中藥與礦物鹽微粉對急性血瘀模型大鼠血液流變性的影響

傅衛紅　張　青　周玉寶　張琳靜　彭立靜　王永興　李超民

解放軍第四五一醫院(西安710054)

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中藥與礦物鹽微粉對急性血瘀模型大鼠血液流變性的影響

傅衛紅張青周玉寶張琳靜彭立靜王永興李超民

解放軍第四五一醫院(西安710054)

目的：探討中藥與礦物鹽微粉對急性血瘀模型大鼠血液流變學指標的影響。方法：采用冰水浴和皮下注射鹽酸腎上腺素致大鼠急性血瘀模型，檢測全血低切、中切及高切黏度、血漿黏度、紅細胞壓積和纖維蛋白指數等指標，探討中藥與礦物鹽微粉對急性血瘀模型大鼠血液流變學指標的影響。結果：血瘀模型組高、中、低切變率的全血黏度、血漿黏度、紅細胞壓積、纖維蛋白較正常對照組明顯升高(P<0.01)。中藥與礦物鹽微粉各劑量組的全血黏度均有不同程度的下降，其中大劑量組與模型組比較有顯著性差異(P<0.05)，中、小劑量組較模型組降低，但無統計學意義；中藥與礦物鹽微粉大、中劑量組的血漿黏度較模型組有顯著性降低(P<0.05)；各劑量組的紅細胞壓積、纖維蛋白與模型組相比有不同程度的降低，但無統計學差異。結論：中藥與礦物鹽微粉能夠改善急性血瘀模型大鼠的全血和血漿黏度，具有明顯的活血化瘀作用。

中藥與礦物鹽微粉系專利產品多功能外用熱療包的內容物微粉混勻而成。主要成分包括沒藥、川芎、花椒、羌活、透骨草等十八味中藥和礦物鹽，具有活血、祛瘀、止痛的功效。對多種病因引起的頸肩腰腿痛有較好的療效。本研究采用腎上腺素加冰浴法復制大鼠急性血瘀模型，研究中藥與礦物鹽微粉對急性血瘀模型大鼠血液流變學指標的影響，探討中藥組方與礦物鹽微粉的活血化瘀作用。現將結果報道如下。

1材料

1.1實驗動物清潔級SD大鼠，雌雄各半，體重160～220g。由第四軍醫大學實驗動物中心提供，合格證號：SCXK(軍)2012-0007。飼養于空調恒溫室內，室溫24±2℃，相對濕度40%～60%，過濾送風，自動控制晝夜各12h。滅菌全價營養顆粒飼料(購于第四軍醫大學實驗動物中心)喂養，自由飲水。實驗開始前飼養觀察2周，選擇健康動物用于實驗。

1.2藥物和試劑多功能外用熱包批號：20130305。稱取其內容物適量，先粉碎成棕色粗粉，后微粉，收集微粉( 300目篩通過率≥95%)，室溫保存備用。地奧心血康膠囊(成都地奧制藥集團有限公司，批號：1211029)；鹽酸腎上腺素(西南藥業股份有限公司出品，批號：1310151)。

1.3實驗儀器FW-177型中草藥粉碎機(天津市泰斯特儀器有限公司生產)；BFM-6型超微粉碎機(濟南倍力粉技術工程有限公司生產)；AF-100制冰機(美國IMI CORNELIUS.INC)；CR21F型離心機(日本HITACHI)；F280SZ全自動血液流變學儀(重慶邁迪克科技開發公司)； Milli-Q純水機(MilliPore Corporation, France.)；低溫冰箱(美國Nair公司)。

2方法2.1動物分組及給藥劑量將試驗動物隨機分為6組，分組及給藥如下：正常對照組、血瘀模型組、地奧心血康陽性對照組(300mg/kg)及中藥與礦物鹽微粉高劑量組(150g/kg)、中劑量組(45g/kg)、低劑量組(15g/kg)。每組 10 只。劑量設置依據臨床擬用劑量。陽性對照組動物給予地奧心血康300mg/kg灌胃，中藥與礦物鹽微粉低、中、高劑量組動物頸背部包裹中藥與礦物鹽微粉治療包熱敷15min，每天2次，連續7d。第6天除正常組外其余各組大鼠參考文獻方法制備大鼠急性血瘀模型(具體方法見2.2)。第7天末次給藥30min后腹主動脈取血檢測血液流變學指標。

