健脾益氣攝血顆粒對脾氣虛型慢性免疫性血小板減少癥淋巴細胞亞群的影響

吳玉霞，黃志惠，袁忠，馬西虎，費飛

（新疆醫科大學附屬中醫醫院，新疆烏魯木齊830011）

·臨床研究·

健脾益氣攝血顆粒對脾氣虛型慢性免疫性血小板減少癥淋巴細胞亞群的影響

吳玉霞，黃志惠，袁忠，馬西虎，費飛

（新疆醫科大學附屬中醫醫院，新疆烏魯木齊830011）

目的探討健脾益氣攝血顆粒對脾氣虛型慢性免疫性血小板減少癥淋巴細胞亞群的影響。方法符合入選病例標準的慢性免疫性血小板減少癥（CITP）門診及住院患者40例，隨機分為健脾益氣攝血聯合強的松治療組、單用強的松為對照組，分別給予健脾益氣攝血配方顆粒聯合強的松及單用強的松治療，各組療程均為21 d，比較2組患者治療前后其外周血CD19+細胞表達及T淋巴細胞亞群變化。結果（1）中醫證候療效比較：治療組及對照組總有效率分別為75%（15/20）、40%（8/20），二組比較差異有統計學意義（P＜0.05）；其中治療組中醫證候療效優于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；（2）CD19﹢B細胞表達比較：對照組患者CD19+CD27+及CD19+CD27-B細胞表達治療前后比較差異無統計學意義（P＞0.05），治療組治療前后及與對照組治療后比較差異有統計學意義（P＜0.05）。其中治療組CD19+細胞比例低于對照組；（3）T細胞亞群變化比較：治療組患者血清CD4+百分率較治療前以及對照組均顯著降低，而CD8+百分率則升高，CD4+/CD8+比例顯著減小（P＜0.05）。結論健脾益氣攝血顆粒能提高脾氣虛型慢性免疫性血小板減少癥中醫癥候臨床療效，對體液免疫及細胞免疫具有調節作用。

原發免疫性血小板減少癥；健脾益氣攝血顆粒；淋巴細胞亞群

〔Abstract〕Objective To investigate the expression of lymphocyte subsets to Jianpi Yiqi Shexue Granule（JYSG）on chronic immune thrombocytopenia（CITP）patients with spleen deficiency syndrome.M ethods The 40 CITP patients with spleen deficiency syndrom were randomly assigned to the treatment group treated with JYSG+prednisone and control group treated with prednision，the course was for 20 days.The expression of CD19+and T-lymphocyte subsets of the two groups were observed before and after treatment.Results（1）TCM syndromes：the effective rate of TCM syndromes in the treatment group and control group was 75%（15/20）and 40%（8/20），respectively，with significant diffiences between the two groups（P＜0.05）.The treatment group were superior to the control group，with statistically significance（P＜0.05）.（2）The expression of CD19+cell：the expression of CD19+CD27+in the observation group has no obvious significance（P＞0.05），the differences between the treatment group and control group before and after treatment were significant（P＜0.05）.And the CD19+cell ratio of the treatment group was lower than the control group.（3）The changes of T-lymphocyte subsets：the CD4+rate in treatment group after treatment was obviously lower than that in the control group（P＜0.05），the precentage of CD8+increased，while CD4+/CD8+ratio reduced.Conclulation JYSG can improve the symptoms of CITP patients with spleen deficiency，and show the regulating effect on cellular immunity and humoral immunity function.

〔Keywords〕immune thrombocytopenia；Jianpi Yiqi Shexue Granule；lymphocyte subsets

免疫性血小板減少癥（immune thrombocytopenia ITP）是臨床常見一種自身免疫性疾病，以出血和血小板減少為主要特征，大約占臨床出血性疾病30%，其主要類型為慢性免疫性血小板減少癥（CITP），多見于成年女性，男女比例為1∶3。現代研究表明，ITP發病與細胞免疫和體液免疫功能紊亂導致血小板破壞過多和生成減少相關，首選治療藥物為腎上腺糖皮質激素，或應用雄性激素（如達那唑）、免疫抑制劑（如長春新堿、環孢素）等單獨或聯合方案，但這些藥物毒性大，具有較多不良反應及較長治療周期，維持時間短，停藥后易復發的特點，且部分藥物因價格昂貴而限制其在臨床中的應用，“紫癜病”為其中醫標準化規范病名［1］。中醫中藥在治療出血性疾病方面，從脾論治積累了大量的經驗［2-3］，取得良好療效。因此本文觀察健脾益氣攝血顆粒對脾氣虛型慢性原發性免疫性血小板減少癥淋巴細胞亞群影響，初步探討從脾論治CITP作用機制。現將研究報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2013年8月-2015年10月新疆醫科大學附屬中醫院血液科符合入選病例標準的CITP門診及住院患者40例。臨床試驗采用隨機對照方法，將受試者隨機分為健脾益氣攝血聯合強的松治療組（20例）、單用強的松（20例）為對照組，各組療程均為21 d。其中男性25例，女性15例，年齡14.5～78歲，平均（49.1±15.0）歲。2組患者性別、年齡及血小板計數情況差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

