HS-SPME-GC/MS法分析陰香葉中揮發(fā)性成分

石舒瑾崔麗麗王金梅*

（1.河南大學(xué)中藥研究所，河南開封 475004；2.河南省開封高級中學(xué)，河南開封 475003）

HS-SPME-GC/MS法分析陰香葉中揮發(fā)性成分

石舒瑾1，2崔麗麗1王金梅1*

（1.河南大學(xué)中藥研究所，河南開封 475004；2.河南省開封高級中學(xué)，河南開封 475003）

目的：分析陰香葉中揮發(fā)性成分。方法：采用頂空固相微萃取和氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)（HS-SPME-GC/MS），結(jié)合保留指數(shù)法并用峰面積歸一化法測定相對百分含量。結(jié)果：陰香葉中鑒定出9個揮發(fā)性成分，占總峰面積的89.87%。結(jié)論：葉中主要成分為β-水芹烯 （22.13%）、石竹烯 （18.67%）、γ-欖香烯 （15.09%）及D-檸檬烯 （12.39%）等。

陰香 揮發(fā)性成分 固相微萃取 氣質(zhì)聯(lián)用

陰香Cinnamomum burmannii （Nees et T. Nees） Blume為樟科樟屬植物，主要分布于海南、廣東、福建及云南等省［1］。陰香屬于多用途經(jīng)濟(jì)林木，其樹皮、葉和果實提取物是制造香精、肥皂等的原料［2］；果實中含有大量花色苷、原花青素等黃酮類成分［3-4］，具有較強(qiáng)的清除自由基能力［5］；葉提取物對多種植物病原菌具有抑制作用［6］，具有抗氧化活性［7］。

目前，國內(nèi)關(guān)于陰香葉揮發(fā)性成分的研究多采用GC技術(shù)或GC/MS技術(shù)［8-9］，本文采用HS-SPME-GC-MS方法快速分析陰香葉揮發(fā)性成分， 無需有機(jī)試劑、靈敏度高，以期為其化學(xué)成分和藥理活性的深入研究提供依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

GC 6890 N GC / 5975 MS 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）；手動固相微萃取（SPME）裝置（美國Supelco公司）；萃取頭為100 μm 聚二甲基硅氧烷 （PDMS-DVB，美國Supelco公司）。

1.2 試劑

C6-C26正構(gòu)烷烴（美國Alfa Aesar公司）。

1.3 藥材

陰香葉于2015年2月采集于海南省萬寧市，經(jīng)河南大學(xué)中藥研究所李昌勤教授鑒定為陰香（Cinnamomum burmannii）的葉，標(biāo)本存于河南大學(xué)天然藥物研究所。

2 方法與結(jié)果

2.1 頂空固相微萃取

使用前先將SPME 的萃取纖維頭在氣相色譜的進(jìn)樣口老化10 min，老化溫度為250℃，載氣體積流量為1.0ml/min。取陰香葉0.7 g，置于5ml進(jìn)樣瓶中，插入100μm PDMS-DVB萃取纖維頭，于50℃下頂空取樣30min后，取出后立即插入色譜儀進(jìn)樣口（溫度250 ℃）脫附1min。

2.2 GC/MS 分析條件

氣相色譜條件HP-5MS石英彈性毛細(xì)管柱（0.10μm×30.0m× 250μm），載氣為高純氦氣（99.999%），流速1.0 ml/min，進(jìn)樣口溫度250℃；色譜柱初始溫度50℃（保持2.0min），以4℃/min升溫至120℃（保持2 min），最后以6℃/min升溫至230℃（保持10min）。分流進(jìn)樣，分離比為10：1。

質(zhì)譜條件：電離方式：EI源，電離能量80eV；離子源溫度為230℃；四極桿溫度150℃；傳輸線溫度為280℃；電子倍增器電壓1588V。質(zhì)量掃描范圍m/z30-400，譜圖檢索：采用RTLPEST3.L和NIST08. L進(jìn)行檢索。

2.3 保留指數(shù)測定

按照文獻(xiàn)［10-11］，測定各組分的保留時間計算出各組分的Kovats保留指數(shù)。

2.4 結(jié)果

用HS-SPME-GC-MS技術(shù)，從陰香葉中鑒定出9個揮發(fā)性成分，占總峰面積的89.87%。具體結(jié)果見表1。

表 1 陰香葉中揮發(fā)性成分及相對百分含量Tab 1 Volatile compositions and relative content of C. burmannii leaves

3 結(jié)語

從表1可以看出，陰香葉中主要揮發(fā)性成分是β-水芹烯（22.13%）、石竹烯（18.67%）、γ-欖香烯（15.09%）及D-檸檬烯（12.39%），與已報道研究［12］相比，生長于海南萬寧地區(qū)的陰香葉中主要揮發(fā)性成分α-水芹烯、β-水芹烯、石竹烯及D-檸檬烯，含量明顯高于深圳產(chǎn)陰香。

陰香葉中β-水芹烯含量較高，達(dá)到22.13%。文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)，β-水芹烯對麥蛾、玉米象成蟲、赤擬谷盜成蟲等儲糧害蟲具有一定的毒殺作用［13］，其可能為陰香葉抑菌作用的主要活性成分。本文采用HS-SPME-GC/MS分析陰香葉中揮發(fā)性成分，樣品用量少，集采樣、萃取、濃縮、進(jìn)樣于一體，具有分析速度快、靈敏度高等優(yōu)點，是一種分析植物揮發(fā)性成分簡單可行的方法。

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［12］衣曉明，谷茂，陳飛鵬.陰香葉揮發(fā)性物質(zhì)的GC/MS分析［J］.深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報，2009，8（3）∶53.

［13］熊件妹，曹華國，任宇紅，等.人工合成β-水芹烯對幾種儲糧害蟲的毒力測定［J］.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2000，22（3）∶351.

OBJECTIVE： To assay the volatile constituents of C. burmannii. METHODS： The volatiles were analyzed by head-space solid microextraction， coupled with GC/MS and Kovats. RESULTS： There were 9 different kinds of volatile constituents in leaves of C. burmannii， 89.87% of the total essential constituents. CONCLUSIONS： The major volatile constituents of C. burmannii leaves were β-phellandrene （22.13%）， caryophyllene （18.67%）， γelemene （15.09%）， D-limonene （12.39%） and so on.

C. burmannii； volatile constituents； SPME； GC/MS