納豆凍干粉對抗生素介導小鼠免疫調節作用及細胞因子分泌的影響

吳高峰，黃占旺*，劉宛玲，牛麗亞，王素貞，黃永平

（江西農業大學食品科學與工程學院，江西省天然產物與功能食品重點實驗室，江西 南昌 330045）

納豆凍干粉對抗生素介導小鼠免疫調節作用及細胞因子分泌的影響

吳高峰，黃占旺*，劉宛玲，牛麗亞，王素貞，黃永平

（江西農業大學食品科學與工程學院，江西省天然產物與功能食品重點實驗室，江西 南昌 330045）

本實驗旨在探究納豆凍干粉（natto lyophilized powder，NLP）對昆明小鼠免疫功能及其細胞因子分泌的影響。選取體質健康昆明小鼠128 只，隨機分為8 組：空白對照組（C組）、調節組（R0組和RN1、RN2、RN3組）4 組、預防組（P0、PN組）2 組、模型組（M組）。除C組外，其他各組灌胃3 d抗生素溶液，之后R0組灌胃生理鹽水，RN1～RN3組灌胃不同劑量的NLP溶液；預防組每天繼續灌胃抗生素溶液，8 h后P0、PN組分別灌胃生理鹽水和NLP溶液；M組灌胃抗生素溶液。30 d后測定免疫指標及其細胞因子分泌量的變化情況。結果表明：與M組相比，低劑量的NLP能夠極顯著增加小鼠的脾臟指數和胸腺指數（P＜0.01），RN1、RN2、RN3組小鼠血清中白細胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、IL-10、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）的分泌量極顯著增加（P＜0.01），同時，RN1、RN2、RN3組均能夠極顯著增加小鼠血清中誘導型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）活力（P＜0.01），RN1、RN3組小鼠血清中白蛋白、球蛋白的含量和二者比值（白球比）及NO水平顯著或極顯著增加（P＜0.05或P＜0.01）。C組、調節組、預防組小鼠的血清溶血素水平較對照組均極顯著升高（P＜0.01）。RN1、RN2、RN3、PN組較M組均能夠極顯著增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬作用（P＜0.01）。與C組相比，RN1、RN2、RN3組小鼠的半數溶血值顯著或極顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）。RN3和PN組可極顯著增加巨噬細胞吞噬百分率、雞紅細胞的吞噬數（P＜0.01）。結果表明NLP具有免疫增強作用和增加細胞因子分泌的作用。

納豆凍干粉；抗生素；免疫調節作用

免疫是機體必需的一種生理功能，它包括特異性免疫和非特異性免疫。免疫即機體通過識別自身與非己的物質，從而產生免疫應答，清除抗原性異物，維持機體正常功能［1］。免疫系統是人體的生命防線，它由自身免疫系統和特異性免疫系統組成，它能夠對機體進行免疫監視、防御和調控［2］，由免疫器官、免疫細胞以及免疫因子組成。

目前我國抗生素濫用現象非常嚴重，中國的抗生素使用率超過七成，是歐美國家的兩倍多。而抗生素能夠通過抑制機體中微生物的生長或者殺死微生物使得機體菌群失調，從而引起機體消化系統的潰敗，激起機體的免疫反應［3］。研究表明，氨芐青霉素能夠降低中性白細胞（具有趨化、吞噬、殺菌作用）介導的致病菌殺滅功能［4］和增加血液中嗜堿性粒細胞（能夠促發過敏反應）的釋放［5］。

納豆是日本傳統的健康發酵產品［6］。納豆凍干粉（lyophilized natto powder，NLP）是利用納豆菌發酵大豆制成納豆，然后添加脫脂奶粉作為凍干保護劑凍干后粉碎制成的，其制作方法簡便、適宜工業化生產，且活菌數高、貯存方便。關于納豆及其產品對免疫的影響已有一些研究報道：張靜等［7］研究發現納豆片具有增強小鼠免疫功能的作用；方少琳［8］和彭亮［9］等研究發現納豆凍干粉能提高小鼠免疫功能；沈柱英等［10］研究發現納豆菌糖肽對小鼠有免疫調節作用；由于抗生素濫用的現象越來越嚴重［11］，且抗生素的攝入抑制了人類免疫系統的正常功能［12］，而納豆凍干粉對于免疫功能的調節效果明顯，因此，本研究考察納豆凍干粉對抗生素介導小鼠的免疫調節作用，以期進一步研究納豆凍干粉對動物腸道菌群的調節作用和對免疫功能的影響。

