MYH9在大腸癌中的表達及臨床意義

楊素麗,謝 風,孫景春,楊照微，王 海

(吉林大學中日聯誼醫院 檢驗科，吉林 長春130033)

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MYH9在大腸癌中的表達及臨床意義

楊素麗,謝 風,孫景春,楊照微，王 海*

(吉林大學中日聯誼醫院 檢驗科，吉林 長春130033)

目的 探討非肌肉肌球蛋白ⅡA在大腸癌癌組織中的表達及臨床意義。方法 采用免疫組織化學方法檢測MYH9蛋白在90例大腸癌及相應癌旁組織中的表達，探討MYH9在不同階段大腸癌中表達及其與臨床病理特征的相關性。結果 MYH9蛋白在大腸癌組織中陽性表達強度明顯高于癌旁組織(P<0.05)。并且其表達水平與TNM分期、有無淋巴結轉移及細胞分化程度顯著相關(P<0.05)，而與患者的年齡、性別、腫瘤類別無關(P>0.05)。結論 MYH9在大腸癌中表達上調，并且與腫瘤惡性臨床病理特征有關。

非肌肉肌球蛋白ⅡA；大腸癌；浸潤；轉移

(ChinJLabDiagn,2016,20:1652)

大腸癌(Colorectal cancer,CRC)是全球范圍內發病率和死亡率較高的疾病之一，總的五年生存率小于65%，并且一般疾病診斷時已處于晚期階段，導致治療成功率受到了很大的限制。有報道顯示，25%的患者診斷時已經發生了轉移[1]。探尋大腸癌特異性表達的標志物可以為大腸癌診治提供可靠的依據。本文著重研究MYH9，編碼非肌肉肌球蛋白重鏈IIA[2]。肌球蛋白超家族有15類，肌球蛋白II，是常規的雙頭肌球蛋白，可以形成兩級細絲，直接參與調節非肌肉細胞細胞質分裂，細胞運動及細胞形態。由于MYH9有助于細胞極化，連接，分離和轉移[3,4]，有研究指出MYH9在腫瘤細胞的遷移、侵襲和轉移中發揮重要作用[5,6]。且MYH9的過表達與食管癌、膀胱癌及胃癌的預后有直接關系[7-9]。Ken Katono等[10]研究表明MYH9在肺癌組織中高表達與瘤內血管浸潤及淋巴結轉移有關，并且可作為非小細胞肺癌預后的獨立危險因素,說明MYH9在腫瘤浸潤轉移及預后判斷方面具有一定的價值。但是，MYH9對人大腸癌細胞浸潤和轉移的影響尚不完全清楚，為了進一步研究MYH9蛋白表達與大腸癌的關系，本研究通過免疫組織化學方法檢測MYH9蛋白在90例大腸癌及相應癌旁組織中的表達，來探討MYH9在不同階段大腸癌中表達及其與臨床病理特征的相關性。

1 材料和方法

1.1 研究對象

本研究收集了2014年10月-2015年10月在吉林大學中日聯誼醫院因大腸癌住院接受手術治療的90例患者的大腸癌組織及相應癌旁組織，男60例，女30例，年齡30-81歲，中位年齡60歲，其中結腸癌59例，直腸癌31例。所有患者術前未行放、化療，術后有明確的病理診斷。切下的組織標本經甲醛固定，石蠟包埋制成3 μm厚的石蠟切片。脫蠟后用蘇木精和伊紅染色。

1.2 試劑

兔抗人MYH9蛋白單克隆抗體及免疫組織化學試劑盒購于美國cusabio公司。

1.3 方法

按試劑盒說明書操作。已明確MYH9蛋白表達陽性片作為陽性對照，用PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照。

1.4 結果判斷

結果判斷嚴格按照試劑盒說明書判斷標準執行：細胞胞漿中出現特異性免疫染色為陽性。A：按照顯色細胞比例記分，陽性細胞數占≤1/3為1分，陽性細胞數占1/3-2/3為2分，陽性細胞數比例≥2/3為3分。B：按照細胞顯色強度記分，無陽性反應細胞為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。積分數=A×B。積分數為0判斷為(-)，積分數1-2判斷為(+)，積分數3-4判斷為(++)，積分數6-9判斷為(+++)。

1.5 統計學分析

統計學分析用SPSS 18.0版本執行，組間比較采用U檢驗，χ2檢驗分析MYH9蛋白表達與大腸癌臨床病理特征的相關性。P值<0.05表明差異有統計學意義。

2 結果

2.1 MYH9在大腸癌及相應癌旁組織中表達

MYH9蛋白在大腸癌組織中陽性定位在胞漿中，以中等陽性為主。結果如圖1，統計學結果顯示，大腸癌組織中MYH9陽性表達率約88.9%(80/90)，而癌旁組織中MYH9陽性表達率約20.0%(18/90)，MYH9蛋白在大腸癌組織中陽性表達強度明顯高于癌旁組織(P<0.001)。見表1。

表1 MYH9在大腸癌及癌旁組織中的表達(例)

