維生素B1與氯酚紅的分子吸收光譜及應用

江 蔓, 楊 智, 王鳳怡, 江 虹*

(長江師范學院化學化工學院，重慶 408100)

維生素B1(VB1)是人體健康不可缺少的營養物質，也是嬰幼兒配方奶粉中必須添加的營養成分之一。因此，研究奶粉(尤其是嬰幼兒配方奶粉)中VB1含量的檢測方法具有重要意義。目前，VB1的測定方法主要是高效液相色譜法[1 - 3]。此外，還有熒光法[4]、化學發光法[5]和分光光度法[6,7]等的報道。分光光度法操作簡便，儀器價廉，得到廣泛應用，而將分光光度法用于VB1檢測的報道卻較少。

本工作以氯酚紅(CHR)作探針，研究并建立了測定VB1的分光光度法。該方法不僅簡便,而且省時，用于嬰幼兒奶粉和學生奶粉中VB1的測定，結果與國家標準方法基本一致。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

U-3010型紫外-可見分光光度計(日本，日立公司)；pHS-3C精密酸度計(上海虹益儀器儀表有限公司)。

VB1標準溶液：稱取適量VB1，用0.010 mol/L HCl溶解并稀至100 mL，配成濃度為300.8 mg/L的儲備液，冰箱4 ℃保存，用時稀釋10倍。CHR溶液：1.0×10-4mol/L。Tris-HCl緩沖溶液：不同體積0.10 mol/L HCl和0.20 mol/L Tris溶液混合，配成不同pH的緩沖溶液。EDTA溶液：100 g/L。所用試劑均為分析純，實驗用水為二次蒸餾水。

樣品：市售學生奶粉、嬰兒配方奶粉1段。

1.2 實驗方法

于10 mL具塞比色管中，先加入適量的30.08 mg/L VB1標準溶液或者樣品溶液，再依次加入3.0 mL 1.0×10-4mol/L CHR溶液和1.0 mL pH=6.86 Tris-HCl緩沖溶液，用水稀至刻度，搖勻，15 min后，用1 cm比色皿，以試劑空白作參比，在最大正吸收或負吸收波長處測定溶液的吸光度A。

2 結果與討論

圖1 吸收光譜Fig.1 Absorption spectra 1.VB1(3.01 mg/L),against water;2.CHR(3.0×10-5 mol/L),pH=6.86,against water;3-5.VB1(1.50,3.01,4.51 mg/L)-CHR(3.0×10-5 mol/L),pH=6.86,against reagent blank.

2.1 吸收光譜

按實驗方法掃描不同體系的吸收光譜，見圖1。從圖可見，VB1在可見光區幾乎無吸收；CHR在可見光區有較強吸收，最大吸收位于570 nm；……