利用剩余試劑進行Sysmex XE5000全自動血液分析儀的性能驗證

劉　麗，李　梅，薛　暄，王　輝，張迎久，孫艷艷

(首都醫科大學石景山教學醫院/北京市石景山醫院檢驗科　100043)

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·臨床研究·

利用剩余試劑進行Sysmex XE5000全自動血液分析儀的性能驗證

劉麗，李梅，薛暄，王輝，張迎久，孫艷艷△

(首都醫科大學石景山教學醫院/北京市石景山醫院檢驗科100043)

目的探討合并剩余試劑進行Sysmex XE5000全自動血液分析儀的性能驗證。方法將Sysmex XE5000儀器的原裝剩余稀釋液、4DL、FFS試劑分別進行合并，利用合并的殘液以國際血液學標準化委員會、美國臨床和實驗室標準協會制定的評價方案為標準進行評價試驗。結果利用剩余試劑進行的儀器性能驗證，全血細胞計數精密度、準確度、正確度、線性范圍良好，攜帶污染率低，2種進樣模式相關性好，實驗室內結果可比性好。結論Sysmex XE5000全自動血液分析儀可對剩余試劑合并再利用，且能保證檢測質量，降低檢測成本。

ISO 15189；全自動血液分析儀；剩余試劑；性能驗證；精密度；攜帶污染率

醫學實驗室ISO15189《醫學實驗室質量和能力的專用要求》指出，申請認可的實驗室應對設備、檢測系統或方法的主要分析性能進行驗證，達到臨床檢測的標準[1]。該院檢驗科使用的Sysmex XE 5000血液分析儀，以半導體激光器的流式細胞計數為基礎[2-3]。現探討利用在效期內合并儀器的剩余試劑，參考國際血液學標準化委員會、美國臨床和實驗室標準協會(CLSI)的相關性能評價文件，以該院健康體檢者、門診患者及住院患者的EDTA-K2抗凝血為研究對象，對Sysmex XE5000血液分析儀進行性能評價實驗[4]。

1　資料與方法

1．1一般資料EDTA-K2抗凝靜脈血標本來自該院健康體檢者、門急診患者、血液科住院患者，標本采集嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程(第3版)》執行[5]。

1．2儀器與試劑日本Sysmex公司生產的XE 5000全自動血液分析儀。所用校準品和質控品均為該儀器的配套產品，試劑全部為原裝試劑，其中稀釋液、4DL、FFS為效期內合并的剩余原裝試劑，合并剩余試劑為同一項目、同一批號試劑，將瓶中剩余試劑每7～8瓶合并為1瓶。輕輕充分混勻，將氣泡小心吸出。所有合并試劑保證正確環境下保存、有效期內使用。

1．3檢測方法[6]按照《WS/T406-2012 臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求》《醫學實驗室質量和能力認可準則》《全國臨床檢驗操作規程》，利用有效期內、正確環境下保存的合并試劑，對Sysmex XE5000進行本底計數驗證、攜帶污染率驗證、批內精密度和日間精密度驗證、線性范圍驗證、正確度驗證、不同吸樣模式的結果可比性、儀器間可比性驗證及精密度驗證。

1.3.1本底計數驗證使用稀釋液作為標本，在血球儀上連續檢測3 次，3 次檢測結果的最大值要求在允許范圍內。

1.3.4日間精密度驗證至少使用正常和異常2個水平的全血質控品，在檢測當天至少進行1次室內質控剔除失控數據后，按批號或月份計算在控數據的變異系數。

1.3.5線性范圍驗證根據CLSI EP6-P文件選取1份高值全血標本(H)，按100%、80%、60%、40%、20%、0%的比例進行稀釋，每個稀釋度重復測定3次，計算均值。均值與理論值作比較(偏離應小于10%)，計算Y=aX+b，驗證線性范圍。若斜率a在1.00±0.05范圍內，相關系數r≥0.975或r2≥0.95。白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)項目滿足要求的線性范圍在廠家說明書規定的范圍內，則線性驗證合格。

1.3.6正確度驗證正確度驗證以偏倚為評價指標，使用20 份檢測結果在參考區間內的新鮮全血，每份標本檢測1次，計算20 次檢測結果的均值，以校準實驗室的定值為標準，計算偏倚。正確度驗證的允許偏倚判定標準CV分別：WBC≤5.00%，RBC≤2.00%，Hb≤2.50%，紅細胞壓積(HCT)≤2.50%，PLT≤6.00%，平均紅細胞體積(MCV)≤3.00%，平均血紅蛋白含量(MCH)≤3.00%，平均血紅蛋白濃度(MCHC)≤3.00%。

1.3.7不同吸樣模式的結果可比性驗證儀器校準后，取5份全血標本，分別使用手動進樣和自動進樣2種不同模式進行檢測，每份標本各檢測2次，計算2種模式下檢測結果均值間的偏差，結果應符合《臨床血液學檢驗常規項目的分析質量要求》，偏差要求分別：WBC≤5.00%，RBC≤2.00%，Hb≤2.00%，HCT≤3.00%，MCV≤3.00%，PLT≤7.00%。

1.3.8儀器間可比性驗證取20份臨床標本，有一定濃度要求，以該科內部規范操作檢測系統(貝克曼LH780 分析儀)為參考儀器，Sysmex XE5000為比對儀器，分別進行檢測，以內部規范操作檢測系統(貝克曼LH780 分析儀)的測定結果為標準，計算相對偏差，WBC、RBC、Hb、PLT、HCT、MCV、MCH、MCHC 結果偏倚符合WS/T406-2012《臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求》中要求的比例(≥80%)。