1 材料與方法

1.1 材料、動物與試劑

納豆菌BN-1，江西農業大學重點實驗室微生物實驗室保藏；納豆，自制。納豆凍干粉（NLP）由納豆添加脫脂奶粉作為凍干保護劑真空冷凍干燥制成，活菌數為1×1011CFU/g。

SPF級雌性昆明小鼠，體質量18～22 g，湖南斯萊克景達實驗動物有限公司。

鹽酸林可霉素、氨芐青霉素、四甲基偶氮唑藍（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）、伴刀豆球蛋白（concanavalin A，ConA）、豚鼠血清、綿羊紅細胞、文齊氏試劑、二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）、Hank's液、RPMI-1640培養基 北京Solarbio公司；頭孢唑啉鈉 梯希愛（上海）化成工業發展有限公司；胎牛血清 北京全式金生物技術有限公司；小鼠血清白細胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、IL-10、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）酶聯免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒武漢優爾生生物科技有限公司；NO、誘導型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）試劑盒 南京建成生物工程研究所。

1.2 儀器與設備

UV-5200PC型紫外-可見分光光度計 上海元析儀器股份有限公司；Scientz-10N型真空冷凍干燥機 寧波新芝生物科技股份有限公司；Multiskan MK3酶標儀、3121型CO2培養箱 美國Thermo Labsystems公司；XD-202倒置顯微鏡 南京江南永新光學有限公司；恒溫培養箱 上海躍進醫療器械有限公司；TGL-20000-cR高速冷凍離心機 上海安亭科學儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 動物分組及其處理

NLP的有效活菌數為0.5×1010～1.0×1011CFU/g，將NLP配制成10、100、400 mg/mL的溶液，用于小鼠灌胃實驗。雌性昆明小鼠128 只，體質量18～22 g，在SPF級環境中（光照比50%、相對濕度50%、室溫24～26 ℃、全新風單向流動）適應性飼養5 d后，隨機分為8 組，每組16 只（每組分為兩批，組間體質量差異≤0.5 g）：空白對照組（C組）、調節組（R0組和RN1、RN2、RN3組）4 組、預防組（P0、PN組）2 組、模型組（M組）。C組灌胃生理鹽水；其余組灌胃抗生素溶液3 d（鹽酸林可霉素、頭孢唑林鈉及氨芐青霉素的混合液，3 種抗生素質量濃度均為100 mg/mL）建模后，R0組灌胃生理鹽水，RN1～RN3組分別灌胃低、中、高（109、1010、1011CFU/g）劑量的NLP；預防組每天繼續灌胃抗生素溶液8 h后，P0組灌胃生理鹽水，PN灌胃中劑量的NLP（1010CFU/g）；M組繼續灌胃抗生素溶液。實驗期為30 d，灌胃量為0.5 mL/只。將其中一批用于血清溶血素實驗和腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗，另一批進行免疫器官指數、脾淋巴細胞轉化實驗和細胞因子的測定。

1.3.2 免疫力增強實驗

1.3.2.1 免疫器官指數測定

小鼠建模后連續灌胃30 d并稱體質量，氯仿麻醉解剖，心室穿透取血1 mL，4 000 r/min離心10 min，分離血清并分裝，-80 ℃凍存。無菌條件下取小鼠胸腺和脾臟，及時稱質量。免疫器官質量與體質量的比即為免疫器官指數。

1.3.2.2 ConA誘導小鼠脾淋巴細胞轉化實驗

建模30 d后，無菌條件下取小鼠脾臟，磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）沖洗兩遍并研磨充分。取濾過液，1 000 r/min離心10 min，棄上清液，Hank's液洗2～3 遍。離心取沉淀，RPMI-1640培養基重懸，臺盼藍染色計數活細胞，活細胞比例不得低于95%，調整細胞濃度至3×106個/mL。于96 孔板內每孔加入90 μL細胞懸液和10 μL ConA溶液（終質量濃度為5 mg/mL），置5% CO2培養箱中37 ℃培養68 h取出，每孔加入10 μL終質量濃度為5 mg/mL的MTT。繼續培養4 h取出，吸棄上清液90 μL，每孔加入100 μL DMSO，待結晶紫溶解后，用酶標儀在570 nm波長處檢測光密度（OD570nm）值。

