HSPC238對肝癌細胞中RB基因表達的影響*

袁春雷,譚家余，鐘裕恒,黃　湘△,陳敬林

(南方醫科大學附屬中山博愛醫院:1.檢驗科；2.中心ICU；3.產前診斷中心，廣東中山 528400)

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·論著·

HSPC238對肝癌細胞中RB基因表達的影響*

袁春雷1,譚家余2，鐘裕恒3,黃湘3△,陳敬林3

(南方醫科大學附屬中山博愛醫院:1.檢驗科；2.中心ICU；3.產前診斷中心，廣東中山 528400)

目的觀察HSPC238對肝癌細胞中RB mRNA和pRb蛋白水平的影響。方法將PcDNA3.1-HSPC238質粒和PLL3.7-HSPC238干擾載體分別轉染HepG2細胞，用實時熒光定量PCR的方法檢測RB mRNA的表達量;采用Western blotting法檢測pRb蛋白的表達。結果和對照組相比，轉染高表達HSPC238載體時，HepG2細胞中RB的mRNA水平和pRb表達量也增加；相反地，和對照組相比，轉染低表達HSPC238載體時，HepG2細胞中RB的mRNA水平和pRb蛋白的表達量也減少。以上結果差異均有統計學意義(P<0.05)。 結論在HepG2細胞中HSPC238對RB基因的表達存在正向調控作用。

HSPC238；RB基因；肝癌細胞；HepG2

HSPC238是由LOC51255基因編碼的，含有153個氨基酸的C3HC4型鋅指蛋白。該蛋白于2000年登錄Swiss-Prot數據庫。Brophy在2008年發現，該蛋白具有E3泛素連接酶活性[1]。在此基礎上，本課題組于2011年通過體內外試驗研究發現，HSPC238能夠抑制肝癌細胞的增殖[2]。但迄今為止，對HSPC238的功能認識仍然很少。為了進一步了解HSPC238在肝癌發病機制中的作用，本課題組設計了實時熒光定量PCR試驗和免疫印跡試驗，探討外源性高表達或低表達HSPC238對RB mRNA和RB基因編碼的蛋白pRb的影響。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1細胞和載體HepG2細胞購自南京凱基生物科技發展有限公司。PcDNA3.1-HSPC238重組質粒、PcDNA3.1空質粒、PLL3.7-HSPC238干擾載體和PLL3.7陰性干擾載體均由本實驗室保存。

1.1.2試劑HSPC238、pRB抗體和二抗均購自武漢三鷹生物技術有限公司。引物、組織RNA提取試劑盒均購自美國英杰生命技術有限公司。……