胎盤組織缺氧誘導因子-1α和內皮素-1表達對糖尿病妊娠的影響

屈莉紅，荊魯寧

（山東省海陽市人民醫院產科，山東 海陽 265100）

胎盤組織缺氧誘導因子-1α和內皮素-1表達對糖尿病妊娠的影響

屈莉紅，荊魯寧

（山東省海陽市人民醫院產科，山東 海陽 265100）

目的探究分析胎盤組織缺氧誘導因子-1α（HIF-1α）和內皮素-1（ET-1）表達對糖尿病妊娠的影響。方法分別選取糖尿病妊娠患者30例（糖尿病妊娠組）、妊娠期糖尿病患者30例（妊娠糖尿病組）以及正常孕婦30例（對照組）。采用免疫組織化學法SP法測定EF-1及HIF-1α蛋白的含量，比較并分析各組檢測結果差異及其對糖尿病妊娠結局的影響。結果糖尿病妊娠患者胎盤組織EF-1及HIF-1α蛋白陽性表達率顯著高于妊娠糖尿病患者及對照組（P<0.05），糖尿病妊娠患者的產后出血、胎兒生長受限及妊娠高血壓等并發癥發生率（50.00%）顯著高于妊娠糖尿病患者（30.00%）及對照組（10.00%），各組比較差異有統計學意義（P< 0.05）。結論胎盤組織EF-1及HIF-1α蛋白表達情況對糖尿病妊娠患者的妊娠結局具有不良影響，EF-1及HIF-1α蛋白陽性表達率越高，妊娠并發癥發生率明顯增加，胎盤損害越嚴重。

胎盤組織；HIF-α；ET-1；糖尿病妊娠

糖尿病是臨床診療中較為常見的病癥，目前，糖尿病患者的妊娠率也在不斷增加，對母嬰健康存在嚴重威脅[1]。胎盤組織在缺氧狀態下可以促使缺氧誘導因子-1α（hypoxia-induciblefactor-1α，HIF-1α）表達，內皮素-1（endothelin-1，ET-1）是HIF-1α的下游靶基因，屬于纖維化致炎因子，HIF-1α和ET-1共同參與糖尿病妊娠的進展過程[2-3]。胎盤功能對胎兒的健康起著至關重要的保護作用，其病理改變依賴于胎盤含氧量。本研究胎盤組織中HIF-1α和ET-1表達對母嬰結局的影響作用。現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2013年10月-2015年10月于山東省海陽市人民醫院產科接收的90例孕婦為研究對象。其中，糖尿病妊娠患者30例（糖尿病妊娠組）、妊娠期糖尿病患者30例（妊娠糖尿病組）以及正常孕婦30例（對照組）。糖尿病診斷符合中華醫學會糖尿病學會制定的糖尿病診斷標準[4]，糖尿病妊娠組在本次妊娠前均已確診為糖尿病。所選90例研究對象均為單胎妊娠，排除具有貧血、精神障礙及其他心、肝、腎器官腫瘤疾病患者。3組患者均對本研究知情并自愿參與研究，本次研究已經獲得醫院倫理委員會批準。3組差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

無菌操作狀態下取2塊處于娩出30 min內的3組胎盤組織母體面中央組織，注意避開組織鈣化及壞死區域，胎盤組織塊大小在1 cm×1 cm×1 cm左右，經甲醛固定后，進行石蠟包埋處理。EF-1及HIF-1α蛋白定位采用免疫組織化學法SP法進行半定量檢測。兔抗人ET-1單克隆抗體及兔抗人HIF-1α多克隆抗體均由北京中杉金橋生物技術有限公司提供，檢測操作過程嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3觀察指標

觀察各組妊娠并發癥發生情況，觀察胎盤組織EF-1及HIF-1α蛋白的表達及定位情況。

1.4評價指標

免疫組織化學法染色結果判定：顯微鏡下觀察到胞質或者胞膜出現棕黃色顆粒即為陽性表達。

1.5統計學方法

采用SPSS 18.0統計軟件進行數據分析，計數資料采用（%）表示，行χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1各組胎盤組織HIF-1α和ET-1的表達情況