西醫診斷標準［4］（參照張之南·《血液病診斷及療效標準》第3版）：（1）多次實驗室檢查血小板計數減少；（2）脾臟不增大或僅輕度增大；（3）骨髓檢查巨核細胞增多或正常，有成熟障礙；（4）以下5點中應具備任何一點：A.潑尼松治療有效；B.切脾治療有效；C.PAIgG增多；D.PAC3增多；E.血小板壽命縮短；（5）排除繼發性血小板減少癥。

脾氣虛證候診斷標準［5］參照《中藥新藥臨床研究指導原則》：（1）主癥：慢性出血（反復皮下瘀點或瘀斑，色澤淡；月經過多或經期延長等），伴隨體倦乏力，神疲懶言；（2）次癥：胃納減少或食欲不振，食后腹脹或午后腹脹；（3）舌脈：舌體胖大，邊有齒印，舌淡；脈象細弱。具備主癥2項（第1項必備），次癥1項，結合舌脈可診斷“脾氣虛不統血證”。

納入標準：（1）年齡16～78歲，性別不限；（2）符合CITP診斷標準［4］；（3）符合脾氣虛證候診斷標準［5］（4）血小板計數輕重分級為輕度至重度上限（24×109/L），出血程度為輕度至中度。

排除標準：（1）合并嚴重心、腦、肝、腎疾病；（2）精神病；（3）處于妊娠期或哺乳期患者；（4）合并其他嚴重疾病如嚴重的糖尿病、高血壓并發癥等患者；（5）已知對受試藥物（單味）過敏者。

1.2治療及分組方法

對照組：強的松片（上海上藥信誼藥廠有限公司，5 mg/片，批號017151201），初始劑量按1-1.5 mg/（kg·d），早8點頓服，治療有效后可考慮減量；治療組：在對照組治療基礎上加服健脾益氣攝血配方顆粒（黃芪、黨參、茯苓、白術、阿膠、茜草、炙甘草），每次1袋，每日2次。21 d為一療程，療程結束后評估療效。

1.3觀察指標及檢測方法

1.3.1臨床癥狀觀察和中醫證候療效標準在第1（入組時）、2（治療后1周）、3（治療后2周）、4（治療后3周）次訪視點（以下相同）觀察脾氣虛癥狀與體征積分，臨床癥狀半定量分級記分標準參照《中藥新藥臨床研究指導原則》［5］。根據積分法判定中醫證候療效，積分值（率）=（療前積分一療后積分）/療前積分× 100%。療效標準為：（1）痊愈：癥狀與體征積分值降低≥95%；（2）顯效：癥狀與體征積分值降低≥70%；（3）有效：癥狀與體征積分值降低≥30%；（4）無效：癥狀與體征積分值降低＜30%。

1.3.2血象檢測在第1、2、3、4次訪視點，用全自動血細胞分析儀檢測：白細胞（WBC），紅細胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）。

1.3.3免疫學指標在第1、4次訪視點，采集患者外周血，用流式細胞儀檢測2組CD19+CD27+及CD19+CD27-B細胞表達及T細胞亞群。

1.3.4血小板治療療效標準基于2010年衛生部醫政司發布的《免疫性血小板減少性紫癜臨床路徑》的血小板減少分級標準對患者外周血血小板治療療效進行判定。療效標準：（1）顯效：治療后較治療前降低2級；（2）有效：治療后較治療前降低1級；（3）無效：治療后較治療前無改變或加重。

1.4統計學處理

所有數據采用SPSS 13.0統計軟件進行處理。計數資料比較采用χ2檢驗，兩樣本均數比較采用t檢驗，自身前后比較用配對t檢驗。所有檢驗均以P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.12組患者治療21 d后中醫證候療效比較

2組患者中醫證候療效比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1　2組患者治療后中醫證候療效比較

2.22組患者血小板治療21 d后療效比較

2組患者血小板療效比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2　2組患者血小板治療后療效比較

2.32組患者治療前后CD19+CD27+及CD19+CD27-B細胞表達比較

對照組患者CD19+CD27+及CD19+CD27-B細胞表達治療前后比較差異無統計學意義（P＞0.05），治療組治療前后及與對照組治療后比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3　2組患者治療前后CD19+CD27+及CD19+CD27-B細胞表達比較

