向燕群,范漢恭,袁春雷
(廣東省中山市博愛醫院檢驗科 528400)
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·臨床研究·
2種方法在孕婦產前B族鏈球菌感染檢測中的價值
向燕群,范漢恭,袁春雷
(廣東省中山市博愛醫院檢驗科528400)
目的研究分析熒光PCR及細菌培養法應用于孕婦產前B族鏈球菌感染檢測中的價值。方法隨機選取該院2015年1~12月收治的孕婦126例,同時采集2份生殖道-直腸分泌物,分別為對照組和試驗組,對照組選用細菌培養法,試驗組選用熒光PCR技術,對比記錄2組的陽性準確率,并分析B族鏈球菌對孕婦妊娠結局的作用。結果試驗組準確率為97.4%(38/39),對照組準確率為76.9%(30/39),表現出明顯的優勢,并且陽性組胎膜早破、宮內感染、胎兒窘迫、產后出血、新生兒感染等不良妊娠結局發生率均高于對照組,差異有統計學意義(P<0.05)。結論對于孕婦產前B族鏈球菌感染檢測而言,熒光PCR技術快速、準確,陽性檢出率高,對預防產婦發生不良妊娠結局有積極作用。
B族鏈球菌;熒光PCR;細菌培養法
B族鏈球菌即無乳鏈球菌,是1種常見的革蘭陽性鏈球菌,常存在于直腸與陰道,可引起產婦羊膜腔感染、胎膜早破、胎兒早產、流產等情況。據統計,約10%~30%的孕婦感染B族鏈球菌,其中40%~70%在分娩過程中會傳遞給新生兒[1]。如果新生兒帶了這種菌,大約有1%~3%會出現早期侵入性感染,發生腦膜炎、肺炎、敗血癥,其中有5%會導致死亡[2]。相關研究表明,抗菌藥物的針對使用可有效地預防產婦胎膜早破等不良妊娠結局的發生。本文圍繞熒光PCR及細菌培養法應用于孕婦產前B族鏈球菌感染檢測中的價值展開討論,檢測孕婦產前B族鏈球菌的陽性率,取得了較為滿意的結果,現將結果報道如下。
1.1一般資料隨機選取本院2015年1~12月收治的孕婦126例;年齡22~43歲,平均年齡(28.9±2.4)歲;孕周均大于35周。其中包括96例初產婦,30例經產婦。所有產婦年齡、孕周等一般資料差異無統計學意義(P>0.05)。
1.2儀器與試劑本次研究所用儀器為Light Cycler480ll PCR擴增儀,熒光PCR(B族鏈球菌核酸檢測)試劑盒(廈門泰普生物科技有限公司),VITEK2-Compact全自動細菌分析儀,CO2培養箱。
1.3方法
1.3.1分組方法由本院產科門診醫生對每例產婦同時采集2份生殖道-直腸分泌物,分別為對照組和試驗組,進行B族鏈球菌的情況排查,對照組選用細菌培養法,試驗組選用PCR熒光技術。對存在爭議的結果需對該產婦進行復測,并與其具體臨床癥狀相結合。通過最終確診結果評定2組的準確率,并將產婦分為B族鏈球菌陰性組與B族鏈球菌陽性組,對比2組產婦妊娠結果,統計其胎膜早破發生情況。具體采集方法如下:首先對產婦生殖道內的分泌物進行適當擦拭,再將無菌滌綸拭子放置于生殖道低位1/3處,沿生殖道壁輕輕旋轉取得分泌物標本,在肛門括約肌以上約2~5 cm處沿腸壁輕輕旋轉取得直腸樣本[3-4]。得到標本后,轉移至無菌試管中并即刻送檢。
1.3.2細菌培養法在《全國臨床檢驗操作規程》中的臨床微生物學檢驗常規方法的指導下進行[5]。具體方法如下:將對照組無菌試管中的分泌物接種于血平板表面,并分區劃線,隨后將其培養在35 ℃,濃度5%~10%的CO2培養箱內,時間為24 h,通過鏡檢對血平板上的菌群情況與β溶血狀況進行檢測,進行可疑菌落CAMP初篩試驗,初篩陽性的細菌用VITEK2-Compact全自動細菌分析/藥敏作確證試驗。
1.3.3熒光PCR法根據試劑盒規定提取試驗組分泌物標本中的細菌DNA,在稀釋50倍后制成PCR檢測模板。

2.1對照組與試驗組檢測結果對126例產前孕婦B族鏈球菌陽性率進行檢測,試驗組準確率97.4%(38/39),對照組準確率76.9%(30/39),表現出明顯的優勢,差異有統計學意義(P<0.05),具體見表1。

表1 2組檢測結果對比(n)
2.2陰性組與陽性組不良妊娠結局陽性組胎膜早破、宮內感染、胎兒窘迫、產后出血、新生兒感染等不良妊娠結局發生率均高于對照組,差異有統計學意義(P<0.05),具體見表2。

表2 2組不良妊娠結局對比[n(%)]
B族鏈球菌常寄存于人體下消化道與泌尿生殖道內,通常情況下健康人群感染此菌種沒有致病性。而孕婦作為特殊人群,B族鏈球菌感染會導致不良妊娠結局的發生。因不同產婦的孕周、分泌物采集方法以及檢測方法的不同,國內相關文獻研究妊娠婦女B族鏈球菌的帶菌率存在較大差別,在2.4%~37.5%[6-7]。本研究126例產婦確診B族鏈球菌陽性率30.95%(39/126),在上述范圍內,通常認為B族鏈球菌感染會導致產婦出現胎膜早破現象,B族鏈球菌因此對羊水造成污染,而此時新生兒并沒有娩出,因此,B族鏈球菌可能會通過新生兒的呼吸道侵入體內,從而導致新生兒感染,引發敗血癥。本次研究結果顯示,陽性組胎膜早破、宮內感染、胎兒窘迫、產后出血、新生兒感染等不良妊娠結局發生率均高于對照組,差異具有統計學意義(P<0.05),驗證了B族鏈球菌感染會引發孕婦尤其是產前孕婦的不良妊娠結局。
由于產婦B族鏈球菌感染無明顯的臨床癥狀從而易被忽略,但其不良影響卻需引起注意[8]。因此,對于產前孕婦進行B族鏈球菌感染的檢測至關重要,可通過相關藥物預防與治療改善妊娠結局,使新生兒的健康水平得以提高。細菌培養法陰性預測值和準確度較高,是國內大多數醫院首選的檢測方法[9-10]。但細菌培養陽性率受標本采集、運送、保存和培養等條件影響,會使陽性率有一定變化,加之所需時間較長,難以滿足臨床檢測準確、快速的要求[11]。熒光PCR技術是1種通過體外擴增獲得特定的DNA片段,其優點在于能將極少的DNA片段大幅度增多,且快速、準確,靈敏度較高[12]。本次研究結果顯示,對126例產前孕婦B族鏈球菌陽性率進行檢測,PCR組準確率為97.4%(38/39),細菌培養組準確率為76.9%(30/39),表現出明顯的優勢,差異具有統計學意義(P<0.05),對降低產前孕婦的不良妊娠發生率有重要意義。同時,因細菌培養法需在恒溫條件下培養24 h,而PCR的檢出時間控制在6 h左右,檢測時間的明顯縮短可為治療爭取時間。
綜上所述,對于孕婦產前B族鏈球菌感染檢測而言,熒光PCR技術快速、準確,陽性檢出率高,對預防產婦發生不良妊娠結局有積極作用。
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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.18.042
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1673-4130(2016)18-2612-03
2016-04-14
2016-06-21)