糖尿病妊娠組孕婦胎盤組織HIF-1α蛋白表達陽性率為66.67%，ET-1蛋白表達陽性率為73.33%，與妊娠糖尿病組及對照組胎盤組織HIF-1α和ET-1表達水平比較差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1　3組HIF-1α和ET-1蛋白表達陽性率比較例（%）

2.2HIF-1α和ET-1在各組胎盤組織中的定位情況

胎盤組織HIF-1α和ET-1蛋白表達定位在胎盤合體、細胞核及胞質部分，均可以見到棕黃色顆粒的陽性表達，糖尿病妊娠組的HIF-1α和ET-1蛋白表達明顯增強，妊娠糖尿病組及對照組表達相對較弱，糖尿病妊娠組、妊娠糖尿病組及對照組中HIF-1α和ET-1蛋白表達的定位結果見附圖。

附圖　HIF-1α和ET-1的定位（SP×100）

2.3各組妊娠不良并發癥發生率比較

糖尿病妊娠組孕婦出現胎兒生長受限3例，并發癥發生率為50.00%，較妊娠糖尿病組孕婦及對照組并發癥高（P<0.05），見表2。

表2　3組妊娠結局比較結果例（%）

3 討論

糖尿病妊娠是臨床上造成孕產婦及圍產兒死亡的重要原因，糖尿病妊娠患者胎盤滋養細胞功能出現障礙。正常妊娠過程中，孕10周左右時胚胎滋養葉細胞開始逐漸侵入母體蛻膜，增加血流動力，確保胎盤和胚胎發育的營養需求[5]。糖尿病妊娠患者存在不同程度的糖耐量異常，女性妊娠期會出現胰島素代謝異常將造成糖代謝異常。糖尿病妊娠會對孕婦和胎兒產生較大的不良影響，妊娠晚期婦女的血糖代謝障礙導致先兆子癇、妊娠期糖尿病、妊娠期抑郁癥、細菌性陰道病、影響胎兒的宮內發育，增加新生兒患心血管疾病、免疫系統疾病和糖尿病等慢性疾病的風險，例如造成早產、子癇前期等等，影響著孕婦和胎兒的健康。而糖尿病的發生，有很多的危險因素，例如高血糖、高血脂等等。糖尿病妊娠孕婦的機體狀態往往呈現高血糖狀態，這將在一定程度上造成胚胎組織細胞缺氧，進而導致機體發生血管增生、間質纖維等效應[6]。HIF可以對機體缺氧狀態進行適應調節，調控缺氧反應基因的表達。HIF主要在缺氧環境下活化，同時在富氧環境下降解，所以HIF表達可以提高機體缺氧的適應能力。妊娠胎盤發育早期長期處于缺氧狀態，滋養細胞分泌HIF-1α激活靶基因ET-1表達，從而促進胎盤心血管生成，維持營養供應。臨床研究表明，血管內皮生長因子、ET-1等基因均受HIF-1α調控，HIF-1α能夠促進血管生成、調節血管舒縮功能，維持機體的氧穩態[7-9]。ET-1是由血管內皮細胞合成的纖維化因子，可以在缺氧環境中與HIF-1α實現特異性結合。ET-1參與糖尿病并發癥的發生與發展過程，通過引發胎盤滋養細胞的應激化反應導致胎盤局部損傷[10]。本組糖尿病妊娠組HIF-1α蛋白表達量相對較高，其胎盤絨毛微血管內皮細胞胞質中的ET-1蛋白表達也顯著高于對照組和妊娠糖尿病組（P<0.05），說明糖尿病妊娠組孕婦血糖水平存在較大的波動，高血糖狀態下HIF-1α水平升高，進而刺激ET-1表達的增多，導致孕婦胎盤結構功能出現嚴重損害，影響妊娠結局。糖尿病是典型的血糖代謝障礙疾病，對患者的血液微循環及流變性造成了一定影響，容易導致患者出現缺血、缺氧甚至水腫等并發癥[11-12]。糖尿病患者妊娠后將導致胎盤滋養細胞及胎盤絨毛發生間質纖維化，引發胎盤缺血缺氧。本組研究結果顯示，糖尿病妊娠患者的HIF-1α及ET-1蛋白表達水平升高導致妊娠并發癥的發生率增加，說明HIF-1α及ET-1表達情況引發了糖尿病妊娠患者的不良妊娠結局。

綜上所述，糖尿病妊娠患者胎盤組織HIF-1α及ET-1表達參與了妊娠結局的發生、發展，臨床治療中應關注以HIF-1α及ET-1為靶點的抗糖尿病并發癥治療，積極改善預后。

[1]楊曉菊,孫玲玲,張萌,等.糖尿病患者妊娠后胎盤組織缺氧誘導因子-1α及內皮素-1的表達及與妊娠結局關系[J].中華實用診斷與治療雜志,2014,28(1):15-17.

