大蒜素對(duì)蟾蜍離體心臟的作用機(jī)制探討

首都醫(yī)科大學(xué)燕京醫(yī)學(xué)院（101300）王藤 劉子嘉 祖有軒 單石磊 梁翠茵

大蒜素(Allicin)又名大蒜新素，化學(xué)名二烯丙基硫化物(C6H10S3)，是從蒜的球形鱗莖中提取的揮發(fā)性油狀物，是大蒜的主要有效成分。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)大蒜的化學(xué)、藥理和臨床進(jìn)行了多方面的研究，證明大蒜素不僅殺菌力強(qiáng)，抗菌譜廣，且具有抗腫瘤、降膽固醇、抗血小板聚集、護(hù)肝、預(yù)防心血管疾病、降血壓等藥理學(xué)作用。本文利用離體蟾蜍心臟灌流的方法，探討不同濃度大蒜素溶液對(duì)離體蟾蜍心臟收縮力和心率的影響，并初步探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 蟾蜍，雌雄不限，體重50g/只以上，首都醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供，動(dòng)物合格證號(hào)為SCXK（京）2012—0016。

1.1.2 藥品與試劑 大蒜素溶液，中國(guó)食品藥品檢定研究所，批號(hào)為100384-201502；鹽酸腎上腺素，北京市永康藥業(yè)有限公司，批號(hào)為15030241；其他試劑均為分析醇。

1.1.3 儀器 FT-100生物張力換能器、BL-420F+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，均購(gòu)自成都泰盟科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 大蒜素溶液對(duì)蟾蜍離體心臟的作用 按斯氏離體蛙心灌流法制備蟾蜍離體心臟，先用3ml任氏液灌流，待心臟搏動(dòng)穩(wěn)定后，記錄收縮曲線，作為對(duì)照組；再分別用濃度為1.65×10-6、1.65×10-5和1.65×10-4、1.65×10-3、1.65×10-2mol/l的大蒜素溶液對(duì)心臟進(jìn)行灌流，每組取16只蟾蜍，觀察并記錄加藥前后心肌的收縮力和心率的變化情況。

1.2.2 注射用大蒜素溶液對(duì)鹽酸腎上腺素興奮心臟作用的影響 測(cè)試大蒜素溶液對(duì)鹽酸腎上腺素興奮心臟作用的影響分別用濃度為1.52×10-7、1.52×10-6和1.52×10-5、1.52×10-4、1.52×10-3mol/l的鹽酸腎上腺素溶液對(duì)心臟進(jìn)行灌流，得到鹽酸腎上腺素對(duì)蟾蜍心臟收縮的量效關(guān)系曲線，再用1.652×10-3mol/l的大蒜素溶液孵浴15分鐘，重新加入鹽酸腎上腺素溶液，使其終濃度分別為1.52×10-7、1.52×10-6和1.52×10-5、1.52×10-4、1.52×10-3mol/l，記錄心臟收縮曲線的變化。

1.2.3 氯化鈣溶液對(duì)蟾蜍離體心臟的作用 分別用濃度為1×10-6、1×10-5和1×10-4、1×10-3、1×10-2mol/l的氯化鈣溶液對(duì)心臟進(jìn)行灌流，得到氯化鈣對(duì)蟾蜍心臟收縮的量效關(guān)系曲線，再用1.652×10-3mol/l的大蒜素溶液孵浴15分鐘，重新加入氯化鈣溶液，使其終濃度分別為1×10-6、1×10-5和1×10-4、1×10-3、1×10-2mol/l，記錄心臟收縮曲線的變化。

附表1 不同濃度的大蒜素溶液對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力及心率的影響（n=16)

附表2 不同濃度的大蒜素溶液對(duì)鹽酸腎上腺素興奮心臟作用的影響（n=16）

附表3 大蒜素溶液對(duì)氯化鈣興奮心臟作用的影響（n=16）

2 結(jié)果

2.1 大蒜素溶液對(duì)蟾蜍離體心臟的作用 不同濃度的大蒜素溶液可以抑制離體心臟的心肌收縮力和心率，結(jié)果見(jiàn)附表1。隨著大蒜素溶液濃度的增加，蟾蜍心肌收縮力逐漸減弱，對(duì)心肌收縮的抑制率逐漸增大，濃度為1.652×10-2mol/l時(shí)，對(duì)心肌收縮的抑制率達(dá)68.2%，另外，大蒜素溶液可劑量依賴性的抑制心率。

2.2 大蒜素溶液對(duì)鹽酸腎上腺素興奮心臟作用的影響 不同濃度的鹽酸腎上腺素溶液均可增強(qiáng)心臟的心肌收縮力，加快心率。用1.652×10-3mol/l的大蒜素溶液孵浴15分鐘后，重新加入鹽酸腎上腺素，心肌收縮力和心率仍可劑量依賴性增加，但與單獨(dú)加入鹽酸腎上腺素相比心肌收縮力的興奮率減小。結(jié)果見(jiàn)附表2。

2.3 氯化鈣溶液對(duì)蟾蜍離體心臟的作用 不同濃度的氯化鈣溶液可以增強(qiáng)心臟的心肌收縮力，加快心率，用1.652×10-3mol/l的大蒜素溶液孵浴15分鐘后，重新加入氯化鈣溶液，仍可劑量依賴性增強(qiáng)心肌收縮力，加快心率，但與單獨(dú)加入氯化鈣溶液相比心肌收縮力的興奮率劑量依賴性減小。結(jié)果見(jiàn)附表3。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大蒜素溶液在1.652×10-6～1.652×10-2mol/L濃度范圍內(nèi)能使心肌收縮力下降，降低心率，并呈劑量依賴性，這與曹立軍的高濃度大蒜素對(duì)蟾蜍離體心臟的影響結(jié)果一致[1]。當(dāng)用1.652×10-3mol/l的大蒜素溶液孵浴后，重新進(jìn)行鹽酸腎上腺素溶液和氯化鈣溶液的量效曲線測(cè)定，蟾蜍離體心臟心肌收縮力顯著下降，心率減慢，說(shuō)明大蒜素對(duì)蟾蜍離體心臟的心肌收縮力及心率的抑制作用可能與心肌的β受體和抑制心肌細(xì)胞的鈣離子內(nèi)流有關(guān)[2][3]。近年來(lái)的研究表明，大蒜素有明顯的抗心律失常作用，與其抑制Ca2+經(jīng)過(guò)電壓依賴性鈣通道的內(nèi)流有關(guān)，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果研究一致[4-8]。