胃腺癌中基質金屬蛋白酶-19和上皮型黏附素表達特征

周　為　馬新福　戈　銳

(青海大學附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海　西寧　810001)

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胃腺癌中基質金屬蛋白酶-19和上皮型黏附素表達特征

周為馬新福戈銳

(青海大學附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海西寧810001)

目的觀察胃腺癌中基質金屬蛋白酶(MMP)-19和上皮型黏附素(E-cadherin)的表達特征，分析其臨床價值。方法65例行胃腺癌手術后留取的標本作為研究組，收集距腫物邊緣>3 cm的非腫瘤性胃黏膜組織20例作為對照組，應用免疫組化方法檢測兩組中MMP-19和E-cadherin的表達。結果研究組和對照組中MMP-19和E-cadherin表達的陽性率差異有統(tǒng)計學意義。研究組中MMP-19和E-cadherin表達的陽性率與腫瘤的脈管侵犯和轉移密切相關，MMP-19表達的陽性率與腫瘤最大徑密切相關，二者均與性別、年齡及浸潤深度無明顯相關性。線性相關分析顯示研究組中MMP-19和E-cadherin的表達具有負相關性。結論胃腺癌中MMP-19高表達、E-cadherin低表達可以促進腫瘤的形成和進展。二者具有一定的協(xié)同作用，可能對腫瘤的轉移有一定的調節(jié)作用。

胃腺癌；基質金屬蛋白酶-19；上皮型黏附素；免疫組化

胃腺癌是胃黏膜起源的上皮源性惡性腫瘤，其轉移的危險高。轉移相關蛋白在腫瘤中常高表達〔1〕。基質金屬蛋白酶(MMP)-19是MMPs家族成員之一，最先在自身免疫性類風濕關節(jié)炎中分離出來，隨后在機體多種組織中被陸續(xù)發(fā)現(xiàn)，其表達的程度不一，MMP-19的生物學功能中表現(xiàn)出具有明顯的降解細胞外基質的作用〔2,3〕。上皮型黏附素(E-cadherin)是細胞間黏附的相關蛋白，正常機體中高表達，對細胞間結構的維持和功能的傳遞有重要作用〔4〕。本實驗分析胃腺癌切除手術后的標本MMP-19和E-cadherin的表達特征。

1　資料與方法

1.1一般資料我院診斷為胃腺癌，并行根治性手術的患者65例作為研究組，均符合WHO中關于胃腺癌的診斷標準，并經病理醫(yī)師復審切片證實。其中男34例，女31例；年齡34～86歲，平均(60.7±11.8)歲。選擇上述患者術后標本中距腫物邊緣>3 cm的非腫瘤性胃黏膜組織20例作為對照組，其中男10例，女10例；年齡39～81歲，平均(57.5±8.8)歲。兩組一般臨床資料無明顯差別。

1.2MMP-19和E-cadherin的檢測方法標本均切取2～3 mm厚的組織后行甲醛液固定，石蠟包埋后切片，并應用免疫組SP法檢測MMP-19和E-cadherin的表達，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色。操作嚴格按說明書進行，做好質量控制，努力減少相關的誤差。

1.3MMP-19和E-cadherin結果的判讀MMP-19的陽性著色部位是細胞質，E-cadherin的陽性著色部位是細胞膜，以染成棕黃色(中等強度)-棕褐色(強陽性)為陽性反應的細胞(淡黃色著色不計為陽性)。每張切片選擇上皮細胞集中的區(qū)域進行觀察(3個400倍視野)，計算陽性率，取其平均值。以<10%定為陰性，以≥10%定為陽性。

1.4統(tǒng)計學方法應用SPSS統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2　結　果

2.1兩組MMP-19和E-cadherin表達陽性率的比較兩組MMP-19和E-cadherin表達陽性率差別顯著。見表1。

表1　兩組MMP-19和E-cadherin表達陽性率比較〔n(%)〕

2.2研究組MMP-19和E-cadherin在不同臨床特征中的陽性表達比較研究組中MMP-19和E-cadherin表達的陽性率與腫瘤脈管侵犯和轉移密切相關，MMP-19表達的陽性率與腫瘤的最大徑密切相關，二者均與性別、年齡及浸潤深度無明顯相關性。見表2。

