SYSMEX CA-510全自動血凝分析儀性能驗證及評價

盧　昊，樊　軍，王　慶，吳芳潔，楊文祥△

(1.湖北省疾病預防控制中心，武漢 430079；2.湖北省應用毒理學重點實驗室，武漢 430074)

?

·臨床研究·

SYSMEX CA-510全自動血凝分析儀性能驗證及評價

盧昊1,2，樊軍1,2，王慶1,2，吳芳潔1,2，楊文祥1,2△

(1.湖北省疾病預防控制中心，武漢 430079；2.湖北省應用毒理學重點實驗室，武漢 430074)

目的對日本SYSMEX公司CA-510型全自動凝血分析儀進行性能評價。方法按照臨床和實驗室標準化委員會的文件，對該儀器的凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原及凝血活酶時間正確度、精密度、線性及攜帶污染率等項目進行性能驗證。結果該儀器的準確度、精密度、線性范圍、攜帶污染率等性能指標評價良好。結論CA-510分析儀性能良好，可用于標本的檢測。

CA-510；全自動凝血分析儀；性能驗證

CA-510 全自動凝血分析儀是由日本SYSMEX公司推出的1款血凝分析儀器，它的檢測原理是散射光比濁法和百分比終點法，可以測定凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原、凝血酶時間等多項凝血相關指標，具有高效率、大樣本分析能力，可為臨床提供凝血、抗凝、纖溶系統各項指標的分析檢測，測試結果可用于出血與血栓性疾病的診斷、抗凝藥劑量監測及預后分析[1]。

根據美國臨床實驗室改進方案(CLIA′88)和我國國家食品藥品監督管理總局(CFDA)對GLP實驗室的相關要求，實驗室引進新的儀器設備時，必須遵循標準化程序和質量管理的要求建立新的分析系統并定期進行性能評價，以確保儀器的功能良好或產生的試驗數據準確可靠[2-3]。為了保證檢驗結果的準確性，為臨床提供準確、可靠的檢測結果，按照CNAS制訂的《醫學實驗室——質量和能力的專用要求》和衛計委《醫療機構臨床實驗室管理辦法》對醫學實驗室的要求，本研究對CA-510 全自動凝血分析儀的準確性驗證、精密度驗證、項目定標、線性驗證以及血漿樣本攜帶污染率驗證進行了評價，現將評價結果報道如下。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑儀器：采用SYSMEX CA-510全自動血凝分析儀。試劑：凝血酶原時間(Thromborel-S，批號545354)；活化部分凝血活酶時間(Actin-APTT，批號537487)；Calcium Chloride Solution(批號536898)；Thrombin Reagent(批號537985)；Owren′s Veronal Buffer pH7.35(批號527699)；Test Thrombin Reagent(批號525478)；Standard Human Plasma(批號503219A)；Clean I(批號A108A)；Ci-Trol 1(批號548116)；Ci-Trol 1(批號528223A)。

1.2方法

1.2.1檢測項目及方法凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、凝血酶時間均采用凝固法；纖維蛋白原采用Clauss法。

1.2.3精密度驗證[6](1)批內精密度：選取正常參考值范圍內(西門子定值質控血漿1)、異常血漿(西門子定值質控血漿2)各1份，用自動進樣方式分別連續檢測各20次，計算各組數據的均值、標準差和變異系數(CV%)。其中，凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原、凝血酶時間的CV%必須符合CLIA′88規定的允許誤差的1/4。(2)日間精密度：選取正常參考值內(西門子定植質控血漿1)、異常血漿(西門子定植質控血漿2)各1份，分別分裝成6份，凍存于-80 ℃冰箱內。每天取出2個水平的標本各1份，分別測試2次，每天測定2次，共3 d。計算出CV%，其中凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原、凝血酶時間的CV%，必須符合CLIA′88規定允許誤差的1/3。

1.2.4線性驗證[7]選取1份接近預期上限的高值全血樣本(H)，分別按100%、80%、60%、40%、20%、10%的比例進行稀釋，每個稀釋度重復測定2次，計算均值。將實測值與理論值作比較(偏離應小于10%)，計算Y=aX+b，驗證線性范圍。其中a值應在1±0.05范圍內，相關系數r≥0.975，認為符合要求。

1.2.5血漿樣本攜帶污染率[8-9](1)高值標本對低值標本的污染：將低值標本(L)置標本架1、3位置，高值標本(H)置2位置，每例標本分別測定3次，記錄結果：L1、L2、L3、H1、H2、H3、L4、L5、L6。計算：K1%=[L4-Mean(L1、L2、L3)]/Mean(L1、L2、L3)×100%，K1%≤10%判為符合要求。(2)低值標本對高值標本的污染：將高值標本(H)置標本架1、3位置，低值標本(L)置2位置，每例標本分別測定3次，記錄結果：H1、H2、H3、L1、L2、L3、H4、H5、H6。計算：K1%=[H4-Mean(H1、H2、H3)]/Mean(H1、H2、H3)×100%，K1%≤10%判為符合要求。

