裴 斐,陶虹伶,蔡麗娟,魏琛琛,袁一鳴,楊文建,胡秋輝
(南京財經大學食品科學與工程學院,江蘇省現代糧食流通與安全協同創新中心,江蘇高校糧油質量安全控制及深加工重點實驗室,江蘇 南京 210023)
響應面試驗優化辣木葉多酚超聲輔助提取工藝及其抗氧化活性
裴斐,陶虹伶,蔡麗娟,魏琛琛,袁一鳴,楊文建,胡秋輝*
(南京財經大學食品科學與工程學院,江蘇省現代糧食流通與安全協同創新中心,江蘇高校糧油質量安全控制及深加工重點實驗室,江蘇 南京 210023)
為研究辣木葉多酚超聲輔助提取工藝,明確辣木葉多酚體外抗氧化活性,選取超聲功率、超聲時間、超聲溫度和料液比為考察指標,研究不同工藝參數對辣木葉多酚提取量的影響,并采用響應面法優化辣木葉多酚提取工藝。此外,研究辣木葉多酚還原力及其對DPPH自由基、超氧陰離子自由基清除能力。結果表明,超聲輔助提取辣木葉多酚最優工藝為:超聲時間19.5 min、料液比1∶30(g/mL)、超聲溫度20.2 ℃、超聲功率250 W。在此條件下,辣木葉多酚提取量為(25.14±0.46) mg/g。辣木葉多酚具有較強的體外抗氧化活性,其還原力、DPPH自由基和超氧陰離子自由基清除能力分別達到同等質量濃度VC的81.25%、94.15%和75.05%。該研究為辣木葉多酚等生物活性成分高效制備與抗氧化劑的深度開發提供理論依據。
辣木葉;多酚;超聲輔助提取;響應面;抗氧化
辣木(Moringa oleifera Lam.)又稱鼓槌樹,為辣木科辣木屬多年生植物,原產于印度西北部喜馬拉雅山南麓,目前廣泛分布在印度、中國、日本等三十多個熱帶及亞熱帶的國家和地區[1]。辣木營養豐富,含有多種蛋白質、維生素和礦物質,其中辣木氨基酸種類較大豆更為全面[2],且VC、VA、鈣、鉀、鐵等含量尤為突出[3-4]。除此之外,辣木還具有抗氧化、降血壓、降血脂、抑菌、減肥等功效[5]。隨著人們對于辣木營養與藥用價值認識的不斷深入,以及對于自身健康和飲食質量日益關注,越來越多的學者開始關注辣木營養與功能成分的綜合開發和利用。
辣木葉多酚是辣木中重要的生物活性成分,據研究報道,辣木葉水提物或醇提物含有槲皮素、山奈酚、綠原酸等多酚類物質,具有顯著的抑菌性、抗炎癥以及免疫調節等活性[6-7]。目前對辣木葉多酚的研究主要集中在提取工藝和功能活性驗證方面,經典的提取方法主要是有機溶劑提取法、索氏提取法,但存在著產品安全性低、耗時長、提取率低等缺點。近年來,超聲波技術因其理想的提取效果備受研究者關注,其優勢在于用超聲波提取多酚可利用其空化效應、機械振動作用、熱效應等造成植物細胞壁的破碎,加快溶劑滲透速率,使有效成分迅速溶解到溶劑里,從而提高了活性成分的浸出率,還能避免一些熱敏性成分由于溫度過高而造成的破壞現象[8]。目前,針對植物多酚的超聲輔助提取技術已有較多報道,如房玉林等[9]研究了石榴皮多酚超聲輔助提取技術,優化并確定了最優提取工藝為料液比1∶20(g/mL)、超聲功率100 W、提取時間20 min。朱德文等[10]研究了超聲輔助提取茶鮮葉中茶多酚提取工藝,證明了與傳統水浴浸提相比,提取得率顯著提高。Wang Wenjie等[11]研究了超聲輔助水果多酚提取工藝,研究證明超聲通過在溶劑系統中分離聚合花色苷顯著提升了水果中單體花青素的提取率。
響應面法是一種應用廣泛的試驗優化方法,它可以有效快速地確定多因子系統的最佳條件,已應用于多種優化實踐中[12-14]。Alessandro等[12]研究了超聲提取野櫻莓多酚工藝,證明了超聲輔助提取工藝是獲得高抗氧化活性野櫻莓多酚的良好提取手段。然而,關于辣木葉多酚的超聲提取工藝及抗氧化活性評價研究較少。研究辣木葉功效成分高效制備提取技術,獲得提取率高、生物活性高的辣木葉多酚具有重要的研究意義。
