胃腺癌中基質金屬蛋白酶-19和上皮型黏附素表達特征

周　為　馬新福　戈　銳

(青海大學附屬醫院胃腸腫瘤外科，青海　西寧　810001)

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胃腺癌中基質金屬蛋白酶-19和上皮型黏附素表達特征

周為馬新福戈銳

(青海大學附屬醫院胃腸腫瘤外科，青海西寧810001)

目的觀察胃腺癌中基質金屬蛋白酶(MMP)-19和上皮型黏附素(E-cadherin)的表達特征，分析其臨床價值。方法65例行胃腺癌手術后留取的標本作為研究組，收集距腫物邊緣>3 cm的非腫瘤性胃黏膜組織20例作為對照組，應用免疫組化方法檢測兩組中MMP-19和E-cadherin的表達。結果研究組和對照組中MMP-19和E-cadherin表達的陽性率差異有統計學意義。研究組中MMP-19和E-cadherin表達的陽性率與腫瘤的脈管侵犯和轉移密切相關，MMP-19表達的陽性率與腫瘤最大徑密切相關，二者均與性別、年齡及浸潤深度無明顯相關性。線性相關分析顯示研究組中MMP-19和E-cadherin的表達具有負相關性。結論胃腺癌中MMP-19高表達、E-cadherin低表達可以促進腫瘤的形成和進展。二者具有一定的協同作用，可能對腫瘤的轉移有一定的調節作用。

胃腺癌；基質金屬蛋白酶-19；上皮型黏附素；免疫組化

胃腺癌是胃黏膜起源的上皮源性惡性腫瘤，其轉移的危險高。轉移相關蛋白在腫瘤中常高表達〔1〕。基質金屬蛋白酶(MMP)-19是MMPs家族成員之一，最先在自身免疫性類風濕關節炎中分離出來，隨后在機體多種組織中被陸續發現，其表達的程度不一，MMP-19的生物學功能中表現出具有明顯的降解細胞外基質的作用〔2,3〕。上皮型黏附素(E-cadherin)是細胞間黏附的相關蛋白，正常機體中高表達，對細胞間結構的維持和功能的傳遞有重要作用〔4〕。本實驗分析胃腺癌切除手術后的標本MMP-19和E-cadherin的表達特征。

1　資料與方法

1.1一般資料我院診斷為胃腺癌，并行根治性手術的患者65例作為研究組，均符合WHO中關于胃腺癌的診斷標準，并經病理醫師復審切片證實。其中男34例，女31例；年齡34～86歲，平均(60.7±11.8)歲。選擇上述患者術后標本中距腫物邊緣>3 cm的非腫瘤性胃黏膜組織20例作為對照組，其中男10例，女10例；年齡39～81歲，平均(57.5±8.8)歲。兩組一般臨床資料無明顯差別。

1.2MMP-19和E-cadherin的檢測方法標本均切取2～3 mm厚的組織后行甲醛液固定，石蠟包埋后切片，并應用免疫組SP法檢測MMP-19和E-cadherin的表達，二氨基聯苯胺(DAB)染色。操作嚴格按說明書進行，做好質量控制，努力減少相關的誤差。

1.3MMP-19和E-cadherin結果的判讀MMP-19的陽性著色部位是細胞質，E-cadherin的陽性著色部位是細胞膜，以染成棕黃色(中等強度)-棕褐色(強陽性)為陽性反應的細胞(淡黃色著色不計為陽性)。每張切片選擇上皮細胞集中的區域進行觀察(3個400倍視野)，計算陽性率，取其平均值。以<10%定為陰性，以≥10%定為陽性。

1.4統計學方法應用SPSS統計軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2　結　果

2.1兩組MMP-19和E-cadherin表達陽性率的比較兩組MMP-19和E-cadherin表達陽性率差別顯著。見表1。

表1　兩組MMP-19和E-cadherin表達陽性率比較〔n(%)〕

2.2研究組MMP-19和E-cadherin在不同臨床特征中的陽性表達比較研究組中MMP-19和E-cadherin表達的陽性率與腫瘤脈管侵犯和轉移密切相關，MMP-19表達的陽性率與腫瘤的最大徑密切相關，二者均與性別、年齡及浸潤深度無明顯相關性。見表2。

