水楊酸、茉莉酸甲酯及超聲波對北沙參愈傷組織生長及產香豆素的影響

苗曉燕，朱維紅，張筱梅*，王 琳

（保定學院生化系，河北 保定 071000）

水楊酸、茉莉酸甲酯及超聲波對北沙參愈傷組織生長及產香豆素的影響

苗曉燕，朱維紅，張筱梅*，王 琳

（保定學院生化系，河北 保定 071000）

研究水楊酸（salicylic acid，SA）、茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）和超聲波對北沙參愈傷組織生長的影響，并利用高效液相色譜法測定了經誘導處理后愈傷組織中香豆素（歐前胡素、異歐前胡素及補骨脂素為主要指標）含量的變化。結果表明：SA和MeJA均對北沙參愈傷組織的生長具有抑制作用，而一定時間的低強度超聲波處理則能夠促進北沙參愈傷組織生物量的增長；同時，結果表明此3 種誘導因子均能夠不同程度地促進香豆素合成，即當SA質量濃度達到8 mg/L時，歐前胡素的含量達到最大值，為對照的3.8 倍；SA質量濃度為16 mg/L時，補骨脂素含量達最大值，為對照的1.70 倍；當SA質量濃度在28～30 mg/L之間時，異歐前胡素的含量達到最大值，此范圍內總香豆素含量也達最大值，約為對照的2.33 倍；當MeJA濃度達400 μmol/L時，補骨脂素和異歐前胡素含量達到最大值，分別為對照的6.09 倍和5.53 倍，總香豆素含量也達最大值14.86 μg/g，為對照的5.11 倍；當超聲波處理30 min時，愈傷組織中歐前胡素和異歐前胡素的含量達最大值5.51 μg/g和3.69 μg/g，分別為對照的5.15 倍和4.20 倍；總香豆素含量也達最大值11.90 μg/g，為對照的3.55 倍；而補骨脂素含量則在超聲處理10 min后達到最大值3.60 μg/g，為對照的1.50 倍。綜上，比較3 種誘導子對北沙參愈傷組織誘導處理后香豆素含量的變化發現，與SA和超聲波相比，MeJA更能夠有效地促進北沙參中次生代謝產物——香豆素的合成。

北沙參；香豆素；茉莉酸甲酯；水楊酸；超聲波

北沙參為傘形科植物珊瑚菜（Glehniabo littoralis F.Schmidt ex Miq）的干燥根，別名萊陽沙參、萊陽參、遼沙參［1］。山東、河北、內蒙古、遼寧為其主產區。北沙參屬養陰藥，有養陰清肺、益胃生津之功效。目前臨床上主要用于治療肺熱燥咳，熱病傷津、勞嗽痰血等病癥。經實驗研究表明具有這一藥理學活性的次生代謝產物的成分主要為香豆素類物質［2］，該香豆素類物質具有止咳化痰［3］、抗突變［4］、抗菌［5］、抗腫瘤［6］和鎮痛鎮靜［7］等作用。

野生北沙參是我國瀕危植物之一，1999年被列為國家Ⅱ級重點保護野生植物［8］。目前市場上銷售的均為人工栽培的北沙參，但由于近年來該藥材生產只種不選，自留自用，種子種苗提純和復壯工作均滯后，導致北沙參的品種退化，質量下降和療效降低［9］。北沙參中的香豆素是一類由苯環與3 個直鏈碳連在一起為單元（C6～C3）構成的化合物，屬于苯丙素類。從生物合成途徑來看，由莽草酸通過苯丙氨酸和酪氨酸等芳香氨基酸，經脫氨、羥基化、耦合等反應步驟形成最終產物［10］。因此，通過調節代謝途徑提高北沙參中香豆素的含量，并獲得優質高產的北沙參種苗具有重要的理論和實際意義。

在植物次生代謝過程中，誘導子如水楊酸（salicylic acid，SA）、茉莉酸甲酯（methyl jasmonate，MeJA）、超聲波等能作為一種特定的生化信號，快速、轉移和選擇性地誘導特定基因的表達，從而調節植物細胞次生代謝產物的合成［11-13］，目前已在多種藥用植物如丹參［14］、甘草［15］、紫草［16］、三七［17］等誘導中均能夠提高相應次生代謝產物的量。而關于北沙參方面的報道尚未見到。因此本研究中，主要通過添加SA、MeJA及超聲波處理3 種途徑，對北沙參愈傷組織進行誘導，以探討對其愈傷組織生長及香豆素合成代謝的影響，旨在為北沙參的優質種苗繁育以及次生代謝產物香豆素的大規模生產提供一定的理論和實驗依據。

