3種方法檢測丙型肝炎患者的早期診斷價值

王春瑋

(青海省紅十字醫院檢驗科，西寧 810000)

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·臨床研究·

3種方法檢測丙型肝炎患者的早期診斷價值

王春瑋

(青海省紅十字醫院檢驗科，西寧 810000)

目的探討采用丙型肝炎病毒抗體(HCV-Ab)、丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)、HCV-RNA 3種方法聯合檢測丙型肝炎患者的早期診斷價值。方法收集該院西寧地區203例HCV-Ab陽性患者及5例HCV-Ab陰性HCV-cAg陽性的患者，使用熒光定量PCR法進行HCV-RNA檢測，化學發光法檢測HCV-Ab，ELISA法檢測HCV-cAg。結果203例HCV-Ab陽性患者中HCV-cAg陽性例數為67例、HCV-RNA>1×103U/L 143例；72例HCV-Ag陽性患者中HCV-RNA陽性例數69例，符合率達95.83%，其中5例HCV-Ab陰性HCV-cAg陽性患者中，HCV-RNA陽性3例，符合率達60.00%。結論HCV-cAg、HCV-Ab和 HCV-RNA 3種方法聯合檢測可用于丙型肝炎患者的早期診斷，同時可有效縮短HCV窗口期，降低HCV感染的漏檢率。

丙型肝炎病毒抗體；丙型肝炎病毒核心抗原；HCV-RNA

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)經血液傳播引起的傳染性疾病，是臨床常見的慢性進行性肝病之一[1]。HCV感染的最大特征是慢性化，感染后約10%～15%的患者會發展為肝硬化，2009年報告的發病例數是2001年的10.56倍[2-3]。目前臨床以丙型肝炎病毒抗體(HCV-Ab)檢測為主，但HCV-Ab陽性并不能說明患者攜帶的HCV是否具有傳染性，且HCV感染至HCV-Ab產生有較長的窗口期，單獨HCV-Ab檢測容易漏檢?，F對西寧地區HCV-Ab陽性患者同時進行HCV核心抗原(HCV-cAg)、HCV-RNA不同方法的檢測進行相關性分析。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇2014年1月至2015年4月203例該院檢驗科檢測的西寧地區HCV-Ab陽性的203例患者及HCV-Ab陰性HCV-cAg陽性的5例患者，共208例，平均年齡(47.13±14.88)歲，男81例，平均年齡(49.89±16.01)歲；女127例，平均年齡(45.17±13.78)歲。排除甲、乙、丁、戊型肝炎病毒混合感染，同時排除其他疾病引起的肝臟損壞。

1.2標本采集與保存清晨空腹抽取靜脈血5 mL，立即分離血清(所有標本無黃疸、無溶血)，分為3份：1份即檢HCV-Ab；1份即檢HCV-cAg；1份置EP管中，-80 ℃冰箱保存，進行HCV-RNA檢測。

1.3檢測方法HCV-Ab檢測采用化學發光法，使用上?？迫A生物工程股份有限公司提供的試劑，質控品為北京康徹思坦生物技術有限公司提供的低值、中值質控品，儀器為CHEMCLIN全自動化學發光儀。HCV-cAg檢測采用ELISA法，采用湖南康潤有限公司提供的試劑及配套質控品，所選酶標儀為芬蘭雷勃MK3酶標儀。HCV-RNA檢測采用熒光定量PCR法，應用中山大學達安基因股份有限公司提供的試劑及配套的校準品和質控品。

1.4質量控制HCV-Ab、HCV-cAg、HCV-RNA檢測均嚴格按照實驗室SOP程序文件嚴格執行，HCV-Ab、HCV-RNA的性能驗證符合實驗室ISO15189要求。3個項目的室內質控均在受控范圍之內，達到實驗室質量水平要求。

2　結　　果

2.1HCV-Ab陽性患者HCV-Ag和HCV-RNA檢測結果比較203例HCV-Ab陽性患者中HCV-cAg陽性例數67例，HCV-RNA檢測值大于檢測下限(檢測下限為1×103U/L)的例數143例。見表1。

表1　　203例HCV-Ab陽性患者HCV-Ag和HCV-RNA檢測結果比較

2.272例HCV-cAg陽性患者HCV-RNA檢測結果比較HCV-Ab陽性患者有67例HCV-cAg陽性，5例HCV-Ab陰性但HCV-cAg陽性患者。72例HCV-cAg陽性患者檢測HCV-RNA，檢測值大于1×103U/L為69例，符合率達95.83%。5例HCV-Ab陰性HCV-cAg陽性的患者中，HCV-RNA檢測值大于1×103U/L者3例。見表2。

