自身抗體的聯(lián)合檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義

郭 卉，董瑤佳，吳 冰

（1、九江市第一人民醫(yī)院，江西九江332000；2、九江市婦幼保健醫(yī)院，江西九江332000）

自身抗體的聯(lián)合檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義

郭 卉1，董瑤佳2，吳 冰2

（1、九江市第一人民醫(yī)院，江西九江332000；2、九江市婦幼保健醫(yī)院，江西九江332000）

目的觀察抗核抗體（ANA）與抗核抗體譜（ANAs）聯(lián)合檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義。方法分別用間接免疫熒光法和免疫印跡法檢測自身抗體。結(jié)果在SLE組中，ANA陽性率為94.2%，抗nRNP/Sm抗體陽性率為41.7%，抗Sm抗體陽性率為35.0%，抗SSA抗體陽性率為76.7%，抗SSB抗體陽性率為26.7%，抗dsDNA抗體陽性率為22.5%，抗核小體抗體陽性率為32.5%，抗組蛋白抗體陽性率為17.5%，抗核糖P蛋白抗體陽性率為33.3%；SLE組與健康對照組的各項結(jié)果相比較均有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論自身抗體的聯(lián)合檢測有助于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡；自身抗體；聯(lián)合檢測

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種臨床表現(xiàn)有多系統(tǒng)損害癥狀的慢性系統(tǒng)性自身免疫病，常累及全身多系統(tǒng)、多器官，患者血清具有以抗核抗體為主的大量不同的自身抗體，并由此導(dǎo)致組織和器官的損傷［1］。自身抗體的檢測系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷的重要指標(biāo)，因此本次研究選取了幾種與SLE相關(guān)性較好的指標(biāo)［2］，包括ANA、抗nRNP/Sm抗體、抗Sm抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體、抗dsDNA抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體和抗核糖P蛋白抗體，通過分析抗核抗體和抗核抗體譜的檢測結(jié)果來探討其在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義。

1 資料與方法

1.1 觀察對象篩選2014年1月至2015年12月江西省九江市第一人民醫(yī)院院門診及住院系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者120例，其中男性8例，女性112例，年齡16～62歲，均符合美國風(fēng)濕病協(xié)會（ARA）于1997年修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)；另選取100例健康體檢者作為對照組，其中男性10例，女性90例，年齡22～58歲。

1.2 標(biāo)本處理抽取受檢者靜脈血2～3ml，置于離心機中以3500r/min離心5min后分離血清。

1.3 實驗試劑抗核抗體（ANA）檢測試劑盒由北京和杰創(chuàng)新生物醫(yī)學(xué)科技有限公司提供；抗核抗體譜（ANAs）檢測試劑盒由歐盟（德國）醫(yī)學(xué)實驗診斷有限公司提供。

1.4 實驗儀器奧林巴斯BX41熒光顯微鏡；低速離心機6K-D（長沙鑫奧儀器儀表有限公司）；轉(zhuǎn)移脫色搖床TS-8型（海門市其林貝爾儀器制造有限公司）。

1.5 實驗方法抗核抗體檢測采用間接免疫熒光法，抗核抗體譜檢測采用免疫印跡法，實驗操作均嚴(yán)格按照說明書進行。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 19.0軟件進行分析，SLE組與健康對照組之間的比較采用卡方檢驗，以P＜0.05為差異有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

SLE組與健康對照組ANA及ANAs檢測結(jié)果見表1。

3 討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是自身免疫介導(dǎo)的，以免疫性炎癥為突出表現(xiàn)的彌漫性結(jié)締組織病。血清中出現(xiàn)以抗核抗體為代表的多種自身抗體和多系統(tǒng)受累是SLE的主要臨床特征［3］，臨床表現(xiàn)以面部紅斑、頭痛發(fā)熱、關(guān)節(jié)腫痛及下肢水腫為主。系統(tǒng)性紅斑狼瘡以女性發(fā)病較多，與疾病的發(fā)作呈正相關(guān)，這與女性的雌激素水平較高，而雌激素能增強T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的反應(yīng)性有關(guān)［4］。

根據(jù)表1結(jié)果可知，SLE組與健康對照組中的各項結(jié)果相比較均有顯著性差異（P＜0.05），說明這些項目對于診斷SLE都是必不可少的。

抗核抗體（ANA）是一組將自身真核細(xì)胞的各種細(xì)胞核成分作為靶抗原的自身抗體的總稱。一般應(yīng)用免疫熒光的方法檢測。ANA在未治療的SLE患者中的滴度較高，在大多數(shù)自身免疫疾病中均可呈現(xiàn)陽性，正常老年人也可由低滴度的ANA。未經(jīng)治療的SLE患者幾乎95%以上都有抗核抗體，且滴度較高，所以抗核抗體檢測是SLE的最佳篩選試驗［5］。本文中，SLE組中ANA陽性者共113例，占94.2%；而在健康對照組中的ANA陽性者共3例。