2.2血瘀模型的制作皮下注射鹽酸腎上腺素注射液0.5mg/kg，共 2 次，間隔8h，在2次之間(前后各間隔2h)，將大鼠浸于0～2℃冰水中5min，禁食不禁水過夜。第二次皮下注射鹽酸腎上腺素注射液后即成血瘀證模型。

2.3血流變學指標的測定麻醉大鼠，腹主動脈采血，1%肝素抗凝后，檢測血液流變學指標：全血低、中、高切變率(200s-1、30s-1、3s-1)下的全血黏度、紅細胞壓積(Hct)、纖維蛋白原。全血以3000r/min離心15min得到血漿，進行血漿黏度測定。

3結果

3.1對急性血瘀大鼠全血黏度的影響與正常組相比，模型組高、中、低切變率的全血黏度明顯升高(P<0.01)，中藥與礦物鹽微粉各劑量組的全血黏度有不同程度的下降，大劑量組較模型組有顯著性差異(P<0.05)，中、小劑量組有下降趨勢，但無統計學差異(表1)。

表1　各組大鼠不同切變率下全血黏度的比較

注：與正常組相比：△P<0.01；與模型組相比：*P<0.05，**P<0.01

3.2對急性血瘀大鼠血漿黏度、紅細胞壓積、纖維蛋白的影響與正常組相比，模型組大鼠血漿黏度、紅細胞壓積、纖維蛋白均明顯升高(P<0.05，P<0.01)，多功能外用熱包大、中劑量組的血漿黏度較血瘀模型組有較顯著降低(P<0.05)；中藥與礦物鹽微粉各劑量組對紅細胞壓積、纖維蛋白與模型組相比亦有降低的趨勢，但無統計學差異(表2)。

表2　各組大鼠血漿黏度、紅細胞壓積、纖維蛋白的比較

與正常組相比：△P<0.05，△△P<0.01；與模型組相比：*P<0.05

4討論血瘀癥是臨床最常見的證候類型，也是許多臨床疾病的中醫學病理機制。由肝腎虧損，氣血不足，或過度勞損、外傷或風寒濕邪，使局部氣血運行不暢，氣血凝滯，經絡閉阻不通，離經之血不能及時排出或消散，瘀滯于人體某部，或血液運行不暢，瘀積于經脈或臟器內所出現的證候[1]。血瘀證的現代醫學成因可能與微循環障礙、血液流變學異常、血液凝固性增高或纖溶性降低、血小板聚集性增高或釋放功能亢進、血流動力學障礙、血管狹窄、阻塞等有關[2]。已有許多學者將血液流變學指標的異常作為診斷血瘀證及判斷血瘀程度的重要客觀指標[3-4]。臨床上患者紅細胞流變特異性異常、血液高黏高凝狀態和流動性質的改變是“不通則痛”的機制之一[5]。

專利產品外用熱療包依據祖國傳統中醫藥學理論，經過大量基礎實驗和篩選，以沒藥、川芎、花椒、羌活、透骨草等為主要成分配合礦物質，利用濕熱敷的方法，使有效的成分通過毛孔、皮膚吸收進入人體內，改善病變部位的血液循環，促進炎癥及水腫的吸收，減輕或消除關節、肌肉組織的炎性反應，從而達到有效治療目的。我們前期的研究認為，外用熱療包的治療作用包括熱效應和非熱效應的雙重作用。其熱效應促進血液循環，加強局部組織代謝，降低炎癥反應，加快滲出物吸收，減輕水腫。非熱效應包括中藥及礦物鹽的藥理作用，其中乳香、沒藥、延胡索相協活血祛瘀、行氣止痛；羌活、當歸和五靈脂共奏散寒活血止痛之效[6]；透骨草、生川烏、防風、川芎和花椒可祛留滯經絡的風寒濕邪，并有較強的止痛作用；當歸、川芎養血兼活血。綜合全方，祛邪扶正，標本兼顧，發揮活血止痛、祛濕散寒、通經通絡的功效[7]。同時加入了礦物鹽，引藥下行，入腎軟堅，緩和藥材辛燥之性，增進藥材療效，并能促進滲液吸收，達到消炎、消腫、止痛作用[8]。

