聯(lián)合臭氧水治療特應(yīng)性皮炎患者的療效及白細(xì)胞介素4、神經(jīng)生長因子檢測

張英博 向亞平 黃進(jìn)華 高麗華 陳美琳 Kathy Wu 李苗苗 陳靜 楊盛波 魯建云410013長沙，中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院皮膚科

聯(lián)合臭氧水治療特應(yīng)性皮炎患者的療效及白細(xì)胞介素4、神經(jīng)生長因子檢測

張英博 向亞平 黃進(jìn)華 高麗華 陳美琳 Kathy Wu 李苗苗 陳靜 楊盛波 魯建云
410013長沙，中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院皮膚科

目的觀察聯(lián)合臭氧水治療特應(yīng)性皮炎（AD）患者的臨床療效和安全性。方法收集6～65歲中重度AD患者，分為試驗(yàn)組和對照組，每組30例。兩組患者均口服左西替利嗪膠囊（5 mg每日1次），外涂他克莫司軟膏，每日2次，同時外涂保濕潤膚霜。試驗(yàn)組加用臭氧水療，每周3～5次。共觀察2周。觀察兩組患者治療前后特應(yīng)性皮炎嚴(yán)重度評分（SCORAD）評分、視覺模擬尺（VAS）瘙癢評分、皮膚病生活質(zhì)量指數(shù)（DLQI）/兒童皮膚病生活質(zhì)量指數(shù)（CDLQI）變化情況，ELISA法檢測患者治療前后外周血白細(xì)胞介素4、神經(jīng)生長因子表達(dá)水平。結(jié)果試驗(yàn)組患者治療前SCORAD評分、VAS評分、DLQI/CDLQI評分分別為42.13±16.03、7.14±2.12、14.92±5.94，治療2周后分別為27.3±11.01、2.23±1.31、9.69±4.17；對照組治療前SCORAD評分、VAS評分、DLQI/CDLQI評分分別為43.36±17.78、6.45±1.29、15.15±5.40，治療2周后分別為39.65±16.67、3.32±0.87、12.84±5.37。兩組3種評分治療前后比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），且治療2周后兩組之間3種評分差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。兩組患者治療后外周血白細(xì)胞介素4和神經(jīng)生長因子水平均下降，與治療前相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），其中試驗(yàn)組白細(xì)胞介素4下降幅度大于對照組（t=8.57，P＜0.05），神經(jīng)生長因子下降幅度兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=9.51，P＞0.05）。結(jié)論聯(lián)合臭氧水能安全、有效地改善AD患者病情，可能與降低患者外周血白細(xì)胞介素4水平有關(guān)。

皮炎，特應(yīng)性；臭氧；白細(xì)胞介素4；神經(jīng)生長因子；治療結(jié)果

特應(yīng)性皮炎（AD）是一種慢性、復(fù)發(fā)性疾病，外用藥物治療主要有糖皮質(zhì)激素、鈣調(diào)磷酸酶抑制劑和抗生素［1］。醫(yī)用臭氧因其對多種微生物的殺菌、抑菌作用對外科及皮膚科各種傷口、皮膚黏膜感染和潰瘍等都有良好的治療作用［2］。因此，我們嘗試用臭氧水聯(lián)合左西替利嗪、他克莫司軟膏治療AD患者，獲得滿意療效，現(xiàn)報告如下。

一、對象與方法

（一）對象：2014年3月至2015年3月在中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院皮膚科門診就診且依據(jù)文獻(xiàn)［3］標(biāo)準(zhǔn)診斷為中重度AD。入選標(biāo)準(zhǔn)：年齡6～65歲，愿意參加本治療且治療前后愿意留取血標(biāo)本者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①已知對臭氧水過敏者；②患有可能干擾治療的其他皮膚病；③伴嚴(yán)重系統(tǒng)性疾病者，孕婦或哺乳期婦女；④就診前2周系統(tǒng)或局部使用糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、抗生素類藥物；⑤治療及隨訪期間用過治療AD的其他藥物或可能影響療效的其他藥物者。AD嚴(yán)重度判斷標(biāo)準(zhǔn)見臨床評分。本研究經(jīng)中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書（未成年人由其監(jiān)護(hù)人簽署）。