1.3.2.3 小鼠溶血素水平的測定

建模26 d后，每組取4 只小鼠腹腔注射0.2 mL體積分數2%的綿羊紅細胞（sheep red blood cell，SRBC）進行免疫，4 d后依照1.3.2.1節方法取血清。用生理鹽水將血清稀釋200 倍，取1 mL置于試管內，依次加入體積分數10%的SRBC 0.5 mL、豚鼠血清1 mL（豚鼠血清提前用PBS按照體積比1∶8稀釋）。另設置一不加血清的對照管（以PBS代替血清）。37 ℃恒溫水浴反應20 min，冰浴終止反應，2 000 r/min離心10 min，取1 mL上清液，加入文齊氏試劑3 mL。同時另取一支試管測定半數溶血時的光密度值，加體積分數10%的SRBC 0.25 mL，加文齊氏試劑至4 mL，充分混勻。將加文齊氏試劑的試管放置10 min后，于540 nm波長處以對照管作為空白，分別測定各管的OD540nm值。依照公式（1）計算半數溶血值（HC50）。

1.3.2.4 小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗（半體內法）

建模30 d后，每組取4 只小鼠腹腔注射20%的雞紅細胞懸液1 mL，間隔30 min，脫頸椎處死，仰位固定后，腹腔注射2 mL生理鹽水，轉動鼠板1 min，吸出2 mL腹腔洗液，平均分滴于6 孔板兩個孔內，編號后置于CO2培養箱中37 ℃溫育30 min，加入2 mL無菌生理鹽水漂洗2 次，以除去未貼壁的細胞。晾干后，加入1 mL丙酮-甲醇（1∶1，V/V）溶液固定2 min，加入1～1.5 mL Giemsa工作液染色3 min，加入4 mL蒸餾水漂洗2 次，晾干。在400 倍倒置顯微鏡下計數巨噬細胞，每個孔計數100 個，按照下式（2）、（3）計算吞噬百分率和吞噬指數。1.3.3 血清中IL-2、IL-10、TNF-α、IFN-γ、iNOS、NO分泌量的檢測

按照1.3.2.1節方法制備血清，采用ELISA試劑盒測定血清中IL-2、IL-10、TNF-α、IFN-γ含量；以NOS試劑盒測定iNOS活力，酶活力單位（U）定義為每毫升血清每分鐘產生1 nmol NO；采用Griess法測定NO含量，嚴格按照試劑盒的操作規范進行。

1.3.4 小鼠生長性能及其血清中白蛋白、球蛋白含量和二者比值（白球比）的測定

記錄各組小鼠建模前、建模后、灌藥后15 d、灌藥后30 d、停灌后15 d的體質量，對應的4 個時間段分別記為建模期、灌胃前期、灌胃后期、停灌期，計算每個時間段的體質量增加比（與前一階段的體質量相比）。依照1.3.2.1節方法取血清，進行白蛋白和血清總蛋白含量的測定。

1.4 數據處理

2 結果與分析

2.1 NLP對抗生素介導小鼠免疫調節作用的影響

2.1.1 NLP對抗生素介導小鼠免疫器官指數的影響

胸腺和脾臟是機體重要的免疫器官，胸腺能夠產生T淋巴細胞和分泌胸腺激素及激素類物質，具有內分泌機能［13］，脾臟是哺乳動物最大的淋巴器官，含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞，是機體細胞免疫［14］和體液免疫的中心。NLP中含有大量的納豆芽孢桿菌菌體，而胞壁糖、肽聚糖、糖蛋白［15］等菌體成分可作為抗原刺激免疫器官。由表1可知，RN3組小鼠的脾臟指數明顯高于R0組。與M組相比，除R0組和PN組外，其他組小鼠的脾臟指數均顯著或極顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）；與M組相比，各組小鼠的胸腺指數均顯著或極顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）。這說明抗生素的介導使小鼠的免疫器官指數下降，而NLP能夠對其進行調節和恢復，提高小鼠的脾臟指數和胸腺指數，具有很好的免疫調節作用。