2.3研究組中MMP-19和E-cadherin的相關性分析MMP-19和E-cadherin的表達具有負相關性(r=-0.47,P=0.041 2)。

表2　研究組中MMP-19和E-cadherin在不同臨床特征中的陽性表達比較〔n(%)〕

3　討　論

流行病學顯示胃癌的發(fā)生率正呈下降趨勢，尤其是在一些西方國家。這與飲食、營養(yǎng)方式的改變及早期胃癌檢測方法的進步有關〔5〕。胃腺癌病變形成和進展較快。體內與轉移相關的基因和蛋白表達異常〔6〕。MMPs是由體內多種組織和腫瘤細胞形成的蛋白水解酶，對細胞外基質、基底膜均有較好的降解作用，這使腫瘤轉移的屏障受到破壞，腫瘤細胞易于突破基底膜形成遠隔部位的播散〔7〕。MMP-19是家族中重要成員，又稱為基彈性蛋白酶，可以降解明膠、纖維結合蛋白、聚集蛋白聚糖等〔8〕。MMP-19保留可溶性MMPs家族成員的共同域組織，還包括在催化領域插入一個獨特的半胱氨酸，改變延時動機，同時有一個獨特的插入鉸鏈區(qū)和一個C末端尾巴〔9,10〕，因此其可能有特殊作用。Yu等〔11〕通過觀察MMP-19在肺癌中的表達，發(fā)現(xiàn)MMP-19基因和蛋白均高表達，且與非小細胞肺癌的預后相關，認為MMP-19過表達能促進上皮和間質的轉化、腫瘤的轉移和浸潤過程，MMP-19可能是一個重要的腫瘤標志蛋白。梁珍麗等〔12〕通過觀察MMP-19在鼻咽癌組織中的表達后，發(fā)現(xiàn)MMP-19在鼻咽癌中的表達下調。因此MMP-19在腫瘤中的表達可能不完全一致，其作用可能更趨于多樣性，也可能有腫瘤特異性。E-cadherin是細胞間重要的黏附蛋白，具有維持細胞間連接及信息傳遞的重要作用〔13〕，正常情況下E-cadherin高表達，而在腫瘤性病變和腫瘤進展時E-cadherin表達下降，此時細胞易于與原發(fā)灶脫離，出現(xiàn)浸潤性生長和播散。

本實驗結果提示MMP-19高表達、E-cadherin低表達是促進腫瘤形成的重要蛋白。MMP-19高表達顯示出正向的促進腫瘤性生長的作用。有觀點認為MMP-19在病變形成的初始階段可以顯著降低細胞的克隆能力，但是在腫瘤惡性轉變的過程中，MMP-19表達明顯增強，可能通過細胞因子和胰島素樣生長因子信號來調節(jié)細胞的黏附和增殖過程〔10〕。這可能是MMP-19的雙重作用，也可能是病變的不同階段起的作用及調節(jié)的途徑不同形成的。本文結果提示MMP-19和E-Cadherin二者異常表達可以促進腫瘤的進展和遠處播散。MMP-19高表達可以促進腫瘤的生長。因此MMP-19高表達可能預示著不良的生物學行為〔14〕。本文提示二者具有協(xié)同負向作用。MMP-19為細胞外基質降解的重要蛋白，而E-cadherin是調節(jié)細胞連接和黏附的，此時細胞連接能力下降，細胞間松動，使腫瘤細胞易于離開原發(fā)灶〔15,16〕。同時在細胞外基質溶解使細胞轉移的屏障受到明顯破壞的情況下，腫瘤遠處轉移形成可能〔17,18〕。

1Turanli S,Bozdogan N,Mersin H,etal.The effect of helicobacter pylori on gastric cancer treated with adjuvant chemotherapy after curative resection〔J〕.Indian J Surg,2015;77(6):489-94.

