先將過磷酸鈣或石灰、葡萄糖和石膏加入水中制成混懸液，再與其它干料混合物充分混合均勻，配制成不同酸堿度的培養基，然后參照1.2.1所示方法對培養基進行高壓滅菌，接種，培養，記錄菌絲的生長情況。

1.2.4 光照對白靈菇菌絲生長的影響

先配制平板的固體培養基，將白靈菇菌種接種于培養皿的中間位置，然后分成2組，每組4個重復，一組置于光照培養箱中培養（光照強度為2780 Lux），一組置于暗培養箱中培養，溫度均為25℃。當菌落直徑為2 cm以上時，參照1.2.1所示方法記錄菌絲的生長情況。

2 結果與分析

2.1 培養基配方對白靈菇菌絲生長的影響

從圖1可以看出：在不同配方培養基中，白靈菇菌絲生長速度的差異達極顯著水平，其中：以木屑、棉子殼和麥皮為主料的培養基（9號配方）中，白靈菇菌絲的生長速度最快；以棉子殼、稻草粉和玉米粉為主料的培養基（7號配方）中，菌絲的生長速度最慢。

2.2 培養基含水量對白靈菇菌絲生長的影響

從圖2可以看出：白靈菇菌絲在麥皮培養基中的生長速度均比稻草粉培養基中的生長速度快。白靈菇菌絲在2類培養基中的生長速度對于培養基含水量變化的響應基本一致，即隨著培養基含水量的增加，菌絲的生長速度呈加快的趨勢。

2.3 培養基酸堿度對白靈菇菌絲生長的影響

2.3.1 斜面培養基pH值對菌絲生長的影響

從圖3可以看出：斜面培養基的pH值為4～8時，菌絲生長速度差異顯著，隨著pH值的上升，菌絲生長速度顯著上升。當斜面培養基的pH值為9～11時，菌絲的生長速度沒有顯著性差異，且生長良好。

2.3.2 在麥皮草粉培養基中添加酸性或堿性輔料對白靈菇菌絲生長的影響

從圖4可以看出：在木屑麥皮（或稻草粉）培養基中添加1%～5%的過磷酸鈣均抑制了白靈菇菌絲的生長，而在木屑麥皮（或稻草粉）培養基中添加1%～5%的石灰均可促進白靈菇菌絲的生長。

2.4 光照對白靈菇菌絲生長的影響

從圖5可以看出：在光照和黑暗條件下培養，白靈菇菌絲生長速度的差異達到極顯著水平，在黑暗條件下培養可以顯著促進白靈菇菌絲的生長。

3 結論與討論

本研究結果表明：白靈菇菌株Pl.n0006在添加麥皮或稻草粉的木屑培養基中都能較好地生長；在培養基中添加1%～5%的石灰可促進菌絲的生長，而添加1%～5%的過磷酸鈣反而會抑制菌絲生長，菌絲生長適宜的PDA培養基pH為8～11；在黑暗條件下培養，菌絲的生長速度顯著比光照條件下快。

長期以來白靈菇栽培的主料為棉籽殼，其價格已經日益上漲[8]。馬瑞霞[9]研究表明，用棉籽殼作為主要原料培養出的菌絲長勢強，出菇快，且子實體大、菌肉厚，產量高，這是因為棉籽殼顆粒大、結構疏松、透氣性好、營養豐富，營養物質易被白靈菇吸收利用。因此，本研究將麥皮或稻草粉與棉籽殼混合作為培養基主料，不影響白靈菇的菌絲生長，降低其栽培成本，并使稻草等廢棄物得到有效利用。

從本研究結果可以看出，光照對白靈菇菌絲的生長有顯著影響，這與王文治等[10]的研究結果一致。因此，為了更好地讓白靈菇菌絲生長，應在暗處培養白靈菇，而到了菇蕾分化階段則需要一定的散射光。

[1] 陳文良.白靈菇的營養價值和開發前景[J].食用菌，1999，(4)：40.

[2] 惠恩舉.白靈菇發展前景看好[J].特種經濟動植物，2002，(11)：38.

[3] 盛偉，方曉陽，吳萍.白靈菇、杏鮑菇、阿魏菇多糖體外抗氧化活性研究[J].食品工業科技，2008，(5)：29.

[4] 胡清秀，鄧華平.白靈側耳栽培技術研究[J].食用菌學報，2001，8(4)：38 -42.

[5] 王桂芹，穆寶漢.白靈菇培養基篩選試驗[J].中國林副特產，2006，(6)：10-12.

[6] 張浩洋，李冬，葛芳，等.白靈菇人工試栽技術[J].防護林科技，2010，(4)：121-122.

[7] 張瑞穎，胡清秀，左雪梅，等.白靈菇栽培經驗及問題分析[J].中國食用菌，2010，29(2)：63-65.

[8] 吳鄭武，胡清秀，夏志蘭，等.白靈菇新型栽培基質配方研究[J].中國農學通報，2012，28(04)：245-249.

[9] 馬瑞霞.不同配方培養料對白靈菇生長發育和產量的影響[J].食用菌學報，2007，14(3)：73-76.

[10] 王文治，王永左，蔡玉俠.白靈菇生物學特性及高產栽培技術[J].天津農學院學報，2002，9(2)：61-62.

10.3969/j.issn.1007-550X.2016.12.001

S646.9

A

1007-550X（2016）12-0038-04

2016-8-25

王麗星（1992—），女，碩士研究生，研究方向：食品生物技術。

黃志偉（1978—），男，博士，講師，研究方向：食品生物技術。Email：972842976@qq.com