抗Sm抗體是SLE的血清標(biāo)志性抗體，已列入SLE的診斷標(biāo)準(zhǔn)。約30%～40%的SLE患者抗Sm抗體陽性，此抗體陰性不能排除SLE的診斷。本次研究中SLE組的抗Sm抗體陽性檢出率為35.0%，健康對照組中未檢出養(yǎng)性，此結(jié)果與文獻報道相似［6］。相對于抗dsDNA抗體而言，抗Sm抗體水平不與SLE疾病的活動性相關(guān)，亦不與SLE的任何臨床表現(xiàn)相關(guān)，治療后的SLE患者也可存在抗Sm抗體陽性。抗Sm抗體的檢測對早期、不典型的SLE或治療后的回顧性診斷具有很大幫助。

由于Sm和RNP是同一分子復(fù)合物（RNA-蛋白質(zhì)顆粒）中的不同抗原位點，兩種抗原具有相關(guān)性，因此抗Sm抗體陽性常伴有抗RNP抗體陽性，單一的抗Sm抗體或抗RNP抗體陽性較少見［7］。根據(jù)表1可知抗RNP/Sm抗體在SLE組中共檢出50例，陽性率為41.7%，在健康對照組中未檢出陽性。

抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗體，該抗體陽性為SLE的重要診斷指標(biāo)之一。70%～90%的活動期SLE患者該抗體陽性，效價較高，并與病情相關(guān)，但其敏感性較低［8］，本次研究中SLE組陽性者共27例，健康體檢組中未檢出陽性。部分活動期SLE患者抗dsDNA抗體結(jié)果為陰性，可能是由于患者血清中過多的游離的DNA抗原與相應(yīng)的DNA抗體結(jié)合所致。因此當(dāng)抗dsDNA抗體結(jié)果為陰性時不能排除SLE的診斷［9］。

表1 SLE組與健康對照組的自身抗體檢測結(jié)果

本文中，SLE組中抗SSA抗體陽性共92例，占76.7%，健康對照組中檢出陽性2例。抗SSA抗體能直接參與組織的病理損害，特別是皮膚的損害。有報道認(rèn)為ANA陰性SLE患者抗SSA抗體檢出率顯著高于ANA陽性患者［10］，因此在臨床癥狀符合但ANA為陰性時，需進一步檢測抗核抗體譜，避免漏診。

抗SSB抗體主要見于干燥綜合征，是干燥綜合征的特異性抗體。SLE患者中也可檢測到，但只占10%～20%。抗SSB抗體常與抗SSA抗體同時存在。

核小體是真核生物細(xì)胞染色的基本單位，當(dāng)細(xì)胞受到致病因素作用時，細(xì)胞發(fā)生線粒體腫脹，細(xì)胞膜破裂并導(dǎo)致核小體的釋放。已有資料表明核小體是SLE的發(fā)病過程中一種主要的自身抗原，它可以刺激B細(xì)胞的增生活化，從而激活B細(xì)胞，產(chǎn)生抗體（即抗核小體抗體、抗dsDNA抗體），并形成抗原抗體復(fù)合物參與SLE的發(fā)病［11］。抗核小體抗體對SLE的敏感性高、特異性強，是SLE診斷的標(biāo)志性抗體之一［12］。有臨床資料顯示，在抗ds-DNA抗體陰性的SLE患者中，有15%～19%為抗核小體抗體。因此，聯(lián)合檢測抗dsDNA抗體及抗核小體抗體可提高SLE的診斷率［13］。本次研究中，SLE組中檢出抗核小體抗體陽性39例，健康對照組中未檢出陽性。

本文中，抗組蛋白抗體在SLE組中的檢出率為33.3%，在健康對照組中未檢出。抗組蛋白抗體檢測對結(jié)締組織病，尤其是藥物性狼瘡的診斷和鑒別診斷有重要意義。抗組蛋白抗體可以在多種結(jié)締組織病中出現(xiàn)，因此不具有診斷特異性。

抗核糖體P蛋白抗體是SLE的高度特異性血清學(xué)標(biāo)志，在其他自身免疫性疾病和感染性疾病中都未檢測到。某些抗核抗體陰性的SLE患者體內(nèi)可檢測出抗核糖體P蛋白抗體［14］。

綜上所述，由于SLE患者血清中可出現(xiàn)多種自身抗體，且不同自身抗體之間的敏感性和特異性有所差異，因此切不可以某一項的檢測結(jié)果而做出診斷，而必須以抗核抗體和抗核抗體譜的聯(lián)合檢測結(jié)果做出診斷，只有這樣才能避免因單項檢測造成的漏檢情況，有利于提高檢出率［15］。

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R446.62，R593.24+1

A

1674-1129（2016）05-0644-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.05.036

2016-05-23；

2016-07-04）