[2]VICENTE G C,CORREIA-SANTOS A M,SUZUKI A,et al. Maternal exposure to diets containing flaxseed flour or flaxseed oil during pregnancy and lactation protects the aortic remodeling in adult male offspring of diabetic rat dams[J].Journal of the Science of Food and Agriculture,2015,95(14):2973-2980.

[3]許焯.高危因素早期干預對108例妊娠期糖尿病妊娠結局的影響[J].糖尿病新世界,2015,11(4):83.

[4]唐琳,張翠翠,郭青,等.血管緊張素Ⅱ、內皮素1及缺氧誘導因子1α在糖尿病腎病腎組織的表達及意義[J].中華腎臟病雜志,2011, 27(5):374-375.

[5]楊曉菊,楊宗利,王學芹,等.HIF-1α、VEGF在妊娠期糖尿病胎盤組織中的表達及其與胎兒缺氧的關系[J].實用婦產科雜志,2012, 28(11):962-966.

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[7]朱雅文,耿正惠.缺氧誘導因子-1在妊娠期高血壓疾病發病中的作用[J].中國實用醫刊,2014,41(7):22-23.

[8]楊曉菊,徐琳,楊宗利,等.妊娠期糖尿病胎盤組織缺氧誘導因子1α及血管內皮生長因子的表達與妊娠結局的關系[J].中華糖尿病雜志,2013,5(5):287-292.

[9]GRAZUL-BILSKA A T,LYNN MJ,BOROWICZ P P,et al.Placental development during early pregnancy in sheep:effects of embryo origin on vascularization[J].Reproduction:The Official Journal of the Society for the Study of Fertility,2014,147(5): 639-648.

[10]MATHIESEN R.Diabetic nephropathy in pregnancy:new insights from a retrospective cohort study[J].Diabetologia,2015, 58(4):649-650.

[11]VOLPATO G T,DAMASCENO D C,SINZATO Y K,et al.Oxidative stress status and placental implications in diabetic rats undergoing swimming exercise after embryonic implantation[J]. Reproductive Sciences,2014,22(5):602-608.

[12]黃艷麗,王晶,徐東方,等.缺氧誘導因子在異位子宮內膜中的表達意義[J].山東醫藥,2009,49(7):72-73.

（張蕾編輯）

Influence of placental hypoxia inducible factor-1α and endothelin-1 in gestational diabetes patients

Li-hong Qu，Lu-ning Jin
（Department of obstetrics，Haiyang People's Hospital，Haiyang，Shandong 265100，China）

Objective To explore the the influence of placental hypoxia inducible factor 1 alpha（HIF-1α）and endothelin-1（ET-1）in gestational diabetes.Methods A number of 30 patients diabetes during pregnancy and 30 gestational diabetes patients were selected，and 30 cases of normal pregnant women were selected at the same time as a control group.Immune histochemical method and SP method were used to detect EF-1 and HIF-1α protein content.Differences between groups of test result and its influence on pregnancy outcomes of diabetes were compared and analysis.Results The placental tissue EF-1 and HIF-1α protein positive expression rate in patients with diabetes during pregnancy was significantly higher than that of gestational diabetes mellitus patients and the control group（P＜0.05）.Patients with diabetes during pregnancy had higher rate of postpartum hemorrhage，fetal growth restriction and higher incidence of complications（P＜0.05）.Conclusions The expressions of EF-1 and HIF-1α protein in placental tissue have adverse effects on patients with diabetes during pregnancy.

placenta tissue；HIF-1α；ET-1；gestational diabetes

R 714.256

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.20.010

1005-8982（2016）20-0044-04

2016-04-06