表2　　72例HCV-cAg陽性患者HCV-RNA檢測結果比較

2.3203例HCV-Ab陽性患者HCV-RNA檢測結果比較203例HCV-Ab陽性患者有143例HCV-RNA檢測值大于1×103U/L。見表3。

表3　　203例HCV-Ab陽性患者HCV-RNA檢測結果比較

3　討　　論

丙型肝炎隱蔽性很強，早期癥狀不明顯，大多數患者最初并不知曉，耽誤早期診斷、早期治療的最佳時機[4]。患者5年以內的治愈率可達70%～90%，5～10年的治愈率為55%～75%，患病10年以上的治愈率將會明顯降低。因此臨床面臨如何采用一個能早期篩查，并縮短窗口期的診斷方法，對初期感染患者做早期診斷及有效治療。

目前臨床常采用檢測HCV-Ab的診斷判斷是否HCV感染，但表2結果表明，208例患者HCV-Ab陰性而HCV-cAg陽性者5例，其中HCV-RNA檢測值大于1×103U/L者3例，所以HCV-Ab陰性并不完全代表無感染。HCV感染后至HCV-Ab產生有6～12周甚至更長的時間，也就是常說的窗口期，且少數免疫功能低下或者異常者產生的抗體少甚至不產生抗體，所以僅通過檢測HCV-Ab而作早期診斷容易造成漏檢[5]。

HCV-cAg是HCV感染者的早期血清標志物，與HCV-RNA同時出現，HCV-cAg的檢測可將HCV檢測的窗口期縮短至15 d，明顯降低HCV感染的漏檢率[6]。有關研究報道，HCV-RNA和HCV-cAg之間具有較好的一致性[7-9]。本研究表2結果顯示，67例HCV-Ab和HCV-cAg陽性患者HCV-RNA >1×103U/L者66例，符合率達98.50%；5例HCV-Ab陰性HCV-cAg陽性患者HCV-RNA >1×103U/L者3例，符合率為60.00%；72例HCV-cAg陽性患者與HCV-RNA的符合率達95.83%。HCV-RNA作為診斷HCV感染的金標準，可表明HCV的復制性，而HCV-RNA低于檢測下限時并不代表無HCV感染。HCV-cAg與HCV-RNA聯合檢測可提高檢出率，同時能更好地反映HCV病毒復制情況。表3數據顯示，隨HCV-RNA濃度降低，HCV-cAg陽性率也逐漸降低(P<0.05)，相關學者報道HCV-cAg檢測可作為評判HCV復制的標志物[4-6]。但HCV-cAg不能取代HCV-RNA檢測，表1結果提示，HCV-Ab陽性患者，HCV-cAg陽性率為33.00%，HCV-RNA陽性率為70.44%，HCV-RNA能夠更敏感、更準確地反映病毒復制水平。

本研究結果表明，203例HCV-Ab陽性患者HCV-RNA>1×103U/L者143例，陽性率達70.44%，72例HCV-Ag陽性患者，HCV-RNA>1×103U/L者69例?？赡苡捎跓晒舛縋CR方法檢測HCV-RNA的影響因素較多，特別是HCV為RNA病毒，容易被RNA酶降解，從而出現假陰性；另外機體內HCV復制呈間斷性，當病毒暫停復制時，HCV-RNA濃度較低，可使檢測結果呈陰性，而HCV-Ab會持續存在一段時間[10-11]。所以，HCV-RNA<1×103U/L不能排除HCV感染及病毒復制。

表3數據顯示，HCV-Ab和HCV-RNA檢測結果比較，HCV-Ab高低與HCV-RNA高低有一定的相關性，HCV-Ab濃度越低，HCV-RNA也越低，甚至低于檢測下限或陰性，HCV-RNA高低與HCV-Ab呈正相關關系(P<0.05)。因此HCV-Ab陽性并不表示不會再感染丙型肝炎，只是代表患者曾經感染或正在感染。HCV-Ab高低能間接反映感染情況，但不是絕對，還需檢測HCV-RNA。HCV-RNA是1個敏感指標，可在感染2個星期內檢測到HCV病毒。

綜述所述，HCV-Ab、HCV-cAg、HCV-RNA 3種檢測方法各有局限性，但HCV-cAg和HCV-RNA作為補充指標，與HCV-Ab聯合檢測，可有效縮短窗口期，降低漏檢率，達到HCV患者早期診斷、早期治療的臨床目標。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.19.047

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