1 材料與方法

1.1 材料

北沙參愈傷組織［18］保定學院生化系細胞實驗室誘導。

1.2 試劑與儀器

甲醇（色譜純）、萘乙酸（1-naphthaleneacetic acid，NAA）、6-芐氨基嘌呤（6-benzylaminopurine，6-BA） 天津市大茂化學試劑廠；歐前胡素、異歐前胡素、補骨脂素標準品、SA、MeJA 中國藥品生物制品檢定所。

B3200S-T超聲清洗器 必能信超聲（上海）有限公司；LC-20AT高效液相色譜儀 日本島津公司。

1.3 方法

1.3.1 SA誘導處理北沙參愈傷組織

取一定量的北沙參愈傷組織，接種至添加質量濃度為0、4、8、12、16、20、24、28、32 mg/L SA的培養基中（培養基配方：1/2 MS培養基+1.2 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA+7 g/L瓊脂+20 g/L蔗糖），25 ℃暗培養35 d，每個質量濃度設3 個重復。

1.3.2 MeJA誘導處理北沙參愈傷組織

取一定量的北沙參愈傷組織，接種至分別添加濃度為0、100、200、400、600、800、1 000 μmol/L MeJA的培養基中（培養基配方同上），25 ℃暗培養35 d，每個濃度設3 個重復。

1.3.3 超聲波誘導處理北沙參愈傷組織

取一定量的北沙參愈傷組織，接入裝有適量無菌水的三角瓶中，放入超聲波清洗器中超聲處理，處理時間分別為0、10、20、30、40、50 min，然后再接入上述培養基中，25 ℃暗培養35 d，每個時間設3 個重復。

1.3.4 愈傷組織生長量的測定

以愈傷組織培養35 d的鮮質量和干質量表示培養過程中的愈傷組織生長量。實驗設3 次重復。從培養容器中取出北沙參愈傷組織，洗凈后置于50 ℃烘箱中烘干至恒質量，稱量得干質量。

愈傷組織生長量/g=收獲量/g-接種量/g

1.3.5 高效液相色譜法（high performance liquid chromatography，HPLC）測定愈傷組織中香豆素含量

1.3.5.1 色譜條件

色譜柱：Promosil-C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫：30 ℃；流動相為甲醇-水（68∶32，V/V），梯度洗脫；流速：1.0 mL/min；檢測波長：250 nm；進樣量20 μL。

1.3.5.2 繪制標準曲線

分別精密稱取干燥至恒質量的標準品補骨酯素、歐前胡素、異歐前胡素，置棕色量瓶中加甲醇超聲波溶解后，制成補骨酯素0.117 mg/mL、歐前胡素0.13 mg/mL和異歐前胡素0.11 mg/mL的混合溶液，用0.45 μm濾膜過濾。將標準品混合溶液（按0.1 mg/mL計算）依次稀釋，分別選擇0.1、0.05、0.025、0.005、0.002 5、0.000 1 mg/mL這6 個質量濃度進樣，每次精密吸取20 μL注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下檢測峰面積。以峰面積（mV·min）為縱坐標，以進樣質量濃度（mg/mL）為橫坐標進行線性回歸，繪制標準曲線，求得回歸方程如下：補骨脂素：y = 206 317 040x+34 718（R2= 0.999 3），歐前胡素：y = 163 010 226x+10 382（R2= 0.999 6），異歐前胡素：y = 82 088 237 x+20 068（R2= 0.999 5）。

1.3.5.3 香豆素含量測定

準確稱取1 g經不同處理干燥后并研磨成粉末的北沙參愈傷組織，置具塞離心管中，加12 mL乙醚，超聲波處理30 min，4 000 r/min離心30 min，提取2 次，收集上清液，風干。用色譜甲醇超聲20 s，溶解后定容至1 mL，12 000 r/min、4 ℃離心15 min，取上清液用0.45 μm濾膜過濾后進樣分析。