注：*P<0.001

2.2 MYH9表達與臨床病理特征的關系

大腸癌組織中MYH9蛋白表達情況與相應的臨床病理特征進行相關性分析，統計學結果顯示，結腸癌和直腸癌中MYH9蛋白表達差異無顯著性(χ2=0.197，P=0.657)。低TNM分期(Ⅰ+Ⅱ期)與高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期)MYH9蛋白差異有顯著性(χ2=10.87，P=0.001)。有淋巴結轉移的腫瘤組織與無淋巴結轉移的腫瘤組織中MYH9蛋白差異有顯著性(χ2=18.70，P<0.001)。低分化腫瘤與高中分化腫瘤組織中MYH9蛋白差異有顯著性(χ2=6.41，P=0.011)。MYH9蛋白表達情況與患者的年齡、性別、腫瘤類別無關(P>0.05)。見表2。

正常組織低倍鏡下觀察結果(200×)，大腸癌組織高倍鏡下觀察結果(200×)

3 討論

研究結果表明，MYH9在大腸癌中表達陽性率為88.9%(80/90)，并且其表達情況與臨床TNM分期及有無淋巴結轉移顯著相關，而與患者的年齡、性別、腫瘤類別無關。此結果與其在食管癌、膀胱癌及胃癌[7-9]中研究結果相一致。因此，MYH9的表達與患者預后直接相關，可以作為大腸癌患者獨立預后因素。

局部微環境浸潤是腫瘤轉移早期階段的重要步驟，MYH9有利于這種轉移需要的局部微環境入侵。有體外實驗表明，MYH9表達缺乏的細胞遷移能力弱[11]。板狀偽足結構對邊緣細胞遷移是必不可少的，而此結構由Rac、WAVE 復合物及Arp2/3復合物調控。近期，Morimura等研究表明MYH9對板狀偽足結構連接到WAVE2必不可少[12]。因此，MYH9表達可能與腫瘤細胞獲得侵襲和轉移能力有關，隨后導致腫瘤內淋巴血管侵襲以及較差的預后。此與本研究結果MYH9表達與有無淋巴結轉移顯著相關相一致。

表2 大腸癌組織中MYH9蛋白的表達與臨床病理特征的關系(n=90)

注：*P<0.001

本研究結果顯示MYH9表達與腫瘤分化程度顯著相關。低分化腫瘤以細胞質容易分裂為特征，在細胞質分裂時，細胞形成一個收縮環壓縮質膜形成兩個以胞質橋連接的子代細胞。MYH9有利于收縮環的收縮，在細胞質分裂中有重要作用[13]。因此，也驗證了本研究MYH9表達與腫瘤分化程度顯著相關。

綜上所述，MYH9在大腸癌組織中異常高表達，并且其表達水平與腫瘤TNM分期、有無淋巴結轉移及腫瘤細胞分化程度顯著相關。因此，MYH9有望成為大腸癌診斷及預后判斷的分子標志物。本研究僅僅采用免疫組化的方法對MYH9在大腸癌組織中的表達進行了研究，而在其他腫瘤及血清中的表達還需要進一步研究。

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[6]Derycke L,Stove C,Vercoutter-Edouart AS,et al.The role of non-muscle myosin IIA in aggregation and invasion of human MCF-7 breast cancer cells[J].Int J Dev Biol,2011,55:835.

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[10]Ken Katono,Yuichi Sato,Shi-Xu Jiang,et al.Prognostic Significance of MYH9 Expressionin Resected Non-Small Cell Lung Cancer[J].PLOS ONE,2015,10(3):1.

[11]Derycke L,Stove C,Vercoutter-Edouart AS,et al.The role of non-muscle myosin IIA in aggregation and invasion of human MCF-7 breast cancer cells[J].Int J Dev Biol,2011,55:835.

[12]Morimura S,Suzuki K,Takahashi K.Nonmuscle myosin IIA is required for lamellipodia formationthrough binding to WAVE2 and phosphatidylinositol 3,4,5-triphosphate[J].Biochem Biophys Res Commun,2011,404:834.

[13]Matsumura F.Regulation of myosin II during cytokinesis in higher eukaryotes[J].Trends Cell Biol,2005,15:371.

Expressions and significance of MYH9 in colorectal cancer

YANGSu-li,XIEFeng,SUNJing-chun,etal.

(DepartmentofClinicalLaboratory,China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity,Changchun130033,China)

Objective To establish the expressions and significance of MYH9 in colorectal cancer.Methods The expression of MYH9 were detected in 90 cases colorectal cancer and adjoining colorectal tissues by immunohistochemical method,and the relationship between MYH9 expression and the clinical pathological features were analyzed by Pearson chi-square test.Results MYH9 expression was significantly increased in colorectal cancer than adjoining colorectal tissues(P<0.05).Meanwhile,the expression of MYH9 in colorectal cancer was related to different TNM stages,lymphnode metastasis and tumor differentiation(P<0.05).But the expression of MYH9 had no relationship with patient’s age,sex and tumor types(P>0.05).Conclusion MYH9 expression was significantly increased in colorectal cancer,and had a closed relationship with the clinical pathological features.

MYH9;colorectal cancer;invasion;metastasis

吉林省科技發展項目(20140414005GH，20140311092YY，

1007-4287(2016)10-1652-03

R735.3+4

A

2016-01-15)

20150101153JC)

*通訊作者