本實驗以辣木葉超聲輔助提取過程參數超聲功率、超聲時間、超聲溫度和料液比為考察因素,研究不同提取工藝參數對辣木葉多酚提取量的影響,通過響應面法優化辣木葉多酚超聲輔助提取工藝。此外,研究了辣木葉多酚體外抗氧化活性,為辣木葉多酚等生物活性成分高效制備與抗氧化劑的深度開發提供理論依據。
1.1材料與試劑
辣木莖葉,產自云南楚雄州,葉齡45 d,由楚雄宏桂綠色食品有限公司提供,新鮮辣木葉經除雜、清洗、晾曬至半干后,置于熱風烘箱在60 ℃條件下進行干燥,烘干至水分含量6%以下,經粉碎機粉碎后,過80 目篩,密封避光保存于-18 ℃冰箱備用。
沒食子酸標準品 中國藥品生物制品鑒定所;碳酸鈉(分析純) 天津市科密歐化學試劑有限公司;Folin-Ciocalteu試劑(分析純) 上海摩爾生化試驗有限公司;VC、鐵氰化鉀、三氯乙酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉(均為分析純) 國藥集團化學試劑有限公司;3635型96 孔紫外微孔板 美國Corning公司;1,1-二苯基-2-苦肼基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)、Tris、EDTA-Na2美國Sigma公司;乙醇、鹽酸(均為分析純) 南京化學試劑股份有限公司;氯化鐵(分析純) 上海光譜試劑有限公司;鄰苯三酚(分析純)天津市科密歐化學試劑有限公司。
1.2儀器與設備
HH-4數控恒溫水浴鍋 國華電器有限公司;GB204電子分析天平 Mettler Toledo上海有限公司;WF-100型高速萬能粉碎機 北京市永光明醫療儀器廠;101-3A電熱鼓風干燥機 上海蘇進儀器設備有限公司;TU-1810紫外-可見分光光度計 北京普析通用儀器有限責任公司;QTR-3120超聲波清洗機 天津市瑞普電子儀器公司;GL21M高速冷凍離心機 長沙英泰儀器有限公司;i-mark酶標儀 美國Bio-Rad公司。
1.3方法
1.3.1辣木葉多酚含量測定
標準曲線的繪制:采用Folin-Ciocalteus比色法[13]測定辣木葉中多酚類物質的含量。準確稱取0.050 0 g沒食子酸標準品,溶解并轉移到250 mL容量瓶中,用蒸餾水定容、混勻,得到沒食子酸標準液。分別取不同體積(0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 mL)的沒食子酸標準溶液各100 mL,分別加入雙蒸水60 mL、Folin-Ciocalteu試劑3 mL,搖勻后靜置3 min后,再加入3 mL質量分數10%的碳酸鈉溶液,搖勻后在20 ℃水浴條件下反應1 h。最后分別定容至100 mL容量瓶中,在760 nm波長測定吸光度,并以沒食子酸質量濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標繪制標準曲線。通過標準曲線得到方程:Y=65.892X-0.0083,R2=0.994 4。
辣木葉多酚含量測定:準確稱取辣木葉粉樣品2.000 g,按一定料液比加入蒸餾水,常溫浸泡30 min后,采用超聲波法進行提取。浸提液經冷卻后在4 000×g轉速條件下離心,收集上清液,測定其體積。吸取l.0 mL樣品液于100 mL容量瓶中(記錄稀釋因子),加入60 mL蒸餾水,3 mL的Folin-Ciocalteu試劑,搖勻,放置3 min后再加入10%的碳酸鈉溶液3 mL,搖勻,并在20 ℃水浴中反應l h后,用蒸餾水定容至刻度。以空白對照作為參比液,于760 nm波長處測定吸光度,并由標準曲線方程計算多酚含量。辣木葉多酚提取量計算參照陳純等[14]的方法,并略有改動,如公式(1)所示:

式中:c為辣木葉多酚質量濃度/(mg/mL);n為稀釋因子;V為濾液體積/mL;m為樣品質量/g。
前期研究報道表明,在多酚的超聲波輔助提取過程中,多酚提取得率受超聲功率、超聲時間、超聲溫度和料液比提取工藝參數的影響[15]。因此,以多酚提取量為考察指標,分別考察超聲功率(200、250、300、350、400 W)、超聲時間(10、15、20、25、30 min)、超聲溫度(20、30、40、50、60 ℃)和料液比(l∶30、l∶35、l∶40、1∶45、1∶50(g/mL))對辣木葉多酚提取量的影響。
1.3.3響應面試驗設計
根據單因素試驗結果,以超聲功率、超聲時間、超聲溫度和料液比為關鍵工藝參數,設計四因素三水平Box-Behnken響應面試驗,以辣木葉多酚提取量為考察指標,共設計5 個中心點和29 個不同組合的試驗,試驗因素水平設計如表1所示。

表1 響應面試驗的因素與水平Table1 Factors and levels of response surface experiments
1.3.4體外抗氧化實驗
根據響應面法分析確定的辣木葉多酚的最優提取工藝進行辣木葉多酚提取,提取液經D101大孔樹脂進行純化,并通過70%乙醇溶液洗脫后,將乙醇溶劑回收后并冷凍干燥,得到辣木葉多酚凍干粉。將該樣品配制不同質量濃度進行抗氧化活性實驗。
配制質量濃度分別為62.5、125、250、500、1 000、2 000、4 000 μg/mL的辣木葉多酚溶液,對其進行總還原能力、DPPH自由基清除率和超氧陰離子自由基清除率的測定,以VC為陽性對照。
1.3.4.1總還原力測定
參照袁婭等[16]的方法并略作修改,取不同質量濃度的樣品液1.0 mL,加入1.0 mL的磷酸緩沖液(0.2 mol/L,pH 6.6)和1.0 mL 1%鐵氰化鉀溶液,混合均勻后置于50 ℃的水浴鍋中水浴20 min,隨后取出冷卻至室溫,加入1.0 mL 10%的三氯乙酸溶液,室溫放置10 min,再向其中加入1.0 mL蒸餾水及0.2 mL 0.1%的三氯化鐵溶液混勻后反應10 min,使用酶標儀測定其在700 nm波長條件下的吸光度。
1.3.4.2DPPH自由基清除率測定
瀝青混凝土中的集料是可以稱作是它的骨架,集料的質量能夠決定混凝土的整體強度,對混凝土的支撐能力有重要的影響,在集料的質量控制中首先應該保證集料的外形上接近立方體,保證其有良好的穩定性,另外由于細集料和粗集料有不同的用處,例如細集料是為了對粗集料中間的空隙進行填充,因此還應該對集料的體積大小進行嚴格的把控。

表1 DPPH自由基清除實驗加樣表Table1 DPPH sample tablee
參照Vattem等[17]的方法并略作修改,配制0.2 mmol/L DPPH溶液和70%乙醇溶液備用。按表1加入試劑后置于室溫條件下避光反應30 min,測定不同樣品液在517 nm波長處的吸光度,并按公式(2)計算不同質量濃度樣品液及VC溶液對DPPH自由基的清除率。

1.3.4.3超氧陰離子自由基清除率測定
采用鄰苯三酚自氧化法測定超氧陰離子自由基清除能力并參照蓋玉紅[18]和陳晨等[19]的方法。取不同質量濃度待測樣品液1.0 mL,加入1.8 mL的Tris-HCl緩沖液(50 mmol/L,pH 8.2),在25 ℃條件下保溫10 min,再加入100 μL預熱好的0.01 mol/L鄰苯三酚溶液,立即搖勻并在320 nm波長條件下每隔30 s測定1 次吸光度,總時間控制為4 min。用等體積蒸餾水替代樣品液,10 mmol/L的HCl代替鄰苯三酚溶液測定空白值。鄰苯三酚自氧化速率記為A0,可通過吸光度的斜率表示;加入辣木葉多酚樣品后的鄰苯三酚氧化速率記為A1,通過公式(3)可計算出超氧陰離子自由基清除率。

1.4數據分析
數據通過SPSS 18軟件進行分析,ANOVA程序用于方差分析,當P<0.05時表示差異顯著。最小顯著差異法用于數據多重比較分析。數據以3 次獨立樣品測定結果的表示。
2.1單因素試驗結果