2.1.2 NLP對抗生素介導小鼠脾淋巴細胞轉化能力的影響

淋巴細胞是特異性免疫的功能性細胞，它能釋放抗體，對外來的抗原進行有效抵御。如圖1所示，C組、RN1～RN3組、P0組和PN組小鼠的脾淋巴細胞轉化因子水平均極顯著高于M組（P＜0.01），而R0組小鼠的脾淋巴細胞轉化因子水平顯著高于M組（P＜0.05），說明NLP有助于提高小鼠脾淋巴細胞轉化因子水平，有效調節或預防小鼠免疫低下水平。使用抗生素建模后，小鼠的抵抗力大幅度下降，當灌胃NLP后，小鼠脾淋巴細胞的分泌功能逐漸增強，RN1～RN3組小鼠的脾淋巴細胞轉化因子水平均高于R0組，且均極顯著高于M組，說明NLP能夠調節小鼠脾淋巴細胞的分泌轉化，且效果明顯優于灌胃生理鹽水（R0組）對脾淋巴細胞轉化的調節。以上結果說明NLP對抗生素介導小鼠的脾淋巴細胞轉化作用影響顯著。

2.1.3 NLP對抗生素介導小鼠血清溶血素水平的影響

用SRBC免疫后，小鼠血清出現溶血素（SRBC抗體），在補體豚鼠血清的作用下，發生溶血反應，釋放血紅蛋白，可根據血紅蛋白確定血清溶血素的含量，采用HC50反映小鼠機體的免疫功能狀態。由圖2可知，對照組（N組）小鼠的HC50均極顯著低于其余各組（P＜0.01），RN1～RN3組小鼠的HC50均顯著或極顯著高于C組（P＜0.05或P＜0.01），且明顯高于R0組，說明NLP對抗生素介導小鼠有促進免疫調節作用。

2.1.4 NLP對抗生素介導小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的影響

巨噬細胞能夠固定細胞或游離細胞殘片，吞噬消化病原體，并激活其他免疫細胞作用病原體，清除體內的衰老或凋亡的細胞，以及免疫復合物和病原體等抗原性異物［16］。體內腹腔巨噬細胞能夠吞噬外來抗原雞紅細胞，從而可以判斷巨噬細胞吞噬功能。由圖3A、B可知，與M組相比，吞噬指數與NLP的劑量成正比，吞噬百分率與NLP的劑量成反比，表明灌胃NLP后，小鼠腹腔中吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數下降，被吞噬的雞紅細胞數增加。由圖3C、D可知，被吞噬的雞紅細胞形態類似空泡且邊緣較整齊，細胞核隱約可見。與P0組相比，RN3組和PN組均能明顯增強小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能和提高巨噬細胞的吞噬百分率，RN1～RN3組和PN組能夠明顯增加雞紅細胞的吞噬指數。以上結果說明NLP具有很強的吞噬能力，能夠有效預防抗生素介導小鼠免疫能力低下的狀態。根據動物免疫檢驗方法［17］，以上結果表明NLP具有免疫增強作用。

2.2 NLP對抗生素介導小鼠細胞因子分泌功能的影響

細胞因子是介導抗體免疫應答和炎癥反應的物質，TNF-α是由巨噬細胞產生的能殺傷腫瘤細胞和促進B淋巴細胞增生的細胞［18］。IL-10具有很強抗炎及免疫抑制活性，它能抑制IL-2、IFN-γ及促炎因子的產生和釋放［19］。IFN-γ在效應細胞內可以通過多種信號轉導途徑發揮抗病毒、抗腫瘤和免疫調節作用。這些細胞因子之間的交互作用能誘導其他相關基因表達，進而介導一系列細胞效應，如提高巨噬細胞的吞噬作用、加強T細胞的特異性細胞毒性作用等［20］。

由表2可知，與C組相比，抗生素（M組）能極顯著降低小鼠血清中IL-2、IL-10、TNF-α、IFN-γ的水平（P＜0.01），調節組小鼠血清中IL-2、IL-10、TNF-α、IFN-γ的含量極顯著高于M組（P＜0.01）。與M組相比，調節組小鼠血清中IL-2、IL-10的釋放量極顯著增加（P＜0.01）。與M組相比，PN組能極顯著增加小鼠血清中IL-2、IL-10、TNF-α、IFN-γ的釋放量（P＜0.01），且較P0組也可明顯增加TNF-α的釋放，調節TNF-α水平到正常水平。RN3組小鼠血清中IL-2、IL-10、TNF-α、IFN-γ的水平顯著或極顯著低于C組（P＜0.05或P＜0.01），PN組IL-10的分泌量極顯著低于C組（P＜0.01），且低于P0組。NLP能夠通過調節IL-10的分泌，間接調節小鼠免疫能力低下的癥狀。以上結果表明NLP能有效預防小鼠的免疫能力低下，恢復細胞因子的分泌，進而提高小鼠免疫功能。

