不孕癥和自然流產患者染色體核型異常分析

郭彥偉，溫莉娟，趙顯杰，趙慧敏

1.內蒙古包鋼醫院檢驗科，內蒙古包頭　014010；

2.內蒙古包鋼醫院心血管內科，內蒙古包頭　014010

不孕癥和自然流產患者染色體核型異常分析

郭彥偉1，溫莉娟1，趙顯杰2，趙慧敏1

1.內蒙古包鋼醫院檢驗科，內蒙古包頭014010；

2.內蒙古包鋼醫院心血管內科，內蒙古包頭014010

目的 分析評價不孕癥和自然流產患者染色體核型分布的關系。方法 整群收集該院2012年1月—2015年12月行外周血染色體檢查的不孕癥和自然流產患者416例進行G顯帶染色體核型分析，發現異染色區異常病例進行C顯帶確認，發現隨體及隨體柄異常進行N顯帶確認。結果在對該院就診的不孕癥和自然流產患者核型分析檢查的416例樣品中，共檢出的51例染色體異常核型和2例性發育異常病例，總異常率為12.26%。51例染色體異常核型中常染色體結構異常有34例；異染色區多態性9例；性染色體結構異常4例。染色體數目異常4例，其中1例為嵌合型數目異常。結論染色體核型異常與不孕癥和自然流產密切相關，也是出生異常胎兒的重要原因，為達到降低出生人口缺陷率優生優育的目標應進行必要的遺傳學咨詢、產前篩查、產前診斷。

不孕癥；自然流產；染色體核型

［Abstract］Objective Analysis and evaluation of the relationship between infertility and spontaneous abortion karyotype distribution.Methods Group selection 416 cases of natural infertility and abortion cases collected in our hospital from January 2012 to December 2015 were peripheral blood chromosome G-banding karyotype，abnormal cases heterochromatin zones C banding confirmed the body was found with the body and handle exceptions with the N-banding confirmation.Results In 416 cases of infertility and spontaneous abortion samples karyotyping examination of our hospital，a total of 51 cases of detected abnormal karyotypes and two cases of dysplasia cases，the total abnormal rate was 12.26%.51 cases of abnormal karyotypes often chromosome structural abnormalities in 34 cases；heterochromatin polymorphism 9 cases；sex chromosome structural abnormalities in 4 cases.The number of chromosome abnormalities in 4 cases，1 case of abnormal number of chimeric.Conclusion Karyotype abnormality associated with infertility and spontaneous abortion，birth is an important reason for abnormal fetus，to achieve the goal of reducing the rate of prenatal and postnatal care of Birth Defects should undertake the necessary genetic counseling，prenatal screening，prenatal diagnosis.

［Key words］Infertility；Spontaneous abortion；Chromosome karyotype

染色體異常是染色體病中患者表現正常的一類，是不孕癥和自然流產患者重要的遺傳原因，據人類遺傳學家夏家輝等人統計每106～107對夫婦中就有1位染色體異常攜帶者，也有報道中國一般人群中染色體異常率為0.5%～1.0%［1］，在不孕與流產夫婦中，染色體異常攜帶者占3%～6%［2］。染色體異常中的異染色區多態性與不孕和流產的相關性在目前的相關研究報道中存在不同的觀點。該研究對該院2012年1月—2015年12月行外周血染色體檢查的不孕癥和自然流產患者416例進行染色體核型分析檢查，以探討染色體核型異常患者染色體核型分布、染色體異常與不孕癥和自然流產的相關性以及異染色區多態性與不孕癥和自然流產的相關性，為遺傳咨詢提供參考，以達到降低出生人口缺陷率優生優育的目標，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

整群收集在該院就診并進行外周血染色體檢查的不孕癥和自然流產患者病例，同時對患者進行孕產史、接觸史、家族史等可能引起染色體改變的相關信息詳細采集。

1.2方法

1.2.1 G顯帶無菌操作抽取肘靜脈血2～3 mL，在超凈工作臺中種植于10 mL培養基中，放置37℃恒溫培養箱培養每日混勻1次，培養70～72 h后加入20 ug/mL秋水仙素100 uL混勻后，再繼續培養2.5 h，1 500 r/min離心10 min吸取掉上清，培養物中加入0.075%KC1溶液10 mL低滲處理30 min，加入2 mL固定液預固定10 min離心去上清，加入10 mL固定液固定3次，42℃烤片1 h，隔日進行顯帶和染色。核型分析：每例至少計數20個核型，分析5個核型，異常者加大計數到60個核型，嵌合型病例計數到100個核型。

1.2.2 C顯帶新滴玻片42烤片1 h。隔日，60℃的1～5%（過飽和）氫氧化鋇液10～15 min，在60℃的2×SSC液中處理90min時，用自來水沖洗干凈，5%Giemsa染液染色10min。

1.2.3 N顯帶新滴玻片42烤片1 h。隔日，玻片用4層干凈擦鏡紙（略小于玻片大小）蓋好，置于一干燥培養皿漂于60℃水浴箱水面上，新鮮配制的AgNO3溶液慢慢滴于玻片紙上，直至擦鏡紙呈棕黃色（黑色）為止，輕輕啟開擦鏡紙，將玻片用自來水沖干凈，6%Giemsa染色液染色5 min。發現異染色區、著絲粒和隨體異常時進行C顯帶或N顯帶分析，根據ISCN 2013人類細胞遺傳學國際命名體制進行核型命名。