1.3.9準確度驗證使用5份北京市室間質評物分別進行單次檢測，計算5份標本檢測結果與靶值(室間質評反饋結果)的相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合《臨床血液學檢驗常規項目的分析質量要求》(行業標準)比例(≥80%)。各參數變異系數分別為：WBC 5.00%，RBC 6.00%，Hb 6.00%，HCT 9.00%，PLT 20.00%，MCV 7.00%，MCH 7.00%，MCHC 8.00% 。

2　結　　果

2.1本底計數Sysmex XE5000血液分析儀檢測WBC、RBC、Hb、PLT本底值均為“0”，符合判定標準，驗證合格。

2.2攜帶污染率WBC、RBC、Hb、PLT 的攜帶污染率分別為0.05%、0.15%、0、0.09%， 均小于標準1%，符合判定標準，驗證合格。

2.3批內精密度正常水平全血標本檢測后，WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC 的CV值分別為1.95%、0.42%、0.25%、0.90%、1.02%、0.55%、0.46%、1.08%，均小于判定標準(3.75%、1.50%、1.00%、1.50%、4.00%、1.00%、2.00%、2.00%)，驗證合格。

2.4日間精密度本試驗檢測的中、低2個水平的質控品，其中中值水平的CV值為：WBC 1.08%，RBC 0.57%，Hb 0.52%，HCT 1.10%，PLT 1.70%，MCV 0.94%，MCH 0.84%，MCHC 1.30%；低值水平的CV值為：WBC 1.86%，RBC 0.77%，Hb 0.99%，HCT 1.37%，PLT 3.85%，MCV 0.93%，MCH 1.16%，MCHC 1.17%均小于判定標準。驗證合格。

2.5線性范圍WBC、RBC、Hb、PLT 4項的線性范圍驗證，a值(1.00±0.05)及r(≥0.975)均在判定標準要求范圍內,驗證合格。見表1。

表1　　Sysmex XE5000線性范圍評價結果

2.6正確度以實驗室內部規范操作檢測系統的測定均值為標準，進行本儀器檢測的WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC均值計算偏移。結果WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC的偏移分別為4.73%、1.99%、1.72%、0.45%、1.99%、2.72%、1.05%、2.02%；均小于WS/T406-2012 判定標準，正確度驗證合格。

2.7不同吸樣模式可比性手動進樣模式與自動進樣模式WBC、RBC、Hb、HCT、MCV、PLT的偏差分別為3.94%、0.84%、0.15%、1.03%、0.16%、4.72%，均小于WS/T406-2012判定標準，不同吸樣模式可比性驗證合格。

2.8儀器間可比性Sysmex XE5000分析儀與貝克曼 LH780分析儀的可比性結果，20 份標本的WBC、RBC、Hb、PLT、HCT、MCV、MCH、MCHC 結果偏倚符合率分別為90%、100%、100%、90%、100%、100%、100%、100%，均大于80%，符合WS/T406-2012 判定標準，驗證合格。

2.9準確度使用5份北京市質評物進行單次檢測，計算每份標本檢測結果與靶值(室間質評反饋結果)的相對偏差，WBC、RBC、Hb、PLT、HCT、MCV、MCH、MCHC結果偏差分別為：1號質控物0.5%、2.6%、0、3.3%、0、0.5%、2.9%、3.4%；2號質控物0.4%、2.1%、1.5%、4.9%、0.9%、2.6%、1.0%、3.8%；3號質控物1.0%、3.2%、1.1%、4.1%、1.2%、0.5%、2.4%、3.2%；4號質控物1.1%、1.7%、0.7%、4.9%、2.6%、3.1%、0.7%、4.1%；5號質控物：2.2%、0.8%、1.5%、4.6%、1.4%、3.4%、0.6%、2.9%。均小于WS/T406-2012 判定標準，驗證合格。

3　討　　論

Sysmex XE5000血細胞分析儀是目前臨床廣泛應用的儀器之一，其檢測結果的準確性直接影響臨床對疾病的診斷和治療[8]。但該儀器使用的進口試劑價格昂貴，本研究探討剩余試劑進行儀器方法學驗證，為檢測結果提供溯源性。ISO15189明確要求：分析系統應具有完整性和有效性，實驗室應使用與分析系統相適應的試劑、校準品、質控品和消耗品等，并應提供測定結果的溯源性[9]。近年來原衛生部及各級臨床檢驗中心也一再明確要求保證分析系統有效性。實際工作中由于成本因素，進行剩余試劑的合并使用，但并未進行儀器方法學驗證，缺乏依據，影響系統的完整性、有效性。本研究利用EP15A CLSI標準化文件，對該儀器有效期內、正確保存的合并剩余試劑進行儀器的性能驗證，結果表明，儀器的本底計數、攜帶污染率、批內精密度、日間精密度、線性范圍、正確度、不同吸樣模式可比性、儀器間可比性、準確度均達到WS/T406-2012 判定標準。

本研究結果顯示，Sysmex XE5000全自動血液分析儀可對稀釋液、4DL、FFS的剩余試劑合并再利用，且能保證檢測質量，有效降低檢測成本；同時，根據使用Sysmex XE5000的總結,并且查閱大量文獻，Sysmex XE5000全自動血液細胞分析儀性能良好，具有攜帶污染率低、精密度高、線性范圍寬及結果準確等優點，能夠滿足大、中型醫院的臨床檢測需求[10-11]。

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，E-mail:sjslab@163.com。

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1673-4130(2016)19-2790-02

2016-02-11

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