圖1 超聲功率(A)、超聲時間(B)、超聲溫度(C)和料液比(D)對辣木葉多酚提取量的影響Fig.1 Effect of ultrasonic power (A), extraction time (B), extraction temperature (C), and solid to liquid ratio (D) on extraction rate of polyphenols from Moringa oleifera Lam. leaves
由圖1A可知,隨著超聲功率的增加,辣木葉多酚提取量呈現先上升再下降的趨勢,并在超聲功率300 W時達到最大。這可能是由于超聲波引起的“空化效應”隨著超聲功率的增加而增加,導致酚類物質滲透速率加快[20]。然而,當微波功率超過300 W后,過高的“空化效應”產生的高壓環境會破壞辣木葉多酚的結構,同時雜質溶出增加,導致辣木葉多酚提取量的下降。
由圖1B可知,超聲時間在10~15 min,多酚提取量顯著上升,在15 min以后辣木葉多酚得率趨于平穩。這可能是由于超聲提取初期,細胞破碎程度迅速增加,使得浸提液中多酚含量不斷增加。當超聲15 min后,辣木葉多酚已基本溶出,因此含量并未發生顯著變化[8]。
由圖1C可知,當超聲溫度上升至30 ℃時,辣木葉多酚提取量顯著上升,但隨著溫度的進一步提升,提取量略有降低但變化并不顯著。這是由于溫度在一定范圍內升高時,多酚物質的溶解度會增加,同時分子之間的粘滯度會有所下降,從而使更多的酚類物質溶出。但溫度過高,會破壞酚類物質結構的完整性[21]。
由圖1D可知,料液比為1∶30~1∶35時,隨著溶劑用量的增加,多酚提取量顯著上升,這是由于質量濃度梯度增加有利于多酚提取物的溶出,但當料液比在1∶35后,辣木葉多酚卻呈現了下降的趨勢。這可能是由于辣木葉在提取過程中溶出了多糖等其他的物質,影響了辣木葉多酚的提取分離,導致多酚提取量的減少。
2.2Box-Behnken試驗設計及結果
根據單因素試驗結果,本研究通過響應面法中的Box-Behnken試驗設計對辣木葉多酚提取工藝進行優化。以辣木葉多酚提取量為響應值,進行四因素三水平Box-Behnken響應面優化試驗。在29 個試驗組合條件下,試驗設計方案及結果如表2所示。

表2 Box-Behnken試驗設計及其響應值Table2 Box-Behnken design matrix and the response value
2.3模型的建立及顯著性分析
基于參數評估,運用Design-Expert V8.05b軟件可得出響應值與被檢變量之間的邏輯關系。對這些試驗數據進行二次多元回歸擬合,獲得響應值與變量之間方程:

為檢驗建立模型的有效性,利用分析軟件進一步對其進行分析,其中辣木葉多酚提取量系數顯著性結果見表3,多元回歸模型的方差分析結果見表4。

表3 辣木葉多酚得率擬合多元二次方程模型的方差分析Table3 Analysis of variance for the fitted quadratic polynomial model of extraction rateo of polyphenols from Moringa oleifera Lam. leaves

表4 多元回歸模型方差分析表Table4 Analysis of variance (ANOVA) for the quadratic polynomial model
由表3可知,方程的一次項中X2、X3對辣木葉多酚提取量的影響極顯著;交互項X1X2、X2X3、X2X4和X3X4對辣木葉多酚提取量的影響極顯著。由此可知,各具體試驗因素對響應值的影響并非是簡單的線性關系。各因素之間均存在顯著的交互作用。由表4可知,回歸模型項極為顯著,響應值的決定系數R2達到0.928 6,說明模型的擬合度良好,表明通過該模型能夠很好地對辣木葉多酚提取量做出預測。調整決定系數達到0.857 3,說明辣木葉多酚提取量模型分別能夠在85.73%的程度上解釋試驗結果,僅有14.27%不能用該模型表示。模型失擬項不顯著(P>0.05),進一步說明此模型的擬合度良好。離散系數表示試驗的精確度[22],本試驗模型離散系數為1.43%,說明模型方程能夠較好地反映真實值。綜上所述,回歸模型擬合程度良好,試驗誤差小,能夠準確的分析和預測辣木葉多酚提取量。
2.4響應面分析


