PCR技術(shù)在國內(nèi)農(nóng)產(chǎn)品及食品檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中的應(yīng)用

◎吳平平

（通標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)有限公司武漢分公司，湖北 武漢 430064）

PCR技術(shù)在國內(nèi)農(nóng)產(chǎn)品及食品檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中的應(yīng)用

◎吳平平

（通標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)有限公司武漢分公司，湖北 武漢 430064）

隨著PCR技術(shù)在農(nóng)產(chǎn)品及食品檢測(cè)方面的應(yīng)用越來越廣泛，其標(biāo)準(zhǔn)化程度也日益增加。本文綜述了PCR技術(shù)在農(nóng)產(chǎn)品食品致病菌檢測(cè)、轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)、過敏源成分檢測(cè)、病毒毒素檢測(cè)等方面的貢獻(xiàn)，旨在為PCR技術(shù)在多領(lǐng)域的發(fā)展提供新的思路。

PCR技術(shù)；農(nóng)產(chǎn)品；食品

1 PCR技術(shù)概述

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一種利用實(shí)驗(yàn)設(shè)備模擬細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的條件，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)DNA大量復(fù)制的擴(kuò)增技術(shù)。Real-Time PCR技術(shù)即實(shí)時(shí)熒光定量PCR，它的不同之處在于在反應(yīng)體系里加入熒光染料（如Sybr green等）或熒光探針（如Taqman probe等）等熒光信號(hào)以監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR反應(yīng)產(chǎn)物的量，可進(jìn)行定量分析。RT-PCR即逆轉(zhuǎn)錄PCR，整個(gè)反應(yīng)首先需在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下將目的RNA合成cDNA，再以cDNA為模板，通過聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增反應(yīng)擴(kuò)增合成目的片段的技術(shù)。實(shí)時(shí)熒光RTPCR則是將mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后作為模板，再通過實(shí)時(shí)熒光PCR進(jìn)行定量分析。

2 PCR技術(shù)在農(nóng)產(chǎn)品及食品檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法中的應(yīng)用

2.1 致病微生物檢測(cè)［1］

1992年P(guān)CR技術(shù)開始應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品食品中的有害微生物檢測(cè)，2007年我國發(fā)行了第一部基于PCR技術(shù)的致病菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)金黃色葡萄球菌、沙門菌、霍亂弧菌、大腸埃希菌O157：H7、志賀菌、副溶血性弧菌和單核細(xì)胞李斯特菌等致病菌進(jìn)行快速檢測(cè)［2］。

2.2 轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)

PCR技術(shù)在農(nóng)產(chǎn)品食品轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)中起著無可替代的作用。截至2016年，我國已發(fā)行多部針對(duì)轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品和食品檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)，PCR技術(shù)成為農(nóng)產(chǎn)品食品轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)的主要手段，涵蓋大豆、油菜、水稻、玉米和小麥等多種農(nóng)產(chǎn)品食品生產(chǎn)原料的多個(gè)轉(zhuǎn)基因測(cè)試位點(diǎn)，見表1［3］。

表1 轉(zhuǎn)基因作物的PCR測(cè)試基因位點(diǎn)表

2.3 過敏源檢測(cè)［4］

農(nóng)產(chǎn)品食品中的過敏源成分（如花生、大豆、芝麻、腰果、雞蛋、杏仁和胡桃等）的有無也可以通過PCR技術(shù)來檢測(cè)。無論是植物過敏源成分還是動(dòng)物過敏源成分都可以通過PCR技術(shù)進(jìn)行快速分析，見表2。

表2 PCR檢測(cè)過敏源成分表

2.4 病毒及毒素檢測(cè)

RT-PCR、實(shí)時(shí)熒光RT-PCR技術(shù)還可用于農(nóng)產(chǎn)品食品中病毒的檢測(cè)。目前國內(nèi)發(fā)行的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)主要是針對(duì)海鮮類產(chǎn)品中病毒的檢測(cè)，如貝類中的諾如（諾沃克）病毒［5］和甲肝病毒［6］等檢測(cè)。

3 展望

PCR檢測(cè)技術(shù)因其高靈敏度、高通量、自動(dòng)化程度高、低能耗等優(yōu)點(diǎn)廣泛地應(yīng)用于生物、醫(yī)藥、食品、農(nóng)業(yè)等多個(gè)領(lǐng)域，為各行各業(yè)帶來了新的研究方法和發(fā)展方向。

［1］遇曉杰，薛成玉，呂 琦，等.食品中5種致病菌多重PCR快速檢測(cè)技術(shù)的建立與應(yīng)用［J］.中國食品衛(wèi)生雜志， 2009，21（5）：398-402.

［2］中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.SN/T 1869-2007 食品中多種致病菌快速檢測(cè)方法 PCR法［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2007.

［3］李 娜，周艷明，李彩衛(wèi)，等.PCR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)中的應(yīng)用［J］.糧油加工，2006（10）：81-83.

［4］曹際娟，趙彤彤，劉 冉，等.PCR檢測(cè)食品中致敏原蝦源性成分［J］.食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2012，3 （2）：274-278.

［5］張 穎，吳風(fēng)亮.RT-PCR方法檢測(cè)貝類中諾沃克樣病毒的研究［J］.食品科學(xué)，2008，29（5）：347-351.

［6］國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB/T 22287-2008 貝類中甲型肝炎病毒檢測(cè)方法普通 RT-PCR方法和實(shí)時(shí)熒光 RT-PCR方法［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

The Application of PCR Technology in the Domestic Agricultural Products and Food Testing Standards

Wu Pingping
（Standard Technology Service Co. Ltd. Wuhan Branch， Wuhan 430064， China）

With the widely application of PCR technology in the field of agricultural products and food testing， it's degree of standardization is also increasing. This paper summarizes the application of PCR technology in the detection of agricultural products. For example， the contribution of pathogenic bacteria detection， genetically modified components detection， allergen detection， virus detection， etc. It aims to provide new ideas for the development of polymerase chain reaction （PCR） technique in many fields.

PCR technology； Agricultural products； Food

TS207

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.14.023