2.42組患者血清T細胞亞群的影響比較

經治療，治療組患者血清CD4百分率較治療前以及對照組均顯著降低，而CD8百分率則升高，CD4/ CD8比例顯著減小（P＜0.05）。見表4。

表4　2組患者治療前后血清T細胞亞群比較

3　討論

ITP是一種以單純性血小板減少為特征的獲得性免疫性疾病，目前針對ITP的病因及發病機制尚未完全明確。由于近年來免疫學的快速發展、發現各種抗體表達，有利于更多的淋巴細胞表面標記檢測。有文獻報道用免疫熒光雙標記單克隆抗體及流式細胞術對ITP組及正常對照組外周血淋巴細胞亞群進行測定，發現B淋巴細胞（CD19+）的表達較正常人比較明顯增高，相關進一步分析表明：ITP患者外周血淋巴細胞亞群CD19+的表達與其發病時間及就診時血小板數值呈正相關關系；因此說明體液免疫在ITP發病中起著重要的作用［5］。外周血B細胞可以劃分為2個群，CD19+CD27+細胞和CD19+CD27-細胞，其表達可用來觀察體液免疫情況變化。隨著臨床及實驗研究深入進行，發現ITP的發病機制中除體液免疫外，存在著細胞免疫的作用，大量研究證明，抗原特異性CD4+T細胞輔助、誘導B細胞產生抗血小板抗體的免疫過程，CD8+T細胞有抑制細胞及體液免疫作用，因此CD4+/CD8+T細胞比值是免疫功能狀態重要的檢測指標，有研究表明ITP患者CD4+/CD8+T細胞比值下降，同時CD4'T細胞絕對值數也有不同程度的降低［6-7］，說明細胞免疫參與了ITP的發病，并起著不容忽視的作用［8］。

中醫學認為，脾為后天之本，氣血生化之源，且脾主統血，使血行脈中而不妄行。因此按照中醫學理論，“脾胃為后天之本，氣血生化之源”與“脾統血”，在慢性ITP患者，由于出血反復發作加之病程遷延，氣隨血脫，長期易致氣血不足，氣虛無力不能攝血情況更加嚴重，反復導致惡性循環。故臨床上治療CITP患者，應用健脾法以期益氣以攝血、滋源以生血。其治療以健脾益氣攝血為治則，既能生血又可攝血。

健脾益氣攝血顆粒是由黃芪、黨參、茯苓、白術、阿膠、茜草、炙甘草等組成。其中，黨參、茯苓、白術、甘草為四君子湯之寓意。方中黨參健脾補中氣為君，白術燥濕健脾益氣為臣、茯苓甘淡滲濕為佐，甘草益氣和中調和諸藥為使，是治療脾胃氣虛的基礎方。在CITP患者的臨床表現中，多為下部出血，如雙下肢的紫癜、瘀點瘀斑，月經過多或淋漓不盡，故健脾益氣攝血顆粒方加黃芪益氣升提；阿膠滋陰和血，漢代著名醫家張仲景的《傷寒雜病論》治療便血、尿血及婦人崩漏下血，均使用阿膠，為治療出血之專用藥；茜草具有行血止血之效。縱觀全方，共奏健脾益氣養血止血之效。現代藥理研究表明，黃芪、黨參、白術、阿膠等具有明顯的增強造血功能的作用，能有效地提高血小板水平［9］，健脾中藥具有調節ITP患者外周血T淋巴細胞亞群及調節血小板相關抗體作用［10-12］。

本研究結果顯示：（1）2組患者中醫證候療效及血小板療效比較差異有統計學意義，說明健脾益氣攝血顆粒有助于改善中醫臨床證候及提高血小板水平。（2）對照組患者CD19+CD27+及CD19+CD27-B細胞表達治療前后比較差異無統計學意義（P＞0.05），治療組治療前后及與對照組治療后比較差異有統計學意義（P＜0.05），說明健脾益氣攝血顆粒有助于抑制B淋巴細胞代謝和增殖，具有調節體液免疫功能作用。（3）兩組T細胞亞群的影響表明，治療組患者血清CD4百分率較治療前以及對照組均顯著降低，而CD8百分率則升高，CD4/CD8比例顯著減小（P＜0.05），說明健脾益氣攝血顆粒具有調節CITP患者外周血T淋巴細胞亞群作用。

綜上，健脾益氣攝血顆粒能改善臨床癥狀及提高血小板數量，具有其特有優勢，其作用機制可能是調節體液及細胞免疫功能而發揮作用。

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（本文編輯李杰）

Effect of Jianpi Yiqi Shexue Granule on the Lymphocyte Subpopulation of Chronic Immune Throm bocytopenia Patients w ith Sp leen Deficiency Syndrom e

WU Yuxia，HUANG Zhihui，YUAN Zhong，MA Xihu，FEI Fei
（The TCM Hospital Affiliated to Xinjang Medical University，Urumqi，Xinjiang 830011，China）

R259

B

doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2016.09.017

2016-03-15

國家重點基礎研究發展計劃973項目（2013CB531705）。

吳玉霞，女，碩士，副主任醫師，研究方向：中西醫結合治療血液病；E-mail：wyxymkyz@163.com。