2　結果

不孕癥和自然流產患者416例病例核型分析，共檢出51例染色體異常核型和2例性腺發育異常病例，異常率為12.26%。

51例染色體異常核型中常染色體結構異常有34例，占66.67%，其中平衡易位25例，占總異常率的49.02%；倒位6例，占總異常率的11.76%，其中9號染色體倒位3例。異染色區多態性例，占總異常率的，其中1 qh+，2例；9 qh+，2例；16 qh+，1例，Yqh+，1例；Yqh-，3例。性染色體結構異常4例，占總異常率的7.84%，其中X染色體臂間倒位2例，X長臂等臂1例；環狀X染色體1例。染色體數目異常4例，占總異常率的7.84%，均為性染色體數目異常，其中46，XXY，2例；46，XYY，1例；1例核型為45，X［17］/46，XX［83］的嵌合體。染色體結構異常核型包括性染色體結構異常共38例占到總異常率的74.5%。

表1　染色體異常分布比例情況

3　討論

染色體異常無論是男方或女方都可能導致不孕癥及流產，不孕癥及流產染色體異常常見得結構異常主要有平衡易位、羅氏易位 、倒位等。染色體數目異常導致不孕癥及流產常見于性染色體數目異常常見類型如：45，X；47，XXY；47，XYY以及一些嵌合型病例。常染色體數目異常導致不孕癥及流產可見于嵌合型染色體核型患者［3］。該文416例患者中共檢出51例異常核型，檢出率為12.26%，與李亞麗等報道檢出率12.6%一致［4］。從檢測結果可以看到結構異常病例包括性染色體異常共38例占到74.5%說明染色體結構是引起流產、不孕癥的主要細胞遺傳學因素，與相關報道結果一致［5］，這是由于染色體結構異常患者在生殖細胞減數分裂過程中染色體聯會時產生異常聯會結構，平衡易位染色體在聯會時可形成4射體能夠產生18種配子，其中只有1種配子核型正常，1種平衡易位攜帶配子，還有16種染色體結構異常配子，這16種異常配子都可導致流產；而倒位核型在聯會時可形成倒位環可產生4種配子其中只有1種配子核型正常。由于染色體結構異常患者產生異常配子幾率較大，所以可能發生不孕和自然流產的概率增大。檢測結果中發現9例異染色區多態性，占到異常的17.6%，異染色區多態性是指在正常人群中超過1%攜帶這類異常，多態性與不孕癥及流產的相關性在業內存在2種不同的觀點，從報道中也可看出［6-8］。該文認為這與染色體檢測的分辨率相關，染色體檢測在320～400條帶階段分辨率在5～10 MB，即染色體檢測是檢測不出小于5 MB變異，甚至一些特殊病例由于缺失或重復的染色體帶紋處于淺帶區，可能超過10 MB的變異也無法檢測出來。所以染色體檢測中發現的異染色區多態性病例中可能一部分存在微小結構異常，需要更進一步進行分子水平的檢測如芯片或高通量測序。隨著技術發展染色體檢測的優勢轉變為檢測分子技術無法檢測的染色體結構異常如倒位和易位。而染色體檢測未發現異常患者又排除其它原因導致的不孕不育患者應建議行分子水平的遺傳學檢測。

綜上所述，染色體核型異常與不孕癥和自然流產密切相關，也是出生異常胎兒的重要原因。對不孕癥及流產患者進行遺傳咨詢和染色體核型分析是必不可少的，而攜帶有染色體多態性的患者需要得到足夠的重視，應建議進行分子水平的檢測。為達到降低出生人口缺陷率優生優育的目標應進行必要的遺傳學咨詢、產前篩查、產前診斷。

［1］石錦平，肖建平，王峻峰，等.276例不良孕產及核型異常患者染色體核型分析［J］.安徽醫藥，2015，19（11）：2142-2144.

［2］左伋主編．醫學遺傳學［M］.6版．北京：人民衛生出版社，2013.

［3］陸小，樊衛民，馮云，等．嵌合型18三體一［J］．中華醫學遺傳學雜志，2006，23（1）：109．

［4］李亞麗，高健，余小平，等．復發性流產與染色體相關性研究［J］．中國婦幼保健，2013，28（22）：3615-3618.

［5］陳美佳，呂福通，黃霈，等．327對自然流產夫婦的染色體核型分析［J］．中華醫學遺傳學雜志，2015，32（1）：132.

［6］秦勝芳，魏萍，曾蘭，等．581例多態染色體的臨床表現綜合性分析［J］．中國優生與遺傳雜志，2014，22（4）：50-53．

［7］王桂玲，任春娥，姜愛芳．染色體多態性qh+與復發性流產關系的探討［J］．中華醫學遺傳學雜志，2015，32（4）：591-592

［8］劉念，閻炯，宋婕萍，等.染色體多態性與復發性流產的關系研究［J］．實用婦產科雜志2015，31（1）：75-77.

Infertility And Spontaneous Abortion Abnormal Karyotype Analysis

GUO Yan-wei1，WEN Li-juan1，ZHAO Xian-jie2，ZHAO Hui-min1
1.Clinical Laboratory，Baogang Hospital，Baotou，Inner Mongolia，014010 China；2 Department of Cardiology，Baogang Hospital，Baotou，Inner Mongolia，014010 China

R711

A

1674-0742（2016）08（c）－0085-03

10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.24.085

2016-05-27）

郭彥偉（1978.1-），男，內蒙古商都人，碩士，主管檢驗師，研究方向：細胞遺傳學。

溫莉娟（1962.7-），女，內蒙古包頭人，本科，副主任技師，研究方向：細胞遺傳學，E-mail：875499399@qq.com。