2.3研究組中MMP-19和E-cadherin的相關性分析MMP-19和E-cadherin的表達具有負相關性(r=-0.47,P=0.041 2)。

表2　研究組中MMP-19和E-cadherin在不同臨床特征中的陽性表達比較〔n(%)〕

3　討　論

流行病學顯示胃癌的發生率正呈下降趨勢，尤其是在一些西方國家。這與飲食、營養方式的改變及早期胃癌檢測方法的進步有關〔5〕。胃腺癌病變形成和進展較快。體內與轉移相關的基因和蛋白表達異常〔6〕。MMPs是由體內多種組織和腫瘤細胞形成的蛋白水解酶，對細胞外基質、基底膜均有較好的降解作用，這使腫瘤轉移的屏障受到破壞，腫瘤細胞易于突破基底膜形成遠隔部位的播散〔7〕。MMP-19是家族中重要成員，又稱為基彈性蛋白酶，可以降解明膠、纖維結合蛋白、聚集蛋白聚糖等〔8〕。MMP-19保留可溶性MMPs家族成員的共同域組織，還包括在催化領域插入一個獨特的半胱氨酸，改變延時動機，同時有一個獨特的插入鉸鏈區和一個C末端尾巴〔9,10〕，因此其可能有特殊作用。Yu等〔11〕通過觀察MMP-19在肺癌中的表達，發現MMP-19基因和蛋白均高表達，且與非小細胞肺癌的預后相關，認為MMP-19過表達能促進上皮和間質的轉化、腫瘤的轉移和浸潤過程，MMP-19可能是一個重要的腫瘤標志蛋白。梁珍麗等〔12〕通過觀察MMP-19在鼻咽癌組織中的表達后，發現MMP-19在鼻咽癌中的表達下調。因此MMP-19在腫瘤中的表達可能不完全一致，其作用可能更趨于多樣性，也可能有腫瘤特異性。E-cadherin是細胞間重要的黏附蛋白，具有維持細胞間連接及信息傳遞的重要作用〔13〕，正常情況下E-cadherin高表達，而在腫瘤性病變和腫瘤進展時E-cadherin表達下降，此時細胞易于與原發灶脫離，出現浸潤性生長和播散。

本實驗結果提示MMP-19高表達、E-cadherin低表達是促進腫瘤形成的重要蛋白。MMP-19高表達顯示出正向的促進腫瘤性生長的作用。有觀點認為MMP-19在病變形成的初始階段可以顯著降低細胞的克隆能力，但是在腫瘤惡性轉變的過程中，MMP-19表達明顯增強，可能通過細胞因子和胰島素樣生長因子信號來調節細胞的黏附和增殖過程〔10〕。這可能是MMP-19的雙重作用，也可能是病變的不同階段起的作用及調節的途徑不同形成的。本文結果提示MMP-19和E-Cadherin二者異常表達可以促進腫瘤的進展和遠處播散。MMP-19高表達可以促進腫瘤的生長。因此MMP-19高表達可能預示著不良的生物學行為〔14〕。本文提示二者具有協同負向作用。MMP-19為細胞外基質降解的重要蛋白，而E-cadherin是調節細胞連接和黏附的，此時細胞連接能力下降，細胞間松動，使腫瘤細胞易于離開原發灶〔15,16〕。同時在細胞外基質溶解使細胞轉移的屏障受到明顯破壞的情況下，腫瘤遠處轉移形成可能〔17,18〕。

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2Fox BP,Kandpal RP.EphB6 receptor significantly alters invasiveness and other phenotypic characteristics of human breast carcinoma cells〔J〕.Oncogene,2009;28(14):1706-13.

3Liu RY,Dong Z,Liu J,etal.Overexpression of asparagine synthetase and matrix metalloproteinase 19 confers cisplatin sensitivity in nasopharyngeal carcinoma cells〔J〕.Mol Cancer Ther,2013;12(10):2157-66.

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10李鵬,朱軍.MMP-19在腫瘤中的研究進展〔J〕.中國當代醫藥,2014;21(5):188-90.

11Yu G,Herazo-Maya JD,Nukui T,etal.Matrix metalloproteinase-19 promotes metastatic behavior in vitro and is associated with increased mortality in non-small cell lung cancer〔J〕.Am J Respir Crit Care Med,2014;190(7):780-90.

12梁珍麗,韋祝新,陳霜,等.基質金屬蛋白酶-19在鼻咽癌組織的表達及臨床意義〔J〕.廣西醫學,2015;37(3):307-9.

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〔2015-01-26修回〕

(編輯苑云杰)

周為(1965-)，男，副主任醫師，主要從事胃腸腫瘤研究。

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1005-9202(2016)18-4513-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.054