莊健海,何 嫻,卓雪芽,鄭文標
(廣東省佛山市中醫(yī)院檢驗科 528000)
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·論著·
自制大容量扣式負壓抽提裝置應用于RNA抽提的性能評價*
莊健海,何嫻,卓雪芽,鄭文標
(廣東省佛山市中醫(yī)院檢驗科528000)
目的對自制大容量扣式負壓抽提裝置進行擴增前性能評價。方法采用配套負壓抽提裝置(對照組裝置)和自制大容量扣式負壓抽提裝置(實驗組裝置)對67份白細胞(WBC)大于2.0×109/L的新鮮全血進行核酸(RNA)提取并進行擴增前性能評價,驗證實驗組的工作效率、提取RNA的濃度、純度及完整性。結(jié)果67份RNA標本采用對照組裝置69 min完成抽提,處理效率平均為0.97份/分;實驗組裝置41 min完成抽提,效率為1.63份/分。對照組抽提標本RNA濃度為(248.8±21.4)μg/mL,實驗組為(260.3±21.8)μg/mL。對照組抽提標本OD260/OD280和OD260/OD230分別為(1.995±0.095)和(2.020±0.082),95%CI分別為1.964~2.025和2.001~2.040,實驗組分別為(2.093±0.092)和(2.071±0.120),95%CI分別為2.075~2.113和2.044~2.103;2組比較差異有統(tǒng)計學意義(t=24.570,P<0.001),線性回歸方程Y=0.950X+0.039,R2=0.903。2組裝置提取RNA后完整性均較好,電泳條帶整齊、清晰。結(jié)論自制大容量扣式負壓抽提裝置具有更高的抽提工作效率,且能保證RNA濃度、純度及完整性,更符合實驗室實際情況,具有更優(yōu)的臨床價值。
負壓抽提裝置;核酸;RNA提取
核酸提取是下游檢測、基因分型的起點,是分子生物學最關(guān)鍵的基本方法之一,已經(jīng)廣泛滲透到生物學、遺傳學、醫(yī)學等各個生命領(lǐng)域。抽提所分離的核酸質(zhì)量直接影響后續(xù)的檢測效率及準確性,起著承前啟后的關(guān)鍵作用[1-3]。
本科室日均處理RNA提取標本量大,使用的配套負壓抽提裝置存在壓力易泄漏,不穩(wěn)定,處理工作效率低,容量小等缺陷。為此現(xiàn)研制一款大容量扣式負壓抽提裝置,通過平行使用配套負壓抽提裝置和自制大容量扣式負壓抽提裝置進行擴增前性能評價,比較兩者工作效率、提取RNA的純度及完整性,為自制裝置的使用提供理論依據(jù)。……