本研究采用腎上腺素加冰水刺激的方法復制急性血瘀證模型，模擬應激時機體狀態，以冰水浸泡動物，模擬外寒侵襲，兩種因素的綜合作用復制出急性寒凝血瘀型大鼠模型[9-10]，并對專利產品多功能外用治療包內容物的活血化瘀作用進行了探討。實驗結果表明，大鼠經給予腎上腺素和冰水處理后，造成全血黏度和血漿黏度升高、微循環障礙，造成了急性寒凝血瘀模型。中藥與礦物鹽微粉熱敷具有祛風散寒、活血化瘀、溫通經絡、調和氣血的功能，能夠改善急性寒凝血瘀大鼠的全血和血漿黏度，改善血液流變性的異常及微循環障礙，從而緩解血瘀的癥狀，其具體作用機制及有效成分作用尚需進一步研究。

[1]杜金行，李騰飛，史載祥．血瘀證及活血化瘀臨床研究回顧與展望[J]．中華中醫藥雜志，2012，27(9)：2247-2253．

[2]中國中西醫結合學會活血化瘀專業委員會．血瘀證中西醫結合診療共識[J]．中國中西醫結合雜志， 2011，31(6)：829-844．

[3]楊銀花, 王佳寧, 韓雪, 等．血瘀證與其客觀檢測指標關聯性研究進展[J]．中醫臨床研究，2014，6(29)：142-144．

[4]李顯華，杜佳林，包玉龍，等．丹龍膠囊活血化瘀作用的實驗研究[J]．實驗動物學，2012，29( 2)∶18-19．

[5]李小兵，盧軍敏．從紅細胞流變特性的變化探討“不通則痛”的實質[J]．陜西中醫，2005，26(3)∶242-243．

[6]朱富華, 楊志春, 樊平．中醫中藥角藥研究[M]．西安：陜西省科學技術出版社，2009：246．

[7]張青, 李偉, 張琳靜, 等．活血化瘀中藥配合礦物質熱敷治療頸肩腰腿痛962例[J]．陜西中醫，2014，35(1)：28-29．

[8]江云，黃勤挽．現代中藥炮制研究[M]．北京：科學出版社，2010：138-155．

[9]彭成．中醫藥動物實驗方法學[M]．北京：人民衛生出版社，2008：940．

[10]陳奔, 鐘振國．血瘀證病證結合動物模型研究進展[J]．世界中西醫結合雜志，2015，10(1)：136-139．

(收稿2016-03-20;修回2016-04-19)

Effect of traditional Chinese medicine and mineral salts micropowder on hemorheology in rats of acute blood stasis model

The 451st Hospital of PLA(Xi’an 710032) Fu WeihongZhang QingZhou Yubaoet al

Objective: To explore the effects of external application of the Traditional Chinese medicine and mineral salts(TCM-MS)micropowder on hemorheology in acute blood stasis model of rats. Methods: Sixty SD rats were randomly divided into the normal group, the model group, the Di’ao xinxuekang capsules control group，and high dose(150g·kg-1) , middle dose (45g·kg-1) and low dose (15g·kg-1) of TCM-MS micropowder group, with 10 rats in each group. The TCM-MS micropowder groups were administered with external application of TCM-MS micropowder twice per day for 7 d separately，where as the normal and model group were orally administered with distilled water, and the control group were orally administered with the Di’ao xinxuekang capsules．The models of acute blood stasis were established by means of subcutaneous injection of adrenaline and ice water bath after treatment for 6 days. The hemorheology indexes were measured 7d after continuous administration in order to investigate the influences of TCM-MS micropowder on the acute blood stasis rat model. Results: The whole blood low shear viscosity, medium shear viscosity, high shear viscosity and plasma viscosity, hematocrit(HCT) and plasma fibrinogen (FIB) of model control group were significantly increased compared with those of the normal group (P<0.01); The whole blood viscosity were decreased in different doses of TCM-MS micropowder group, and compared with the model group, there was significant decrease in the high dose group of TCM-MS micropowder(P<0.05). The plasma viscosity index were significantly reduced in high and middle dose of TCM-MS micropowder group (P<0.05)．There were no significant difference in hematocrit (HCT) and plasma fibrinogen (FIB) between the TCM-MS micropowder group and the model group. Conclusion: The TCM-MS micropowder could significantly improve abnormal change of hemorheology on actue blood stasis model of rats．

Acute blood stasisHemorheologymicrocirculatory disturbanceAnimal,experimentationRats

*全軍保健專項課題(12BJ207)

血瘀癥血液流變學微循環障礙動物，實驗大鼠

R96

Adoi:10.3969/j.issn.1000-7369.2016.10.081