2Fox BP,Kandpal RP.EphB6 receptor significantly alters invasiveness and other phenotypic characteristics of human breast carcinoma cells〔J〕.Oncogene,2009;28(14):1706-13.

3Liu RY,Dong Z,Liu J,etal.Overexpression of asparagine synthetase and matrix metalloproteinase 19 confers cisplatin sensitivity in nasopharyngeal carcinoma cells〔J〕.Mol Cancer Ther,2013;12(10):2157-66.

4Ping FM,Liu GJ,Liu ZJ,etal.Expression of RKIP,E-cadherin and NF-kB p65 in esophageal squamous cell carcinoma and their correlations〔J〕.Int J Clin Exp Pathol,2015;8(9):10164-70.

6潘海邦,王波,楊愛軍,等.胃癌組織中CEACAM6、MMP-9的表達及其與臨床病理的關系〔J〕.第三軍醫(yī)大學學報,2010;32(24):2632-4.

7Chan KC,Ko JM,Lung HL,etal.Catalytic activity of Matrix metalloproteinase-19 is essential for tumor suppressor and anti-angiogenic activities in nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Int J Cancer,2011;129(8):1826-37.

8郭小榮,沈丹華,杜金榮.P73、CD59、MMP-19在上皮性卵巢癌及交界性腫瘤中的表達〔J〕.航空航天醫(yī)藥,2010;21(10):1749-51.

9Delassus GS,Cho H,Eliceiri GL.New signaling pathways from cancer progression modulators to mRNA expression of matrix metalloproteinases in breast cancer cells〔J〕.J Cell Physiol,2011;226(12):3378-84.

10李鵬,朱軍.MMP-19在腫瘤中的研究進展〔J〕.中國當代醫(yī)藥,2014;21(5):188-90.

11Yu G,Herazo-Maya JD,Nukui T,etal.Matrix metalloproteinase-19 promotes metastatic behavior in vitro and is associated with increased mortality in non-small cell lung cancer〔J〕.Am J Respir Crit Care Med,2014;190(7):780-90.

12梁珍麗,韋祝新,陳霜,等.基質金屬蛋白酶-19在鼻咽癌組織的表達及臨床意義〔J〕.廣西醫(yī)學,2015;37(3):307-9.

13Wang X,Zhang W,Lui E,etal.Notch1-Snail1-E-cadherin pathway in metastatic hepatocellular carcinoma〔J〕.Int J Cancer,2012;131(3):E163-72.

14Wang L,Yuan J,Tu Y,etal.Co-expression of MMP-14 and MMP-19 predicts poor survival in human glioma〔J〕.Clin Transl Oncol,2013;15(2):139-45.

15Zhao H,Yang Z,Wang X,etal.Triptolide inhibits ovarian cancer cell invasion by repression of matrix metalloproteinase 7 and 19 and upregulation of E-cadherin〔J〕.Exp Mol Med,2012;44(11):633-41.

16Maiden SL,Petrova YI,Gumbiner BM.Microtubules inhibit E-cadherin adhesive activity by maintaining phosphorylated p120-catenin in a colon carcinoma cell model〔J〕.PLoS One,2016;11(2):e0148574.

17Kim SA,Inamura K,Yamauchi M,etal.Loss of CDH1 (E-cadherin) expression is associated with infiltrative tumour growth and lymph node metastasis〔J〕.Br J Cancer,2016;114(2):199-206.

18Stojnev S,Krstic M,Velickovic LJ,etal.Impact of Ki-67 and E-cadherin expression on lymphovascular invasion in upper urinary tract urothelial carcinoma〔J〕.Vojnosanit Pregl,2015；72(11):982-8.

〔2015-01-26修回〕

(編輯苑云杰)

周為(1965-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事胃腸腫瘤研究。

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A

1005-9202(2016)18-4513-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.054