肺腺癌中叉頭框M1與基質金屬蛋白酶-2、-9的表達及意義

肖旭陽　王曉東

(遼寧醫學院附屬第一醫院胸心外科，遼寧　錦州　121000)

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肺腺癌中叉頭框M1與基質金屬蛋白酶-2、-9的表達及意義

肖旭陽王曉東

(遼寧醫學院附屬第一醫院胸心外科，遼寧錦州121000)

目的應用免疫組化方法檢測肺腺癌中叉頭框(FOX)M1和基質金屬蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表達，分析其意義。方法58例行肺腺癌根治手術患者的術后標本作為觀察組，36例正常肺組織作為對照組。采用免疫組化SP法檢測兩組中FOXM1、MMP-2和MMP-9的表達。結果FOXM1、MMP-2和MMP-9在兩組中的表達差別有統計學意義。觀察組中FOXM1、MMP-2和MMP-9的陽性率與腫瘤的淋巴結轉移和淋巴血管浸潤密切相關，FOXM1的陽性率與腫瘤的大小密切相關，MMP-2和MMP-9的陽性率與腫瘤的大小無關，FOXM1、MMP-2和MMP-9的陽性率均與患者的性別和年齡無關。線性相關分析顯示觀察組中FOXM1和MMP-2、FOXM1和MMP-9的表達具有正相關性。結論肺腺癌中FOXM1、MMP-2和MMP-9高表達對促進腫瘤的形成和遷移有重要作用。

肺腺癌；叉頭框(FOX)M1；基質金屬蛋白酶(MMP)-2；MMP-9；免疫組化

肺腺癌臨床常見，可單發或多發，大小不一，常見于周圍型肺癌。近來研究顯示其發病率呈上升趨勢〔1〕。叉頭框(FOX)M1是FOX轉錄因子家族的一員，在腫瘤中的表達常升高，并參與腫瘤的發生和發展〔2,3〕。基質金屬蛋白酶(MMP)-2、-9是MMPs家族的重要成員，二者均為明膠酶〔4〕。腫瘤進展時MMP-2和MMP-9的分泌增多，基底膜溶解破壞，細胞外基質減少或消失，使腫瘤細胞易于離開原發灶形成轉移〔5〕。本文針對肺腺癌術后組織中FOXM1、MMP-2和MMP-9的表達進行檢測，分析臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料2012年1月至2014年12月我院行肺腺癌手術的病例，均經術后病理學證實，并符合IASLC/ATS/ERS國際多學科分類中的標準，共58例，年齡37～83歲，平均(62.1±9.5)歲。距腫物邊緣>3 cm的正常肺組織36例作為對照組，年齡39～80歲，平均(59.7±9.0)歲。兩組一般臨床資料無明顯差異。

1.2FOXM1、MMP-2和MMP-9的檢測方法兩組均行FOXM1、MMP-2和MMP-9蛋白的免疫組化檢測，應用SP法，二氨基聯苯胺(DAB)染色，樣本由同一主管技師操作，按說明書進行，減少誤差。

1.3FOXM1、MMP-2和MMP-9的判斷標準FOXM1、MMP-2和MMP-9著色部位位于細胞質，以染成棕黃色為陽性細胞。選擇腫瘤性上皮細胞或腺上皮細胞集中且染色較為明顯的區域進行觀察，計數3個高倍視野，計算陽性率，取平均值。以<10%定為陰性，以≥10%定為陽性。

1.4統計學方法應用SAS6.12統計軟件進行χ2檢驗或線性相關分析。

2　結　果

2.1兩組中FOXM1、MMP-2和MMP-9陽性率的比較兩組中FOXM1、MMP-2和MMP-9的陽性率差別顯著。見表1。

表1　兩組FOXM1、MMP-2和MMP-9陽性率的比較〔n(%)〕

2.2觀察組中FOXM1、MMP-2和MMP-9在不同臨床特征中的比較觀察組中FOXM1、MMP-2和MMP-9的陽性率與腫瘤的淋巴結轉移和淋巴血管浸潤密切相關，FOXM1的陽性率與腫瘤的大小密切相關，MMP-2和MMP-9的陽性率與腫瘤的大小無關，FOXM1、MMP-2和MMP-9的陽性率均與患者的性別和年齡無關。見表2。

2.3觀察組中FOXM1、MMP-2和MMP-9的相關性FOXM1和MMP-2(r=0.46,P=0.023 4)、FOXM1和MMP-9(r=0.45,P=0.028 6)表達具有正相關性。

表2　觀察組中FOXM1、MMP-2和MMP-9陽性表達在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