2　結　　果

2.1準確性凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原和凝血酶時間的檢測數據結果均在質控說明書給定的范圍內，均符合準確性試驗要求。結果見表1。

2.2精密度

2.2.1批內精密度根據NCCLS EP-15A文件，凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原、凝血酶時間的CV%必須符合CLIA′88規定的允許誤差的1/4，即分別為≤3.75%、≤3.75%、≤5.00%、≤6.62%。批內精密度測定結果見表2。

注：-表示無數據。

表2　　CA-510全自動血凝分析儀批內精密度測定結果

2.2.2日間精密度根據NCCLS EP-5A文件，凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原、凝血酶時間的CV%必須符合CLIA′88規定的允許誤差的1/3，即分別為≤5.00%、≤5.00%、≤6.67%、≤8.83%。日間精密度測定結果見表3。

表3　　CA-510全自動血凝分析儀日間精密度測定結果

2.3線性范圍5份不同比例濃度梯度的纖維蛋白原樣本，每份樣本檢測2次，計算均值。檢測結果均值與理論值之間的線性回歸方程為Y=0.954 6X+0.176 8，r=0.993 3。測定結果表明，纖維蛋白原的線性范圍為0.5～4.48 g/L，其中a=0.954 6，r=0.993 3，符合要求。纖維蛋白原線性范圍見圖1。

圖1　　纖維蛋白原線性范圍結果

2.4攜帶污染率選取部分代表項目凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原等指標進行攜帶污染率評價，其中高值對低值的攜帶污染率K1分別為0.00%、4.45%、-3.05%；低值對高值的攜帶污染率K2分別為0.00%、2.13%、-8.49%。結果均低于標準值±10%，符合儀器性能要求。

3　討　　論

在準確性驗證中，本研究采用了西門子公司提供的質控血漿作為標本進行檢測，與給定的靶值進行比較。結果表明，把凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原、凝血酶時間等4項指標的測定值與靶值比較，偏倚均在允許范圍內，表明儀器測定的準確性良好。

在精密度試驗中，為了減少基質效應和標本種類所導致的檢測結果差異，本研究在批內精密度試驗中采用了臨床收集的新鮮血漿作為檢測樣本，而在日間精密度試驗中由于新鮮血漿的穩定性及保存期過短等原因，采用了試劑配套的質控品。研究結果表明，凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原、凝血酶時間等4項指標的批內和日間精密度的變異系數均符合CLIA′88提出的指標質量分析要求，表明儀器具有良好的重復性和穩定性，精密度較小，可以滿足實驗室檢測要求。

在線性范圍試驗中，本研究對纖維蛋白原的線性范圍進行了評價。結果表明，測試項目的線性范圍達到了試劑說明書標示的線性范圍，各濃度的纖維蛋白原測定值和標準值之間有良好的線性關系，且涵蓋了研究對象的測試范圍，證明儀器的線性范圍能夠滿足試驗的需要。

在攜帶污染率試驗中，本研究選取了凝

血酶原時間、活化部分凝血活酶時間及纖維蛋白原3項指標作為評價儀器攜帶污染的代表項目。結果表明，上述3項指標的高濃度樣本對低濃度樣本檢測結果的影響均小于行業標準，證明儀器的自潔系統良好。

本研究通過對CA-510全自動凝血分析儀檢測系統的各項性能的驗證，初步建立了優化適用的CA-510全自動血凝分析系統，該系統具有快速、準確、穩定的檢測特點，儀器性能驗證過程按照CNAS相關文件要求及本實驗室相關標準操作規程進行，符合標準化實驗室的質量管理要求。

[1]張彩寧.CA-510全自動血凝儀的臨床應用[J].臨床醫藥實踐，2011,20(2)：137-138.

[2]Department of Health Human Services,Fina Rule.Clinical laboratory improvement amendments of 1988[S].2003:3704.

[3]賈栗，趙瑞勤，趙君，等．GLP體系下生化分析儀的3Q驗證過程及要點[J]．軍事醫學，2013，37(10)：752-755．

[4]薛萍，江韻琴，方麗．ACL100全自動凝血分析儀PT、APTT實驗室參考區間的確立[J]．西南國防醫藥，2014，24(4)：423-424．

[5]Clinical Laboratory Standards Institute.EP15-A3 User verification of precision and estimation of bias; approved guideline[S/OL].3rd ed.USA:CLSI,2014.

[6]徐益恒，李勁榆，馬各富，等．全自動血凝儀ACL TOP700性能評價[J]．國際檢驗醫學雜志，2013，34(3)：354-356．

[7]徐志勇．檢測系統線性驗證在臨床檢驗工作中的意義[J]．醫學檢驗與臨床，2012，23(4)：47-48．

[8]任靜，張朝明，熊大遷，等．淺談儀器性能驗證中的攜帶污染率的檢測[J]．醫學檢驗與臨床，2013,24(6)：32-33．

[9]馬升俊．Stago STA-R全自動血凝儀性能驗證與評價[J]．國際檢驗醫學雜志，2013，34(1)：91-93．

,E-mail：ywx_21@qq.com。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.18.057

A

1673-4130(2016)18-2642-03

2016-03-14

2016-05-25)