2 結果與分析

2.1 香豆素色譜圖

北沙參香豆素（以歐前胡素、異歐前胡素、補骨脂素為主要指標）標準品及愈傷組織香豆素HPLC色譜圖如圖1、2所示，圖1中1～3依次為補骨脂素、歐前胡素、異歐前胡素的特征峰，該3 個特征峰分別在4.5、8.6 min及14.5 min左右出現。

2.2 SA對北沙參愈傷組織生長和香豆素含量的影響

由圖3a可知，隨SA質量濃度增加，北沙參愈傷組織的干質量總體呈現逐漸下降的趨勢。當SA質量濃度在0～8 mg/L之間時，愈傷組織生長量下降緩慢，當質量濃度達8～12 mg/L時，愈傷組織增長量急劇下降，之后趨于平緩。說明SA對北沙參愈傷組織生物量的增長具有一定的抑制作用，且隨SA質量濃度的增加，這種抑制作用在逐漸增強，這與SA對紅豆杉細胞的生長具有抑制作用相一致［19］，說明一定質量濃度的SA對活細胞具有毒性，且毒性隨質量濃度增加逐漸增強。

HPLC結果分析（圖3b）表明：適宜質量濃度的SA對北沙參愈傷組織中歐前胡素、異歐前胡素和補骨脂素的合成均具有一定的促進作用，且隨質量濃度升高呈現先升高后下降的趨勢。當SA質量濃度達到8 mg/L時，歐前胡素的含量達到最大值4.11 μg/g，為對照的3.8 倍；SA質量濃度在28～30 mg/L之間時，異歐前胡素的含量達到最大值；而SA對補骨脂素的影響較小，即在質量濃度為16 mg/L時達最大值2.10 μg/g，為對照的1.70 倍；在SA質量濃度為28～30 mg/L之間時，總香豆素含量達到最大值，約為對照的2.33 倍。這一結果與前人的研究結果［20-22］相一致，即SA作為誘導子可誘導多種植物次生代謝物合成積累量的增加。分析原因可能是，香豆素次生代謝基礎途徑為苯丙烷代謝途徑，一定質量濃度SA可以通過改變苯丙烷代謝途徑中的關鍵酶活性，從而提高次生代謝產物的合成積累量［22-23］。

2.3 MeJA對北沙參愈傷組織生長和香豆素含量的影響

由圖4a可知，隨MeJA濃度升高，北沙參愈傷組織的干質量呈現逐漸下降的趨勢，且褐化情況逐漸加重，說明MeJA對愈傷組織的生長有明顯的抑制作用。HPLC測定結果（圖4b）表明，3 種香豆素含量均隨MeJA濃度的提高呈現先上升后下降的趨勢，但與愈傷組織的生長并無明顯的相關性。其中補骨脂素和異歐前胡素均在MeJA濃度達400 μmol/L時，含量達到最大值7.13 μg/g和5.07 μg/g，分別為對照的6.09 倍和5.53 倍；而歐前胡素則在MeJA濃度達200 μmol/L時，含量達到最大值4.03 μg/g，為對照的4.87 倍；總香豆素的含量則與補骨脂素和歐前胡素合成趨勢一致，即在MeJA濃度達400 μmol/L時含量達到最大值14.86 μg/g，是對照的5.11 倍。說明MeJA既有抑制北沙參愈傷組織生長的作用，同時又具有誘導香豆素合成的作用，但濃度過高則又會抑制香豆素的合成，適宜的誘導濃度為400 μmol/L。這與羅建平等［24］進行的茉莉酸甲酯誘導懷槐懸浮細胞合成異黃酮的結論是一致的。原因可能是MeJA作為小分子物質調節植物次生代謝過程中相關基因的表達，誘導香豆素的合成［25］。

2.4 超聲波時間對北沙參愈傷組織生長和香豆素含量的影響

由圖5a可知，隨超聲波處理時間延長，愈傷組織的干質量呈現先升高再下降的趨勢，即經10～40 min時間內超聲波處理，愈傷組織生長較快，35 d后收獲，經40 min處理的愈傷組織增長量最大為0.32 g，為未經處理愈傷組織干質量的1.62 倍，且生長體積較大，結構疏松，顏色較淺。

