柚皮素對氧化應(yīng)激所致成骨細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究

吳新濤　石晶　高樂才　吳新峰　吳文元　龐石磊

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·論著·

柚皮素對氧化應(yīng)激所致成骨細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究

吳新濤石晶高樂才吳新峰吳文元龐石磊

目的觀察柚皮素對氧化應(yīng)激導(dǎo)致的成骨細(xì)胞凋亡的影響，并探討其機(jī)制。方法體外分離培養(yǎng)成骨細(xì)胞，細(xì)胞分空白對照組、單純H2O2作用組、H2O2+0.1 μmol/L柚皮素組、H2O2+1 μmol/L柚皮素組、H2O2+10 μmol/L柚皮素組。MTT法檢測成骨細(xì)胞活力；流式細(xì)胞術(shù)檢測成骨細(xì)胞凋亡率；熒光顯微鏡觀察活性氧(ROS)含量；比色法檢測丙二醛(MDA)含量；Real time-PCR 和Western-blot檢測凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表達(dá)情況。結(jié)果與空白對照組比較，單純H2O2處理組細(xì)胞活性明顯降低，凋亡率及ROS、MDA含量明顯增加；同時Bcl-2 mRNA和蛋白表達(dá)明顯下調(diào)，Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.05)。 與單純H2O2處理組比較，柚皮素預(yù)處理24 h能夠明顯增強(qiáng)細(xì)胞活性，降低細(xì)胞凋亡率及ROS、MDA含量，上調(diào)Bcl-2 mRNA和蛋白表達(dá)，下調(diào)Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表達(dá)，呈劑量依賴性(P<0.05)。結(jié)論柚皮素在氧化應(yīng)激條件下能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，抑制成骨細(xì)胞凋亡，其機(jī)制與上調(diào)Bcl-2表達(dá)，下調(diào)Bax、Caspase-3表達(dá)有關(guān)。

柚皮素；成骨細(xì)胞；氧化應(yīng)激；凋亡

近年來，骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率逐漸升高，已經(jīng)成為影響人們生活質(zhì)量的主要疾病之一[1]。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為雌激素缺乏是骨質(zhì)疏松癥發(fā)病的主要原因，然而補(bǔ)充雌激素并未明顯改善骨質(zhì)疏松癥。越來越多的研究提出，氧化應(yīng)激在骨質(zhì)疏松癥發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用[2]。中草藥柚皮苷屬黃酮類物質(zhì)，具有抗氧化、保護(hù)神經(jīng)、治療骨質(zhì)疏松癥等藥理作用。柚皮素是柚皮苷的主要代謝產(chǎn)物，體外實(shí)驗(yàn)表明柚皮素對大鼠成骨細(xì)胞促骨形成活性優(yōu)于柚皮苷[3,4]。然而，柚皮素促骨形成的具體機(jī)制尚不清楚。本研究利用體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞，觀察柚皮素對成骨細(xì)胞增殖、凋亡、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量及凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表達(dá)的影響，旨在闡明柚皮素防治骨質(zhì)疏松癥的具體分子機(jī)制?！?br>