共納入60例患者，分為試驗(yàn)組和對照組。試驗(yàn)組年齡（16.50±10.19）歲，男∶女為16∶14，病程（42.13±16.03）個月，對照組年齡（16.10± 9.03）歲，男∶女為19∶11，病程（43.36±17.78）個月，兩組患者的年齡、性別、病程和嚴(yán)重程度比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），具有可比性。

（二）方法：臭氧水療儀為湘雅三醫(yī)院皮膚科專利技術(shù)轉(zhuǎn)化產(chǎn)品，由湖南海贄醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)，型號：HZ2600A，湘食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2013第2260074號。臭氧水濃度為3.5～7.5 mg/L。

1.治療方法：兩組患者均口服左西替利嗪膠囊，每天5 mg，外用他克莫司軟膏（成人用0.1%，兒童用0.03%），每天2次，同時外涂保濕潤膚霜。試驗(yàn)組加用臭氧水療，每周3～5次。共觀察2周。水療方法：臭氧水浸泡四肢皮損，濕敷頭和軀干部皮損，淋浴或浸浴治療全身皮損。在治療前和治療2周后分別抽取兩組患者的靜脈血，離心后-80℃冰箱保存上清液待檢。

2.臨床評分：按照文獻(xiàn)［4］進(jìn)行評估。SCORAD評分=A/5+7B/2+C，其中A為皮損面積；B為皮損嚴(yán)重程度，包括6項(xiàng)指標(biāo)：紅斑、丘疹（或）水腫、滲出（或）結(jié)痂、表皮剝脫、苔蘚化、皮膚干燥（評價未受累皮膚）；C為瘙癢和影響睡眠程度，按最近3晝夜平均分計算，每項(xiàng)評分為0～10分（視覺模擬尺），總分范圍0～103分，0～24分為輕度，25～50分為中度，51～103分為重度。瘙癢程度評分：用10 cm視覺模擬尺（VAS）來評價，無瘙癢計0分，極度瘙癢計10分。生活質(zhì)量評價：成人AD患者用皮膚病學(xué)生活質(zhì)量指數(shù)（dermatology life quality index，DLQI）進(jìn)行評價［5］，治療前后患者獨(dú)立完成量表填寫；AD患兒用兒童皮膚病學(xué)生活質(zhì)量指數(shù)（child′s dermatology life quality index，CDLQI）［6］進(jìn)行評價，由其父母或監(jiān)護(hù)人協(xié)助填寫。

3.外周血白細(xì)胞介素（IL）4和神經(jīng)生長因子（NGF）檢測：ELISA法檢測所有患者治療前后外周血IL?4和NGF水平。外周血IL?4檢測試劑和NGF檢測試劑購自武漢華美生物工程有限公司。

4.統(tǒng)計學(xué)方法：用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用±s表示，組間比較用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，自身對照比較采用配對樣本t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

二、結(jié)果

1.臨床評分情況：與治療前比較，治療后試驗(yàn)組和對照組SCORAD評分、VAS評分和DLQI/CDLQI評分均顯著下降（均P＜0.05），且3種評分在兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。見表1。

2.外周血IL?4和NGF情況：與治療前相比，治療后兩組IL?4和NGF水平均顯著下降（均P＜ 0.05），且試驗(yàn)組IL?4水平低于對照組（P＜0.05），但兩組NGF的表達(dá)水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表1 兩組特應(yīng)性皮炎患者治療前后臨床評分（±s）

表1 兩組特應(yīng)性皮炎患者治療前后臨床評分（±s）

注：t1～t3以及P1～P3均為兩組內(nèi)各指標(biāo)治療前后比較，t4、P4為試驗(yàn)組與對照組之間比較。SCORAD：特應(yīng)性皮炎嚴(yán)重度評分；VAS：視覺模擬尺；DLQI/CDLQI：皮膚病生活質(zhì)量指數(shù)/兒童皮膚病生活質(zhì)量指數(shù)