HPLC測定結果（圖5b）表明，超聲波對歐前胡素和異歐前胡素均有一定的促進作用，即當超聲波時間為30 min時，愈傷組織中歐前胡素和異歐前胡素的含量達最大值5.51 μg/g和3.69 μg/g，分別為對照的5.15 倍和4.20 倍。而補骨脂素則在超聲波處理10 min時達到最大值3.60 μg/g，為對照的1.50 倍，之后趨于下降；總香豆素含量達11.90 μg/g，為對照的3.55 倍，此變化則與歐前胡素和異歐前胡素含量變化一致。說明一定時間低強度的超聲波處理，能夠促進北沙參愈傷組織生長和香豆素的合成，這可能是由于低強度的超聲波處理使細胞膜和細胞器的形態發生變化，從而導致細胞代謝和膜通透性的改變［26-27］，促進了愈傷組織的生長；而且超聲波的機械刺激強化了生物轉化過程中的傳質和混合，提高了酶活性，使細胞內代謝反應更加旺盛，從而提高了代謝產物的合成量［28］。

3 結 論

利用植物愈傷組織或細胞懸浮培養可以生產用于預防和治療疾病的植物次生代謝產物。近年來，這一領域的發展極為迅速，已經研究了400多種植物，從培養細胞中分離到600多種次級代謝產物［29］，通過添加外源誘導子改變植物次生代謝途徑，是植物提高次生代謝產物的有效方法之一。本實驗研究中考察了SA、MeJA及超聲波3 種誘導因子子對北沙參愈傷組織生長及香豆素合成的影響。結果表明，SA和MeJA對北沙參愈傷組織的生長均具有一定的抑制作用；而低強度的超聲波則對北沙參愈傷組織的生長具有較明顯的促進作用，且隨超聲波時間的延長呈現生長快速的特點，但時間過長也會抑制其生長量的增加。HPLC測定香豆素含量結果表明，SA、MeJA和超聲波對香豆素均有一定的促進作用，當SA質量濃度在28～30 mg/L之間時，總香豆素含量達到最大值，約為對照的2.33 倍；當MeJA濃度達400 μmol/L時，總香豆素含量達到最大值14.86 μg/g，是對照的5.11 倍；當超聲波處理30 min時，愈傷組織中歐前胡素和異歐前胡素的含量達最大值5.51 μg/g和3.69 μg/g，分別為處理前的5.15 倍和4.20 倍；而補骨脂素則在10 min超聲處理后達到最大值3.60 μg/g，為對照的1.50 倍，總香豆素含量達11.9 μg/g，為對照的3.55 倍。綜上，通過比較3 種誘導子對北沙參愈傷組織誘導處理后香豆素含量的變化發現，與SA和超聲波相比，MeJA更能夠有效地促進北沙參中次生代謝產物——香豆素的合成。而關于誘導子調控北沙參中香豆素合成的機理，以及如何更有效地協同利用誘導子促進北沙參中香豆素含量的提高，是后續實驗中需要進一步解決的問題。

［1］ 余椿生. 北沙參［J］. 食品與藥品， 2005， 7（4）： 43-44.

［2］ 國家中醫藥管理局《中華本草》編輯委員會. 中華本草［M］. 上海：上海科學技術出版社， 1996： 955.

［3］ 龔曉健， 李萍. 沙參提取物鎮咳祛痰及免疫增強作用研究［J］.中國現代應用藥學， 2000， 17（4）： 258-260. DOI：10.3969/ j.issn.1007-7693.2000.04.002.

［4］ 王中民， 張永祥， 史美育， 等. 北沙參抗突變試驗研究［J］. 上海中醫藥雜志， 1993（5）： 47-48.

［5］ MATSUURA H， SAXENA G， FARMER S W， et al. Antibacterial and antifungal polyine compounds from Glehnia littoralis ssp. leiocarpa［J］. Planta Medica， 1996， 62（3）： 256-259.

［6］ OKUYAMA T， TAKATA M， NISHINO H， et al. Studies on the antitumor-promoting activity of naturally occurring substances.II. Inhibition of tumor-promoter-enhanced phospholipid metabolism by umbelliferous materials［J］. Chemical and Pharmaceutical Bulletin，1990， 38（4）： 1084-1086.

［7］ OKUYAMA E， HASEGAWA Z， MATSUSHITA Z， et al. Analgesic components of glehnia root （Glehnia littoralis）［J］. Nature Medicine，1998， 52（6）： 491-501.