3　討　論

流行病學顯示肺腺癌在較多地區的發病率已超過鱗癌，成為最常見的肺癌組織學亞型。腫瘤具有腺樣分化或有黏液產生，表現為腺泡樣、乳頭樣、附壁生長樣，部分表現為具有黏液形成的實性巢，或以上述形式形成混合結構的生長。病變形成中體內基因可以表現異常，尤其是與腫瘤侵襲和轉移相關的基因異常表達時，引起腫瘤的侵襲性生長和轉移〔6〕。FOXM1基因定位于12p13.3，有10個外顯子，翼螺旋狀的DNA結合域位于第三外顯子上，與小鼠的同源性為69%〔7,8〕。研究顯示FOXM1是一個典型的增生相關的轉錄因子，通過對多種基因的轉錄調控，實現G1/S轉換、G2/M轉換，推動有絲分裂的進行，同時調節DNA修復、染色質組裝、蛋白質的合成等過程〔9,10〕。研究認為FOXM1對細胞外基質的重建起重要作用〔11〕，尤其是對MMPs和組織蛋白酶的作用等。細胞外基質與腫瘤細胞之間的關系與腫瘤轉移密切相關，腫瘤浸潤與轉移都要發生基底膜降解，基底膜是上皮與深層基質之間的一道屏障，主要是由Ⅳ型膠原形成的上皮細胞支架〔12,13〕。MMPs是一組結構上具有極大同源性、能夠降解細胞外基質蛋白的內肽酶的總和，因含有金屬離子(鋅、鈣)而得名〔14〕。MMP-2和MMP-9作為家族中明膠酶的重要成員，對細胞外基質的降解能力強〔15〕。研究認為當腫瘤細胞增殖時，MMP-2和MMP-9以酶原形式分泌，不僅能夠在細胞表面活化其他促轉移的細胞因子，而且其還具有廣泛的底物特異性，對轉移的影響增強〔16,17〕。

實驗結果提示FOXM1、MMP-2和MMP-9高表達均為腫瘤惡性轉化的客觀證據。FOXM1高表達可以促進腫瘤的生長，使腫瘤體積增大，這種作用可能與FOXM1具有高增殖作用相關〔18〕。也有研究認為FOXM1的作用可能更趨于多元性，如對腫瘤血管生成因子的正向調節作用，使腫瘤的生長能力增強〔19〕。也有研究認為FOXM1可以對S期激酶相關蛋白(SKP)2蛋白進行調節，并導致P27蛋白泛素化增加，繼而引起細胞增生活性的改變等〔18〕。本文提示FOXM1、MMP-2和MMP-9三種蛋白高表達使腫瘤的淋巴結轉移能力增強，淋巴血管浸潤能力增強，腫瘤的生物學呈明顯的進展狀態。FOXM1對腫瘤侵襲和轉移的作用可能與促進MMP-2和MMP-9高表達相關，此時腫瘤細胞中MMP-2和MMP-9的分泌增加，對基底膜和細胞外基質的降解作用增強，抑制腫瘤轉移的屏障消失或作用下降，使腫瘤細胞易于離開原發灶而播散。也有觀點認為MMP-2和MMP-9可能參與腫瘤相關蛋白的水解級聯反應，或激活其他癌基因和轉移相關基因，共同促進腫瘤生長、侵襲和轉移〔20〕。

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3孔飛飛,姜斌.FOXM1在腫瘤轉移過程中作用的研究進展〔J〕.醫學綜述,2014;20(2):251-3.

4Chou CK,Wu CY,Chen JY,etal.BubR1 acts as a promoter in cellular motility of human oral squamous cancer cells through regulating MMP-2 and MMP-9〔J〕.Int J Mol Sci,2015;16(7):15104-17.

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9劉波,黃世峰,袁虹.FOXM1轉錄因子在人宮頸癌組織中的表達及其臨床意義〔J〕.重慶醫學,2014;43(24):3143-5.

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11孔飛飛,袁海花,王炯軼,等.FOXM1對非小細胞肺癌中MMP-2、MMP-9和遷移侵襲的影響〔J〕.現代腫瘤醫學,2014;22(8):1775-7.

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18陳曉宇.FOXM1在消化系統腫瘤中的研究進展〔J〕.現代腫瘤醫學,2014;22(5):1188-91.

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〔2015-01-23修回〕

(編輯苑云杰)

王曉東(1960-)，男，碩士，主任醫師，主要從事胸部腫瘤診治研究。

肖旭陽(1979-)，男，碩士，主治醫師，主要從事胸部腫瘤診治研究。

R734

A

1005-9202(2016)18-4511-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.053