NOS能夠催化L-精氨酸和分子氧反應生成NO，NO與親核性物質生成有色化合物，通過測定光密度值即可計算出NOS活力。NOS可通過IFN-γ、TNF-α和脂多糖等刺激激活，生成高水平的NO，而多功能分子NO對NLRP3炎性體介導的免疫應答起負調控作用［21］。Griess法運用NO在酸性條件下能夠與重氮鹽磺胺產生重氮反應，然后與萘基乙烯基二胺發生偶合反應，發生顏色變化且與NO含量成正比的原理來檢測NO水平。各組的iNOS的活力均極顯著高于M組（P＜0.01），而各組間無差異（P＞0.05）。RN2組和RN3組的NO水平極顯著高于M組（P＜0.01），RN3組的NO水平極顯著高于C組（P＜0.01），以上結果說明NLP能夠有效調控NO的釋放進而調節免疫。

2.3 NLP對抗生素介導小鼠生長性能的影響

由表3可知，M組小鼠體質量增加比在建模期、灌胃前期、灌胃后期均極顯著高于C組、調節組、預防組（P＜0.01），M組小鼠在停灌期的體質量負增長比也是最高的，這與Kim等［22］研究結果基本一致。建模期調節組和預防組由于灌胃抗生素溶液，導致小鼠腸道內微生物大量死亡、腸道功能下降，小鼠體質量不斷增加；灌胃前期調節組小鼠的體質量增加比呈現負增長，說明NLP能夠有效調節小鼠腸道菌群失調狀態，從而部分恢復小鼠腸道功能；灌胃后期，PN組小鼠體質量增加比呈負增長，說明NLP能夠通過恢復小鼠腸道正常功能而預防腸道菌群失調的狀態；停灌期由于NLP中的菌群繼續在小鼠腸道內繁殖，有助于恢復小鼠腸道正常消化功能，小鼠體質量減輕。在抗生素介導后，小鼠腸道由于益生菌的死亡，營養物質不能及時被消化，小鼠腸道糞便積留，進而影響小鼠腸道上皮細胞的免疫作用。

血清白蛋白和球蛋白是血清蛋白質的一部分，它們能抵抗抗原產生免疫反應來保護機體，白球比的變化反映機體免疫力的強弱。免疫功能抑制或者降低會造成血清球蛋白降低，而白蛋白的降低會影響免疫力。由表3可知，模型組小鼠血清中的白蛋白、球蛋白和白球比的值均低于實驗組，高劑量NLP調節組的白蛋白含量以及中劑量的NLP預防組的白蛋白和球蛋白的含量均高于空白對照組，說明NLP能夠調節小鼠的血清蛋白的水平，從而調節抗生素介導小鼠免疫低下的水平。

3 結 論

本實驗使用抗生素建立腸道菌群失調小鼠模型，研究納豆凍干粉對小鼠免疫調節作用以及對細胞因子分泌水平的影響。實驗結果表明：與模型組相比，RN1組能夠增加小鼠脾臟指數和胸腺指數，RN1～RN3組能夠增加小鼠血清中IL-2、IL-10、TNF-α、IFN-γ的分泌量，增強iNOS活力和小鼠血清中的白蛋白、球蛋白含量和白球比，RN1、RN3組能明顯增加小鼠血清中NO水平。各組的小鼠血清溶血素水平較對照組明顯升高。RN1～RN3組、PN組均能夠增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬作用。與C組相比，調節組小鼠的半數溶血值升高。RN3組和PN組小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能增強，巨噬細胞吞噬百分率、雞紅細胞的吞噬數增加。RN3組小鼠血清iNOS活力和白蛋白含量升高，PN組小鼠血清中白蛋白和球蛋白含量升高。與R0組相比，RN3能夠增加小鼠脾臟指數和提高IL-20的分泌，RN2、RN3能夠增加小鼠IL-2的分泌、巨噬細胞的吞噬功能和血清溶血素水平。與P0組相比，PN組小鼠TNF-α的釋放增加、巨噬細胞的吞噬功能增強。綜合以上結果，高劑量的NLP（RN3組）對抗生素介導小鼠的免疫調節作用效果最佳。