組別試驗(yàn)組對照組t4值P4值例數(shù)30 30 SCORAD評分VAS評分治療前42.13±16.03 43.36±17.78 6.41 0.815治療后27.3±11.01 39.65±16.67 11.59 0.037 t1值3.06 11.34 P1值0.011 0.034 t2值20.37 9.34 P2值0.041 0.021 t3值10.72 14.76 P3值0.029 0.017----治療前7.14±2.12 6.45±1.29 5.92 0.637治療后2.23±1.31 3.32±0.87 8.25 0.029----DLQI/CDLQI評分治療前14.92±5.94 15.15±5.40 6.95 0.414治療后9.69±4.17 12.84±5.37 9.71 0.024----

表2 兩組特應(yīng)性皮炎患者治療前后白細(xì)胞介素（IL）4、神經(jīng)生長因子（NGF）水平（ng/L，±s）變化

表2 兩組特應(yīng)性皮炎患者治療前后白細(xì)胞介素（IL）4、神經(jīng)生長因子（NGF）水平（ng/L，±s）變化

注：t1以及P1均為兩組內(nèi)治療前后比較，t2、P2為試驗(yàn)組與對照組之間比較

組別試驗(yàn)組對照組t2值P2值例數(shù)30 30 IL?4 NGF治療前0.117±0.028 0.124±0.022 4.36 0.328治療后0.063±0.023 0.090±0.034 8.57 0.011 t1值12.06 6.48 P1值0.025 0.041 t1值13.60 6.83 P1值0.037 0.010----治療前0.048±0.015 0.054±0.013 7.44 0.085治療后0.029±0.010 0.035±0.011 9.51 0.063----

3.不良反應(yīng)：試驗(yàn)組5例出現(xiàn)局部刺激癥狀，3例輕度嗜睡癥狀，對照組3例出現(xiàn)局部刺激癥狀，4例輕度嗜睡癥狀。

三、討論

我們從2009年開始從事臭氧在皮膚科的外用治療研究。由于臭氧氣體在臨床使用不便利，我們嘗試研發(fā)臭氧水生成設(shè)備，將臭氧溶解在水中生成臭氧水濕敷或洗浴治療皮炎濕疹類疾病。洗浴具有清潔皮膚、減少細(xì)菌定植、增加皮膚含水量等作用，有助于AD患者病情的緩解。為尋找一種具有良好的殺菌抑菌作用、顯著止癢、緩解炎癥的適合于局部和全身的洗浴方法，我們設(shè)計本研究觀察臭氧水療聯(lián)合經(jīng)典方法治療中重度AD的療效和安全性，結(jié)果表明，聯(lián)合治療組對AD患者癥狀的緩解作用優(yōu)于單純經(jīng)典治療。DLQI及CDLQI評價顯示臭氧水療有助于改善患者的生活質(zhì)量。尤其是臭氧水療對瘙癢的改善，遏制了AD患者瘙癢?搔抓的惡性循環(huán)，抑制了疾病的惡性發(fā)展，使AD患者生活質(zhì)量有了很大的提高。

臭氧水療對中重度AD患者病情的緩解機(jī)制仍不清楚。本研究中，我們發(fā)現(xiàn)治療后患者外周血細(xì)胞因子IL?4表達(dá)下降，且試驗(yàn)組與對照組比較IL?4下降程度有統(tǒng)計學(xué)差異，因此推測臭氧水療緩解AD的機(jī)制與清潔、殺菌、抑菌作用和降低細(xì)胞因子IL?4表達(dá)有關(guān)。有研究表明，特應(yīng)性皮炎小鼠模型皮損中NGFmRNA含量高于正常小鼠，與皮損嚴(yán)重程度和小鼠搔抓的頻率呈正相關(guān)，且AD病情緩解后NGF表達(dá)也下降［7］。本研究結(jié)果顯示，治療后兩組AD患者NGF表達(dá)均下降，但NGF下降的水平在兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，因此，本研究結(jié)果不足以說明臭氧水療緩解瘙癢的機(jī)制與降低外周血NGF水平有關(guān)，但是否與AD患者皮損中NGF mRNA的表達(dá)水平下降有關(guān)尚需進(jìn)一步研究。