圖2 各因素交互作用對辣木葉多酚提取量影響的響應面圖Fig.2 Response surface plots showing the effects of extraction condition on the extraction rateof polyphenols from Moringa oleifera Lam. leaves
響應面圖是回歸方程的形象描述,能夠直觀反映各個因素與響應值之間的關系以及兩因素間交互作用的類型,然后進一步優化成生產條件[23]。運用Design-Expert軟件所獲得的三維響應面圖,由圖2A可知,當料液比為1∶30(g/mL)時,隨著超聲時間的延長辣木葉多酚提取量不斷上升而后逐漸趨于平穩,當料液比變化到1∶40(g/mL)時,辣木葉多酚提取量呈現先上升再下降的趨勢,這與料液比單因素分析中結果一致,即在較高的溶劑用量條件下,辣木葉提取量出現下滑現象;由圖2B、C可知,當超聲時間一定時,辣木葉多酚提取量隨超聲溫度的升高,呈現先上升后下降的趨勢。而當超聲溫度或超聲功率一定時,辣木葉多酚提取量呈現先上升后趨于平穩的趨勢;圖2D、E與圖2A類似,當料液比為1∶30時,隨著超聲溫度的升高或超聲功率的增加辣木葉多酚提取量不斷上升而后逐漸趨于平穩,當料液比變化到1∶40(g/mL)時,辣木葉多酚提取量隨溫度的升高或超聲功率的增加呈現先上升再下降的趨勢;由圖2F可知,當一個因素值確定后,辣木葉多酚提取量隨另一個因素值的增加而呈現先上升后下降的趨勢。
2.5提取參數優化及模型驗證
運用Design-Expert軟件求出被檢變量的最優值。即最優提取工藝為超聲時間19.5 min、料液比1∶30(g/mL)、超聲溫度20.2 ℃、超聲功率250 W,此時辣木葉多酚提取量為25.60 mg/g。在此條件下,通過超聲輔助提取法提取辣木葉多酚,3 次平行實驗得出辣木葉多酚實際提取量為(25.14±0.46)mg/g,與理論值非常接近。因此,該多元二次回歸方程能夠準確對超聲輔助提取辣木葉多酚提取量預測。在與超聲輔助提取最優條件相同的溫度(20.2 ℃)、料液比(1∶30)和時間(19.5 min)條件下,對辣木葉多酚采用傳統水浴浸提法進行提取,3 次平行實驗得出辣木葉多酚提取量僅為(12.33±0.84)mg/g。因此,與傳統提取方法相比,通過本實驗優化的超聲輔助提取工藝對辣木葉多酚進行提取,其提取量能夠提高1 倍以上。
2.6體外抗氧化活性測定結果