建立腸道菌群失調模型后，小鼠腸道內益生菌大量死亡，營養物質不能被及時消化，導致小鼠腸道糞便積留，進而影響小鼠腸道上皮細胞的免疫作用。NLP中的胞壁糖、肽聚糖等菌體成分可以作為抗原刺激免疫器官，促進淋巴細胞和巨噬細胞對外來抗原進行抵御和吞噬消化，激活免疫細胞作用病原體。NLP能夠恢復小鼠細胞因子的分泌，進而提高免疫功能。本實驗結果表明，NLP具有免疫增強作用和增加細胞因子分泌的作用。研究表明，免疫功能與腸道菌群間存在著某種聯系［23-25］，而NLP對免疫功能和腸道菌群之間的關系還有待進一步研究。

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Effect of Lyophilized Natto Powder on Antibiotics-Mediated Immunomodulation and Cytokine Secretion in Mice

WU Gaofeng， HUANG Zhanwang*， LIU Wanling， NIU Liya， WANG Suzhen， HUANG Yongping
（Jiangxi Key Laboratory of Natural Product and Functional Food， College of Food Science and Engineering，Jiangxi Agricultural University， Nanchang 330045， China）

The effect of natto lyophilized powder （NLP） on antibiotics-mediated immunomodulation and cytokine secretion in SPF mice was explored in the present study. Totally 128 healthy mice were selected and divided randomly into 8 groups：control group （C）， four regulation groups （RN0， 1， 2 and 3）， two prevention groups （P0 and PN）， and model group （M）. The mice in all groups except C were administered with antibiotic solution for 3 days. Thereafter， the mice from group R0 were gavaged with normal saline， while those from group RN1， 2 and 3 were given NLP solution at three different dosages，respectively. The mice from the two prevention groups were continuously daily administered with antibiotic solution； 8 hour later， groups P0 and PN were respectively lavaged with normal saline and NLP solution. The mice in group M were simply given antibiotic solution during the entire administration period of 30 days. Immunomodulatory effects of NLP in mice and its effect on cytokine secretion were determined. Results showed that low-dose NLP resulted in a significant elevation in spleen and thymus indices in mice compared with the model group （P < 0.01）. The production of serum IL-2， IL-10， TNF-alpha，and IFN-gamma extremely significantly increased in groups RN1， RN2 and RN3 compared with the model group（P < 0.01）. In addition， the mice from the three prevention groups showed an extremely significant increase in inducible nitric oxide synthase （iNOS） activity in serum （P < 0.01）， and serum albumin and globulin concentrations and their ratio as well as serum NO level were significantly or extremely significantly higher in the mice from groups RN1 and RN3（P < 0.05 or P < 0.01）. The serum hemolysin levels in mice from the control， regulation and prevention groups were significantly higher than those in the group N （P < 0.01）. The phagocytic capacity of peritoneal macrophages from mice in groups RN1， RN2， RN3 and PN was significantly higher than that of group M. Compared with the control group， the half value of hemolysis （HC50） in groups RN1， RN2 and RN3 was significantly or extremely significantly increased （P < 0.05 or P < 0.01）. Groups RN3 and PN exhibited an extremely significant increase in the percentage of macrophages engaged in phagocytosis and the percent phagocytosis of chicken red blood cells （P < 0.01）. Therefore， NLP can enhance immune function and increase the secretion of cytokines.

natto lyophilized powder （NLP）； antibiotics； immunomodulatory effect

10.7506/spkx1002-6630-201609036

TS201.3

A

1002-6630（2016）09-0192-06

吳高峰， 黃占旺， 劉宛玲， 等. 納豆凍干粉對抗生素介導小鼠免疫調節作用及細胞因子分泌的影響［J］. 食品科學， 2016，37（9）： 192-197. DOI：10.7506/spkx1002-6630-201609036. http：//www.spkx.net.cn

WU Gaofeng， HUANG Zhanwang， LIU Wanling， et al. Effect of lyophilized natto powder on antibiotics-mediated immunomodulation and cytokine secretion in mice［J］. Food Science， 2016， 37（9）： 192-197. （in Chinese with English abstract） DOI：10.7506/spkx1002-6630-201609036. http：//www.spkx.net.cn

2015-06-09

國家自然科學基金地區科學基金項目（31160337）

吳高峰（1989—），男，碩士研究生，研究方向為食品微生物。E-mail：w1989gf@126.com

*通信作者：黃占旺（1964—），男，教授，學士，研究方向為食品微生物。E-mail：huangzw@163.com