本研究中未發(fā)現(xiàn)對臭氧水療的嚴(yán)重不良反應(yīng)。理論上，臭氧在水中并不穩(wěn)定，易分解為氧氣，對患者應(yīng)該是安全無刺激［8］，這就為臭氧水療在AD的臨床應(yīng)用提供了安全保障。綜上所述，臭氧外用有助于緩解中重度AD患者癥狀，豐富AD的治療手段。

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Combined ozone hydrotherapy for atopic dermatitis:evaluation of efficacy and detection of interleukin?4 and nerve growth factor levels in peripheral blood from patients before and after treatment

Zhang Yingbo,Xiang Yaping,Huang Jinhua,Gao Lihua,Chen Meilin,Kathy Wu,Li Miaomiao,Chen Jing,Yang Shengbo,Lu Jianyun
Department of Dermatology,The Third Xiangya Hospital of Central South University,Changsha 410013,China

ObjectiveTo evaluate the clinical efficacy and safety of combined ozone hydrotherapy for the treatment of atopic dermatitis（AD）.MethodsA total of 60 patients with moderate or severe AD aged from 6 to 65 years were enrolled,and randomly and equally divided into a test group and a control group.Both the two groups were treated with oral levocetirizine capsules 5 mg once a day,topical tacrolimus ointment twice a day,and topical moisturizers.The test group was additionally treated with ozone hydrotherapy 3-5 times every week.The treatment lasted 2 weeks.The severity scoring of atopic dermatitis（SCORAD）score,visual analog scale（VAS）score,dermatology life quality index（DLQI）or children′s dermatology life quality index（CDLQI）score were assessed before and after the treatment,and compared between the two groups.Enzyme?linked immunosorbent assay（ELISA）was performed to measure the levels of interleukin?4（IL?4）and nerve growth factor（NGF）in peripheral blood from the patients before and after the treatment.ResultsAfter 2?week treatment,the SCORAD scores,VAS scores and DLQI/CDLQI scores significantly decreased from 42.13±16.03,7.14±2.12 and 14.92±5.94 before the treatment to 27.3±11.01,2.23±1.31 and 9.69±4.17 respectively in the test group（allP＜0.05）,and from 43.36±17.78,6.45±1.29 and 15.15±5.40 to 39.65±16.67,3.32±0.87 and 12.84±5.37 respectively in the control group（allP＜0.05）.In addition,all the three scores were significantly lower in the test group than in the control group after 2?week treatment（allP＜ 0.05）.A significant decline was also observed in the levels of IL?4 and NGF in peripheral blood in the two groups at the end of the treatment compared with those at baseline（allP＜ 0.05）,and the magnitude of decline in IL?4 levels was significantly higher in the test group than in the control group（t=8.57,P＜ 0.05）,while that in NGF levels was insignificantly different between the two groups（t=9.51,P＞ 0.05）.ConclusionCombined ozone hydrotherapy can effectively and safely improve the condition of patients with AD,likely by decreasing the levels of IL?4 in peripheral blood.

Dermatitis,atopic;Ozone;Interleukin?4;Nerve growth factor；Treatment outcome

Lu Jianyun,Email:1010739024@qq.com

2015?12?10）

（本文編輯：尚淑賢）

魯建云，Email：1010739024@qq.com

10.3760/cma.j.issn.0412?4030.2016.10.016

湖南省自然科學(xué)基金（2015JJ6120）；湖南省衛(wèi)生廳科研基金（B2015?034）

Fund programs:Natural Science Foundation of Hunan Province（2015JJ6120）;Scientific Research Program of Department of Health of Hunan Province（B2015?034）