圖3 辣木葉多酚的還原力(A)、DPPH自由基清除率(B)和超氧陰離子自由基清除率(C)測定結果Fig.3 The reducing power (A), the DPPH radical scavenging activities (B)and the· scavenging effect (C) of polyphenols from Moringa oleifera Lam. leaves
由圖3 A可知,在辣木葉多酚質量質量濃度62.5~4 000 μg/mL的范圍內,辣木葉多酚的還原力隨著多酚質量質量濃度增加而增加,當多酚質量質量濃度處于最高點(4 000 μg/mL時),還原力(1.82±0.05)達到了同等質量濃度VC還原力(2.24±0.02)的81.25%,證明了辣木葉多酚具有良好的還原力。
由圖3B可知,不同質量濃度的辣木葉多酚具有一定的DPPH自由基清除能力,半數清除質量濃度(EC50)為159.75 μg/mL。其中當質量濃度在62.5~500 μg/mL范圍內,DPPH自由基清除能力迅速上升,在辣木葉多酚質量質量濃度達到500 μg/mL時,DPPH自由基清除率高達(89.78±2.59)%,達到同等質量濃度VC的DPPH自由基清除率((95.36±0.72)%)的94.15%。當辣木葉多酚質量質量濃度高于500 μg/mL時,DPPH自由基清除率趨于平穩。
超氧陰離子自由基是反應性氧中間物的一種,其與羥基結合后的產物會對細胞DNA造成一定程度的損壞。因此,清除超氧陰離子自由基在抗氧化過程中起著重要的作用。由圖3C可知,辣木葉多酚的超氧陰離子自由基EC50值為79.05 μg/mL。隨著辣木葉多酚質量質量濃度的升高,超氧陰離子自由基清除率升高,并在質量濃度達到1 000 μg/mL后趨于平穩,在此質量濃度條件下,辣木葉多酚的超氧陰離子自由基清除率高達(74.92±2.68)%,是同質量濃度VC超氧陰離子自由基清除率((99.83±0.01)%)的75.05%。
通過辣木葉多酚的體外抗氧化實驗,證明了辣木葉多酚具有較強還原力、DPPH自由基清除能力和超氧陰離子自由基清除能力,是一種潛在的抗氧化劑。
在單因素試驗的基礎上,通過Box-Behnken響應面試驗設計,優化得到了辣木葉多酚超聲輔助提取最優工藝參數為超聲時間19.5 min、料液比1∶30(g/mL)、超聲溫度20.2 ℃、超聲功率250 W。在此條件下驗證實驗,辣木葉多酚提取量達到(25.14±0.46)mg/g,證明應用響應面法優化超聲輔助提取辣木葉多酚是準確可行的。此外,通過體外抗氧化實驗充分證明了辣木葉多酚具有較強的抗氧化活性,其還原力、DPPH自由基清除能力和超氧陰離子自由基清除能力分別達到同等質量濃度VC的81.25%、94.15%和 75.05%。該研究為辣木葉多酚進一步工業化生產以及辣木活性成分抗氧化劑的深度開發提供理論依據。
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Optimization of Polyphenols from Moringa oleifera Lam. Leaves by Ultrasound-assisted Extraction Using Response Surface Methodology and Their Antioxidant Activities
PEI Fei, TAO Hongling, CAI Lijuan, WEI Chenchen, YUAN Yiming, YANG Wenjian, HU Qiuhui*
(Collaborative Innovation Center for Modern Grain Circulation and Safety, Key Laboratory of Grains and Oils Quality Control and Processing, College of Food Science and Engineering, Nanjing University of Finance and Economics, Nanjing 210023, China)
In order to obtain the best ultrasound-assistedextracting conditions for polyphenols from Moringa oleifera Lam. leaves, and clarified their antioxidant activities. Response surface methodology was used to explore the effects of ultrasonic power, extraction time, extraction temperature, and solid to liquid ratio on extraction rate. Moreover, the reducing power, the DPPH radical scavenging activities and the· scavenging effect of polyphenols from Moringa oleifera Lam. leaves were also investigated. The results showed that the best extraction condition were as follows: the extraction time of 19.5 min, the solid to liquid ratio of 1:30 (g/mL), the extraction temperature of 20.2 ℃, and the ultrasonic power of 250 W. Under the optimal extractions, the extraction rate of phycoerythrin was (25.14 ± 0.46) mg/g. In addition, the polyphenols from Moringa oleifera Lam. leaves. have strong anti-oxidative, and the reducing power, the DPPH radical scavenging activities and the· scavenging effect were 81.25%, 94.15% and 75.05% of L-ascorbic acid, respectively. This research could provide the theoretical basis for higher preparation and antioxidants development of Moringa oleifera Lam. leaves.
Moringa oleifera Lam.; polyphenols; ultrasound-assisted extraction; response surface methodology; antioxidant activities
10.7506/spkx1002-6630-201620005
TS210.4
A
1002-6630(2016)18-0024-07
裴斐, 陶虹伶, 蔡麗娟, 等. 響應面試驗優化辣木葉多酚超聲輔助提取工藝及其抗氧化活性[J]. 食品科學, 2016, 37(20):24-30. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201620005. http://www.spkx.net.cn
PEI Fei, TAO Hongling, CAI Lijuan, et al. Optimization of polyphenols from Moringa oleifera Lam. leaves by ultrasoundassisted extraction using response surface methodology and their antioxidant activities[J]. Food Science, 2016, 37(20):24-30. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201620005. http://www.spkx.net.cn
2016-05-15
江蘇高校優勢學科建設工程資助項目(PAPD)
裴斐(1987—),男,講師,博士,研究方向為農產品加工及儲藏工程。E-mail:feipei87@163.com
胡秋輝(1962—),男,教授,博士,研究方向為食品營養與化學。E-mail:qiuhuihu@njue.edu.cn