［8］ 李穎， 張欽德， 李慶德. 北沙參外植體消毒方法研究［J］. 安徽農業科學，2010， 38（5）： 2336-2338. DOI：10.3969/j.issn.0517-6611.2010.05.049.

［9］ 徐祝封， 張欽德， 李慶典， 等. 北沙參道地產區種子生產、種苗培育現狀調查與分析［J］. 山東中醫藥大學學報， 2006， 30（6）： 493-496. DOI：10.3969/j.issn.1007-659X.2006.06.026.

［10］ 張新樂. 香豆素衍生物的合成及其生物活性研究［D］. 鄭州： 鄭州大學， 2012.

［11］ 晏瓊， 胡宗定， 吳建勇. 生物和非生物誘導子對丹參毛狀根培養生產丹參酮的影響［J］. 中草藥， 2006， 37（2）： 262-265. DOI：10.3321/ j.issn：0253-2670.2006.02.039.

［12］ VERPOORTE R， HEIJDEN R V D， HOGE J H C， et al. Plant cell biotechnology for the production of secondary metabolites［J］. Cheminform， 2010， 26（8）： 2307-2310.

［13］ ZHAO Jian， ZHU Weihua， QIU Hu. Selection of fungal elicitors to increase indole alkaloid accumulation in catharanthus roseus suspension cell culture［J］. Enzyme & Microbial Technology， 2001，28（7）： 666-672.

［14］ 焦蒙麗， 曹蓉蓉， 陳紅艷， 等. 水楊酸對丹參培養細胞中迷迭香酸生物合成及其相關酶的影響［J］. 生物工程學報， 2012， 28（3）： 320-328.

［15］ 楊英， 鄭輝， 李赟， 等. 茉莉酸甲酯與二氫茉莉酮酸甲酯對懸浮培養的甘草細胞生長和黃酮積累的影響［J］. 植物生理學報， 2008， 44（5）：903-906.

［16］ 葛鋒， 陳朝銀， 王曉東， 等. 超聲波對新疆紫草懸浮培養細胞生長和紫草素合成的影響［J］. 過程工程學報， 2008， 8（1）： 115-119.

［17］ 朱宏濤， 李江， 李元， 等. 茉莉酸甲酯對三七組培苗中總皂苷含量的影響［J］. 西部林業科學， 2014（2）： 72-78. DOI：10.3969/ j.issn.1672-8246.2014.02.012.

［18］ 苗曉燕， 何富強， 張筱梅. 北沙參愈傷組織誘導及懸浮細胞培養研究［J］. 北方園藝， 2014（6）： 104-106.

［19］ 苗志奇， 未作君， 元英進. 水楊酸在紫杉醇生物合成中誘導作用的研究［J］. 生物工程學報， 2000， 16（4）： 509-512. DOI：10.3321/ j.issn：1000-3061.2000.04.021.

［20］ ZHAO Jian， DAVIS L C， VERPOORTE R. Elicitor signal transduction leading to production of plant secondary metabolites［J］. Biotechnology Advances， 2005， 23（4）： 283-333.

［21］ DONG Juane， WAN Guowei， LIANG Zongsuo. Accumulation of salicylic acid-induced phenolic compounds and raised activities of secondary metabolic and antioxidative enzymes in Salvia miltiorrhiza cell culture［J］. Journal of Biotechnology， 2010， 148： 99-104.

［22］ CHEN Jianye， WEN Pengfei， KONG Weifu， et al. Effect of salicylic acid on phenylpropanoids and phenylalanine ammonia-lyase in harvested grape berries［J］. Postharvest Biology & Technology， 2006，40（1）： 64-72.

［23］ 董娟娥， 張康健， 梁宗鎖. 植物次生代謝與調控［M］. 西安： 西北農林科技大學出版社， 2009： 155-157.

［24］ 羅建平， 夏寧， 沈國棟. 茉莉酸甲酯、水楊酸和一氧化氮誘導懷槐懸浮細胞合成異黃酮及細胞結構變化［J］. 分子細胞生物學報， 2009，36（5）： 438-441.

［25］ 余龍江， 朱敏. 茉莉酸甲酯對中國紅豆杉胚性細胞紫杉醇生物合成的影響［J］. 植物科學學報， 1999， 17（4）： 371-374. DOI：10.3969/ j.issn.2095-0837.1999.04.015.

