親水相互作用色譜-串聯質譜法快速測定葡萄酒中四種花青素

夏碧琪， 黃芙珍， 陳祥準， 程 潔， 沈 燕， 韓 超*

(1.溫州出入境檢驗檢疫局，浙江溫州 325027；2.溫州大學化學與材料工程學院,浙江溫州 325035)

花青素是自然界中廣泛存在于植物中的水溶性天然色素，屬于類黃酮化合物，多以糖苷的形式存在，也稱花色苷[1]。紅葡萄酒中的花青素是從紅色或黑色葡萄果皮中浸提出來的，通常以單葡糖糖苷、雙葡萄糖苷和酰基等衍生物的形式存在[2]。藥理學實驗證實，花青素具有抗氧化性、防止DNA損壞、抗癌作用、防止心血管和神經類疾病等功能[3 - 6]。

高效液相色譜具有通用性強、靈敏度高和穩定性好等特點，已在葡萄酒花青素類物質研究中廣泛應用[7]。由于花青素極性很強，在普通反相色譜柱上基本不保留，同時結構相近的花青素具有類似的紫外吸收，導致了在高效液相色譜定量分析上的局限性。親水相互作用色譜(Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography,HILIC) 具有富含多羥基的糖鏈結構的強親水特性，適用于強極性物質的分析[8,9]。本研究建立的HILIC-串聯質譜(MS/MS)法，可用于葡萄酒中矢車菊素-3-O-葡萄糖苷、氯化葡萄糖苷芍藥素、飛燕草素葡萄糖苷和氯化錦葵色素-3-O-葡糖苷4種花青素(結構式見圖1)的定性定量分析。為葡萄酒產品質量監控提供技術支持。該方法前處理簡單、選擇性好、靈敏度高。

圖1 4種花青素的結構式Fig.1 Chemical structure of four anthocyanins

1 實驗部分

1.1 主要儀器

Agilent 1200 高效液相色譜儀(美國，Agilent公司)；API 4000三重四級桿質譜儀(美國，AB應用生物系統公司)；Milli-Q超純水器(美國，Millipore公司)。

1.2 試劑與材料

矢車菊素-3-O-葡萄糖苷氯化物標準品(純度99.4%，CAS No.7084-24-4)購自百……