兩種培養(yǎng)基對污染性啤酒野生酵母培養(yǎng)效果的比較

◎文天壽，曾 園，付良姬，秦 卓（燕京啤酒（玉林）有限公司，廣西 玉林 537000）

兩種培養(yǎng)基對污染性啤酒野生酵母培養(yǎng)效果的比較

◎文天壽，曾 園，付良姬，秦 卓
（燕京啤酒（玉林）有限公司，廣西 玉林 537000）

使用2種不同的培養(yǎng)基來檢測4種污染性啤酒野生酵母，考察2種培養(yǎng)基的培養(yǎng)效果，以期找到更合適啤酒廠日常測酵母菌用培養(yǎng)基，結(jié)果發(fā)現(xiàn)2種培養(yǎng)基在培養(yǎng)污染性啤酒野生酵母的效果上未存在明顯的差異，但是從經(jīng)濟成本和方便性考慮，WA培養(yǎng)基更適合啤酒廠日常檢測。

啤酒；野生酵母；培養(yǎng)基；檢測

野生酵母是指啤酒廠中除培養(yǎng)酵母以外的所有酵母。野生酵母的種類繁多，性狀各異，對啤酒生產(chǎn)的危害較大。啤酒廠常見的野生酵母種類包括酵母屬（Saccharomyces），如克氏酵司（Kloeckera）、漢遜氏酵母（Hansenula）、假絲酵母（Candida）、圓酵母（Torulopsis）、紅酵母（Rhodotorula）、酒香酵母（Brettanomyces）和畢赤氏酵母（Pichia）等。目前，燕京啤酒（玉林）有限公司已鑒定出的污染性野生酵母有4種：釀酒酵母（非本廠使用酵母）、假絲酵母、膠紅酵母及畢赤酵母。

根據(jù)GB4789.15-2010推薦的培養(yǎng)基，現(xiàn)選用選用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基和麥汁瓊脂培養(yǎng)基分別檢測4種野生酵母及燕京啤酒酵母，考察這兩種培養(yǎng)基的培養(yǎng)效果，以期找到培養(yǎng)效果好、經(jīng)濟實惠的培養(yǎng)基，用來做啤酒廠日常檢查酵母菌用。

1　材料和方法

1.1主要材料

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA），北京陸橋科技有限責任公司；麥汁瓊脂培養(yǎng)基（WA），10oP麥汁，2%瓊脂。菌種：野生酵母（日常檢測出）。

1.2儀器和設備

超凈工作臺，西班牙STERIL，POLARIS/SQF-D；恒溫培養(yǎng)箱，韶關市泰宏醫(yī)療器械有限公司，LRH-250A。

1.3試驗方法

試驗方法如下：（1）9.0 mL 0.85%的無菌生理鹽水試管6支，1.0 mL無菌一次性槍頭1盒，1.0 mL移液槍1支，無菌涂布棒12支，接種針1只，酒精燈1盞。

（2）用接種針挑取野生酵母菌落，放進9.0 mL的無菌鹽水試管內(nèi)，在接近液面的試管壁上，用接種針將菌落展開，然后放在振蕩器上震蕩，使菌落細胞近可能均質(zhì)，然后用該只試管作為原菌液，按表1進行稀釋及涂布試驗。

（3）每個稀釋梯度涂布2個平皿，每個平皿取0.2 mL菌液，用一次性無菌涂布棒涂布，然后置于同一個培養(yǎng)箱，27 ℃培養(yǎng)72 h。

（4）同樣的試驗方法，分別取釀酒酵母（非本廠使用酵母）、假絲酵母、膠紅酵母及畢赤酵母進行試驗。

表1　菌落稀釋和涂布情況表

2　試驗結(jié)果

27 ℃培養(yǎng)72 h，2種培養(yǎng)基培養(yǎng)相同菌落的對比結(jié)果如下。

釀酒酵母（非本廠使用酵母）：①PDA培養(yǎng)基，10-1時 192，10-2時31，10-3時7，10-4時1，10-5時0；②WA培養(yǎng)基，10-1時195，10-2時29，10-3時8，10-4時0，10-5時0。

假絲酵母：①PDA培養(yǎng)基，10-1時210，10-2時45，10-3時11，10-4時2，10-5時0；②WA培養(yǎng)基：10-1時214，10-2時41，10-3時13，10-4時3，10-5時0。

膠紅酵母：①PDA培養(yǎng)基，10-1時236，10-2時46，10-3時14，10-4時3，10-5時0；②WA培養(yǎng)基，10-1時231，10-2時48，10-3時16，10-4時4，10-5時0。

畢赤酵母：①PDA培養(yǎng)基，10-1時186，10-2時47，10-3時16，10-4時5，10-5時0；②WA培養(yǎng)基，10-1時188，10-2時50，10-3時17，10-4時4，10-5時0。

3　討論

從數(shù)據(jù)結(jié)果不難看出，2種培養(yǎng)基培養(yǎng)污染性啤酒野生酵母未存在明顯的差異，都合適用于啤酒廠用來檢測啤酒野生酵母。從成本和方便性考慮，WA培養(yǎng)基所用的麥汁在啤酒廠容易得到，其經(jīng)過簡單的過濾處理后添加瓊脂粉即可，主要成本只是瓊脂粉，瓊脂粉的市場價格為103元/瓶，而PDA培養(yǎng)基為成品培養(yǎng)基，其市場價格為130元。根據(jù)公司的實際情況瓊脂粉的添加量是2%，每年的使用量是15瓶，即可以配置成750.00 L培養(yǎng)基，總成本是1 545元，750.00 L培養(yǎng)基換算PDA培養(yǎng)基（40 g溶于1.00 L的純凈水，每瓶250 g即6.25 L/瓶）的使用量是120瓶，總成本是15 600元。很容易看出，WA培養(yǎng)基比PDA培養(yǎng)基更加經(jīng)濟。

綜上所述，2種培養(yǎng)基在培養(yǎng)污染性啤酒野生酵母的培養(yǎng)效果上未存在明顯的差異，但是從成本經(jīng)濟方面考慮，選擇WA培養(yǎng)基比較合適。

[1]陳澤宇，周青梅.啤酒生產(chǎn)中的有害菌及控制辦法[J].廣東化工，2011（12）：68-69．

[2]管建良.野生酵母對啤酒生產(chǎn)的影響及控制[J].啤酒科技，2009（2）：47-48.

[3]田威，歐英秋.閻鳳文兩種方式培養(yǎng)啤酒有害菌的比較[J].啤酒科技，2012（8）：24-25．

Two Kinds of Culture Medium on Polluting Beer Wild Yeast Culture Effect Comparison

Wen Tianshou，Zeng yuan，F(xiàn)u Liangji，Qin Zhuo
（Yanjing Beer （Yulin） Co. Ltd.，Yulin 537000，China）

This article used two different types of culture medium to detect the four kinds of wild polluting beer yeast，to investigate the effect of these two kinds of culture media，in order to find a more suitable brewery yeast daily test media，the results showed that two kinds of culture medium on the effect of wild yeast culture polluting beer was no obvious difference，but taking the economic cost and convenience into consideration，WA culture medium was more suitable for brewery routine detection.

Beer； Wild yeast； Medium； Detection

TS262.5

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.04.016

文天壽（1985-），男，廣西玉林市人，本科，助理工程師，主要研究方向：啤酒分析。