［26］ MILLER M W， MILLER D L， BRAYMAN A A. A review of in vitro bio-effects of inertial ultrasonic cavitation from a mechanistic perspective［J］. Ultrasound in Medicine & Biology， 1996， 22（9）：1131-1154.

［27］ SINISTENA J V. Application of ultrasound to biotechnology： an overview［J］. Ultrasonics， 1992， 30（3）： 180-185.

［28］ 張姝， 余斐， 王傳貴， 等. 超聲波對紅豆杉懸浮細胞生長及紫杉醇釋放的研究［J］. 生物技術， 2001， 11（2）： 14-17. DOI：10.3969/j.issn.1004-311X.2001.02.006.

［29］ 于寒松， 于亞桐， 賈帥， 等. 利用懸浮細胞培養方法提高蕎麥中總黃酮含量的研究［J］. 食品科學， 2009， 30（22）： 37-39. DOI：10.3321/ j.issn：1002-6630.2009.22.004.

Effects of Salicylic Acid， Methyl Jasmonate and Ultrasound on the Production of Cumarins and Growth of Radix Glehniae Callus

MIAO Xiaoyan， ZHU Weihong， ZHANG Xiaomei*， WANG Lin
（Department of Biochemistry， Baoding University， Baoding 071000， China）

The effects of methyl jasmonate （MeJA）， salicylic acid （SA） and ultrasonic treatment on the production of cumarins （imperatorin， isoimperatorin and psoraleae as measured by HPLC） and growth of callus tissue of Radix Glehniae were explored. The results showed that SA and MeJA could cause growth inhibition in callus tissue， while low-intensity ultrasound treatment for a certain time had a positive effect on callus vitality. Additionally， the production of cumarin could be promoted to different extents by all three factors. When the concentration of salicylic acid was 8 mg/L， the content of imperatorin reached its maximum level， which was 3.8 times higher than the control， but SA had only a marginal impact on psoralen. When the concentration of salicylic acid increased to 16 mg/L， the production of psoralen reached its maximum level， which was 1.7 times higher than the control. When the concentration of salicylic acid further rose to 28-30 mg/L，the maximum content of isoimperatorin and total cumarins was achieved showing a 2.33-fold increase compared with the control. The MeJA concentration of 400 μmol/L resulted in maximum production of psoralen and isoimperatorin， which was increased by 6.09 and 5.53 times in comparison with the control， respectively； meanwhile the maximum content of total cumarins was observed， which was 5.11 times higher than that of the control. After ultrasound treatment for 30 min，the production of imperatorin， isoimperatorin and total cumarins reached their maximum levels （5.51， 3.69 and 11.90 μg/g），which were 5.15， 4.20 and 3.55 times higher than those of the control， respectively； when ultrasonic treatment lasted 10 min，the maximum production of psoralen was found， which was 1.5 times higher than that of the control. In summary， compared with ultrasonic treatment and SA， MeJA could more effectively promote the production of coumarins in Radix Glehniae.

Radix Glehniae； cumarin； methyl jasmonate； salicylic acid； ultrasound

10.7506/spkx1002-6630-201609034

Q945.1

A

1002-6630（2016）09-0181-05

苗曉燕， 朱維紅， 張筱梅， 等. 水楊酸、茉莉酸甲酯及超聲波對北沙參愈傷組織生長及產香豆素的影響［J］. 食品科學，2016， 37（9）： 181-185. DOI：10.7506/spkx1002-6630-201609034. http：//www.spkx.net.cn

MIAO Xiaoyan， ZHU Weihong， ZHANG Xiaomei， et al. Effects of salicylic acid， methyl jasmonate and ultrasound on the production of cumarins and growth of Radix Glehniae callus［J］. Food Science， 2016， 37（9）： 181-185. （in Chinese with English abstract） DOI：10.7506/spkx1002-6630-201609034. http：//www.spkx.net.cn

2015-06-22

保定學院重點基金資助項目（2010z03）；河北省教育廳高等學校科學研究項目（Z2012007）

苗曉燕（1980—），女，副教授，碩士，研究方向為生物學。E-mail：miaoxiaoyan3205@126.com

*通信作者：張筱梅（1957—），女，教授，本科，研究方向為生物學。E-mail：zhxm06@163.com